鹽酸多西環(huán)素黃芪多糖可溶性粉對人工感染雞慢性呼吸道病的療效試驗(yàn)

米同國，黃占欣，楊 建，孟志敏，李連缺

（1.河北工程大學(xué)農(nóng)學(xué)院，河北 邯鄲056021；2.江蘇省如東縣馬塘畜牧獸醫(yī)站，江蘇 如東226401）

雞毒支原體（MG）是雞和火雞的一種慢性呼吸道傳染病。病雞以喘氣、咳嗽、竇部腫脹、流鼻液和呼吸啰音為特征。病情發(fā)展緩慢、病程長，能在雞群中蔓延，世界各國均有發(fā)生，造成幼雞生長發(fā)育不良，母雞產(chǎn)蛋量降低。近年來,該病不斷增加,臨床常用藥物由于多年使用,已逐漸呈現(xiàn)出耐藥現(xiàn)象,療效不佳。因此,開發(fā)新型高效的動物專用抗支原體感染藥物勢在必行。鹽酸多西環(huán)素黃芪多糖可溶性粉是由河北省石家莊江山動物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，為了評價其對人工感染的雞慢性呼吸道病的治療效果，進(jìn)行了以下療效試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 藥品 鹽酸多西環(huán)素黃芪多糖可溶性粉，為鹽酸多西環(huán)素、黃芪多糖與適宜的輔料配制而成，規(guī)格為100 g∶10 g鹽酸多西環(huán)素∶10 g黃芪多糖，批號：20110310，由河北省石家莊江山動物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)。硫氰酸紅霉素可溶性粉：規(guī)格為100 g∶5克硫氰酸紅霉素，批號：20110512，由河北省石家莊某動物藥品廠生產(chǎn)。

1.2 菌種 雞毒支原體MG S6，購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。

1.3 試驗(yàn)動物 15日齡健康A(chǔ)A肉雞300只，體重均勻、血清學(xué)檢測無抗體，由河北省石家莊江山種禽公司提供。常規(guī)飼養(yǎng)，每籠1只，自由采食飲水，空白對照組和安全對照組分別與其他組分室隔離飼養(yǎng)。

1.4 培養(yǎng)基 KM2培養(yǎng)基：用于MG S6的培養(yǎng)，購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。血平板：按常規(guī)方法制備。

1.5 鹽酸多西環(huán)素黃芪多糖可溶性粉對人工誘發(fā)雞慢性呼吸道病的療效

1.5.1 試驗(yàn)動物分組與處理 將300只試驗(yàn)雛雞隨機(jī)分為6組,鹽酸多西環(huán)素黃芪多糖可溶性粉分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組，藥物對照組為硫氰酸紅霉素可溶性粉組，陽性對照組為感染不給藥組，空白對照組為健康對照組。分組情況及處理詳見表1。

表1 試驗(yàn)雞分組與處理

1.5.2 感染與治療 （1）人工感染：制備MG S6菌液，經(jīng)測定菌液濃度為3.5×109CFU／mL。除空白對照組外,各試驗(yàn)組雞左右胸氣囊各注射CFU為3.5×109/mL的MG S6菌液0.4mL，滴鼻0.5mL。人工感染后判定雞群發(fā)病指標(biāo)：①臨床癥狀；②氣囊、氣管、肺的剖檢病理變化和病理組織學(xué)檢查；③平均增重；④死亡率；⑤病原分離、鑒定；（2）治療與觀察：接種后試驗(yàn)雞出現(xiàn)呼吸道癥狀按表1方式給藥，連續(xù)給藥5 d，每日換水1次。觀察期為初次給藥當(dāng)日至第20天，每日觀察雞的各種臨床表現(xiàn)和死亡雞的病理剖檢變化。試驗(yàn)前和結(jié)束時，分別對雞稱重、氣囊病變記分和血清抗體檢測。

