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    超高效液相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定豆芽 中多菌靈、2,4-二氯苯氧乙酸、恩諾沙星殘留

    2014-03-08 06:33:24曾紹東魏曉奕王明月李積華程盛華
    食品科學(xué) 2014年22期
    關(guān)鍵詞:恩諾沙星豆芽

    丁 麗,曾紹東,魏曉奕,王明月,李積華,*,程盛華

    (1.中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所,廣東 湛江 524001;2.農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品加工質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室, 廣東 湛江 524001)

    超高效液相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定豆芽 中多菌靈、2,4-二氯苯氧乙酸、恩諾沙星殘留

    丁 麗1,2,曾紹東2,魏曉奕1,王明月2,李積華1,*,程盛華1,2

    (1.中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所,廣東 湛江 524001;2.農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品加工質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室, 廣東 湛江 524001)

    建立豆芽中多菌靈、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-dichlorophenoxyacetic acid,2,4-D)、恩諾沙星殘留檢測(cè)的超高效液相色譜-質(zhì)譜的分析方法。樣品經(jīng)酸化乙腈提取,濃縮后經(jīng)WAX小柱凈化,采用Waters C18色譜柱分離,以甲醇和0.1%甲酸溶液為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫,采用電噴霧-正負(fù)離子多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式,外標(biāo)法定量。在5~150 μg/L的質(zhì)量濃度范圍內(nèi),各種添加劑相關(guān)系數(shù)均大于0.999 0,該方法的檢出限在0.5 μg/kg之間,定量限在1.5 μg/kg之間。添加5.0、10.0 μg/kg和25.0 μg/kg三個(gè)不同水平時(shí),多菌靈、2,4-D、恩諾沙星的回收率在80.4%~97.8%之間,日內(nèi)和日間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.25%~5.47%之間。該方法簡單、靈敏度高、分析時(shí)間短,適用于多菌靈、2,4-D、恩諾沙星的測(cè)定。

    超高效液相色譜-質(zhì)譜;多菌靈;2,4-D;恩諾沙星;殘留;豆芽

    豆芽又叫“活體蔬菜”、如意菜,是老百姓餐桌上最普通不過的蔬菜,其品種繁多、營養(yǎng)全面、風(fēng)味獨(dú)特、清香脆嫩,深受人們喜愛。豆芽的正常生產(chǎn)周期一般為4~5 d左右,一些不法商販為了提高豆芽產(chǎn)量和縮短生產(chǎn)周期,會(huì)在 豆芽上噴灑非法添加劑進(jìn)行催生,被催生的豆芽一般只需2 d便可出售,使用這種添加劑的豆芽胚軸會(huì)長得又長、又白、又嫩,極少有胚根的生發(fā),賣相較好。近期全國正在開展關(guān) 于打擊“毒豆芽”食品安全整頓行動(dòng),“毒豆芽”危害非常大,可以導(dǎo)致兒童發(fā)育早熟、女性生理改變、老年人骨質(zhì)疏松等,對(duì)人體有致癌、致畸形的作用,即使有些危害不會(huì)在短時(shí)間內(nèi)出現(xiàn),但是長久沉積必然會(huì)給健康帶來不利影響[1-8]。多菌靈、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-dichlorophenoxyacetic acid,2,4-D)、恩諾沙星在豆芽生產(chǎn)中作用各不相同:多菌靈可以殺死豆芽中的霉菌、細(xì)菌;2,4-D處理綠豆下胚軸可以促進(jìn)細(xì)胞恢復(fù)分裂能力,誘導(dǎo)根源發(fā)生,促進(jìn)不定根的生長;恩諾沙星是一種受孕的抗生素,使豆芽很白很嫩,主要是保鮮[9-14]。目前關(guān)于多菌靈、2,4-D、恩諾沙星的檢測(cè)方法及標(biāo)準(zhǔn)主要為氣相色譜法[15-19]、液相色譜法[20-24]、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法。氣相色譜和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用需要對(duì)2,4-D進(jìn)行衍生;液相色譜檢測(cè)方法干擾嚴(yán)重,以保留時(shí)間進(jìn)行定性,易出現(xiàn)假陽性。雖然有少量文獻(xiàn)報(bào)道了豆芽中添加劑的檢測(cè)方法,但多組分添加劑的國家檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)尚未建立,因此,選擇合適的提取方法和分析手段解決多組分添加劑的同時(shí)測(cè)定尤為重要。液相色譜-質(zhì)譜具有高靈敏度和高選擇性的優(yōu)勢(shì)增加了定性和定量的可靠性,是近年來常用的色譜檢測(cè)手段[25-41]。應(yīng)用液相色譜-質(zhì)譜技術(shù)測(cè)定豆芽中的添加劑,不僅可以實(shí)現(xiàn)多種添加劑的同時(shí)測(cè)定,而且可以對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行確證。