1.5.3 藥效評價指標(biāo)[1-3]（1）死亡率：凡在試驗(yàn)期間試驗(yàn)雞出現(xiàn)雞慢性呼吸道病典型癥狀并死亡,剖檢時有典型病變并分離培養(yǎng)出雞敗血支原體，則判斷為感染死亡,計算死亡率；（2）有效率：各組癥狀減輕及癥狀消失動物數(shù)所占百分比；（3）治愈率：經(jīng)用藥后精神、采食、飲水恢復(fù)正常，呼吸道癥狀消失，20 d后剖檢無明顯病變占試驗(yàn)雞數(shù)的百分比；（4）相對增重率：根據(jù)試驗(yàn)開始及結(jié)束時每只雞的體重，計算每組雞的平均增重，并計算相對增重率；（5）氣囊損傷減少率：剖檢后凡出現(xiàn)氣囊膜增厚、渾濁，內(nèi)有奶酪樣分泌物者均屬氣囊病變，對氣囊的損傷度按Lam等方法作病變等級記分；0分：無病變；2分：氣囊膜混濁；4分：氣囊膜變厚；6分：一個氣囊內(nèi)含有大量奶酪樣黏稠滲出物；8分：多個氣囊內(nèi)發(fā)現(xiàn)大量滲出物。根據(jù)平均每只雞的分?jǐn)?shù)計算氣囊損傷減少率。按下列公式計算：氣囊損傷減少率=(陽性對照雞平均氣囊損傷分值-試驗(yàn)雞平均氣囊損傷分值)÷陽性對照雞平均氣囊損傷分值×100%；（6）抗體反應(yīng)陽性率：測定雞血清中雞毒支原體抗體，計算抗體反應(yīng)陽性率。

1.5.4 數(shù)據(jù)分析 所得試驗(yàn)數(shù)據(jù)中，對增重指標(biāo)進(jìn)行t檢驗(yàn)，其余指標(biāo)均進(jìn)行卡方檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 病理模型復(fù)制 雞群接種2 d后陸續(xù)出現(xiàn)癥狀。隨著病情的加重，雞表現(xiàn)出典型的雞毒支原體病癥狀。攻毒后第6天開始出現(xiàn)死亡，剖檢死亡雞可見典型病變；對死亡雞進(jìn)行組織學(xué)檢查可見典型組織學(xué)變化；從感染雞的喉頭、氣管和肺臟中分離出微生物，經(jīng)生物學(xué)特性鑒定符合MG的生物學(xué)特性；對感染7 d后雞，采血進(jìn)行雞毒支原體平板凝集試驗(yàn)，結(jié)果呈陽性?？瞻讓φ战M雞臨床表現(xiàn)正常，剖檢無肉眼可見病變。表明該試驗(yàn)人工感染成功，符合試驗(yàn)需要。

2.2 藥物對人工感染雞的治療效果和增重情況結(jié)果見表2。

經(jīng)生物統(tǒng)計分析表2的治療結(jié)果,各用藥組與陽性對照組比較,均能顯著（P＜0.05）降低雛雞由于雞毒支原體感染引起的死亡。鹽酸多西環(huán)素黃芪多糖可溶性粉各劑量組與藥物對照組比較，有效率：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組與之差異皆顯著（P＜0.05），分別提高10%、12%、12%；治愈率：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組與之差異皆顯著（P＜0.05），分別提高16%、18%、18%。

表2 藥物對感染雞的治療效果及增重情況

用生物統(tǒng)計方法分析表2的增重結(jié)果,各用藥組雞的平均增重均低于空白對照組；各用藥組與陽性對照組相比較，各用藥組均能極顯著地（P＜0.01）提高雞的相對增重率；而鹽酸多西環(huán)素黃芪多糖可溶性粉各劑量組與藥物對照組相比較,Ⅱ、Ⅲ組與之差異皆顯著（P＜0.05），分別提高11.41%、12.94%；Ⅰ組效果比Ⅱ、Ⅲ組差些，與藥物對照組相比，僅提高了5.35%。

2.3 各組試驗(yàn)雞氣囊損傷度比較和雞毒支原體檢測結(jié)果 見表3。

表3 各組試驗(yàn)雞氣囊損傷度比較和雞毒支原體抗體檢測

用生物統(tǒng)計方法分析表3的雞氣囊損傷度減少率，各用藥組極顯著高于陽性對照組（P＜0.01），鹽酸多西環(huán)素黃芪多糖可溶性粉各劑量組與藥物對照組相比較,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組與之差異極顯著（P＜0.01），分別提高20.00%、24.29%、24.29%。

用生物統(tǒng)計方法分析表3的雞毒支原體抗體檢測率，與陽性對照組比較,各用藥組在降低雞體內(nèi)的雞毒支原體抗體方面均有較好的效果，鹽酸多西環(huán)素黃芪多糖可溶性粉各劑量組與藥物對照組相比較，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組與之差異極顯著（P＜0.01），分別降低30%、40%、40%。

3 小結(jié)

試驗(yàn)結(jié)果表明，鹽酸多西環(huán)素黃芪多糖可溶性粉對雞慢性呼吸道病具有很好的治療效果，用藥后能明顯提高感染雞的存活率、治愈率及平均增重，顯著降低氣囊的病理損傷程度及抗體檢出率，根據(jù)藥效評價指標(biāo)的綜合判斷，建議鹽酸多西環(huán)素黃芪多糖可溶性粉在飲水中的混合劑量為1.0 g/L水，連用5 d。

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