    本實(shí)驗(yàn)采用超高效液相色譜-質(zhì)譜(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLCMS-MS)技術(shù)對(duì)豆芽中多菌靈、2,4-D、恩諾沙星同時(shí)進(jìn)行分析測(cè)定。對(duì)前處理技術(shù)、儀器條件和方法學(xué)作了相關(guān)探討研究,應(yīng)用該技術(shù)分析豆芽中多種組分多菌靈、2,4-D、恩諾沙星殘留,具有簡單、靈敏度高、選擇性好、分析時(shí)間短、回收率高等優(yōu)點(diǎn),完全滿足日常檢測(cè)的需求。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    綠豆芽、黃豆芽、黑豆芽、豌豆芽均為市售,基質(zhì)豆芽為優(yōu)質(zhì)黃豆實(shí)驗(yàn)室不加添加劑培養(yǎng)。

    多菌靈(純度≥99.0%)、恩諾沙星(純度≥98.5%)標(biāo)準(zhǔn)品 德國Dr Ehrenstorfer公司;2,4-D標(biāo)準(zhǔn)品(純度≥99.9%) 德國Riedel-deHaen公司;甲醇、乙腈、甲酸、乙酸(均為色譜純) 美國Fisher公司;水為Milli-Q系統(tǒng)純化水;氯化鈉(分析純) 廣州試劑廠;酸化乙腈(V(乙酸)∶V(乙腈)=1∶100)。

    標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的配制:分別準(zhǔn)確稱取10 mg多菌靈、2,4-D、恩諾沙星標(biāo)準(zhǔn)品于10 mL棕色容量瓶中,用甲醇定容,配制成1 mg/mL的儲(chǔ)備液,密封儲(chǔ)存于-20 ℃冰箱中。

    混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液:分別吸取1 mg/mL的多菌靈、2,4-D、恩諾沙星標(biāo)準(zhǔn)溶液50 μL于10 mL棕色容量瓶中,用甲醇定容,配制成5 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,密封儲(chǔ)存于-20 ℃冰箱中。

    上機(jī)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液:用流動(dòng)相或者空白基質(zhì)配制系列上機(jī)質(zhì)量濃度,現(xiàn)配現(xiàn)用。

    1.2 儀器與設(shè)備

    AcquityTM超高效液相色譜儀和XevoTMTQ-MS質(zhì)譜儀(配有電噴霧電離(electrospray ionization,ESI)接口及Masslynx數(shù)據(jù)處理系統(tǒng))、固相萃取裝置 美國Waters公司;MilliQ超純水器 美國Millipore公司;高速離心機(jī) 日本Hitachi公司;電子天平 日本Shimadzu公司;N-Evap112氮?dú)獯蹈蓛x;IKA MS3渦旋混合器;IKA T25分散均漿機(jī)。

    1.3 方法

    1.3.1 色譜條件

    色譜柱:Waters ACQUITY UPLC BEH C18柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm);柱溫:35 ℃;樣品溫度:25 ℃;進(jìn)樣體積:5 μL;流速:0.3mL/min;流動(dòng)相:甲醇(A),0.1%甲酸溶液(B);洗脫程序:0~0.6 min,65%~30% B,0.6~2.5 min,30%~20% B,2.5~3.5 min,20%~50% B,3.6~3.8 min,50%~65% B,3.8~4.0 min,65%~65% B。

    1.3.2 質(zhì)譜條件

    離子源:ESI;掃描方式:2,4-D負(fù)離子模式,多菌靈、恩諾沙星正離子模式;檢測(cè)方式:多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(multiple reaction monitoring,MRM);毛細(xì)管電壓:2.50 kV;離子源溫度:150 ℃;脫溶劑氣溫度:500 ℃;脫溶劑氣流量:1 000 L/h。

    1.3.3 前處理方法

    1.3.3.1 提取

    稱取10 g粉碎試樣于50 mL離心管中,加入15 mL酸化乙腈(V(乙酸)∶V(乙腈)=1∶100)提取液,用均質(zhì)機(jī)以10 000 r/min均質(zhì)2 min,然后在4 ℃、8 000 r/min離心10 min,離心后取出上清液,再加入10 mL 酸化乙腈(V(乙酸)∶V(乙腈)=1∶100)提取液,渦旋3 min,重復(fù)上述操作,合并提取液,加入7 g NaCl,渦旋3 min,靜置30 min,分離上層有機(jī)相于50 mL燒杯中,在45 ℃條件下氮吹至近干,加5 mL水溶解殘?jiān)?,渦旋。

    1.3.3.2 凈化

    WAX柱用3 mL甲醇、3 mL水活化,將上述5 mL溶解液上樣,依次用3 mL水和3 mL 2%的甲酸溶液淋洗,抽至近干后,分別3.0 mL 5%的氨水-甲醇溶液洗脫,于45 ℃條件下氮吹至干,再加1 mL 0.1%甲酸-甲醇溶液溶解,渦旋混合1 min,過0.22 μm微孔濾膜后,于UPLC-MS-MS儀上分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 萃取溶劑的選擇

    為使各種豆芽有較好的提取效率,分別采用乙腈、甲醇、丙酮、二氯甲烷、酸化乙腈(V(乙酸)∶V(乙腈)=1∶100)作為萃取溶劑,其中丙酮、二氯甲烷提取雜質(zhì)較多,對(duì)環(huán)境污染大,特別是二氯甲烷,盡量減少使用;乙腈、甲醇對(duì)2,4-D提取回收率只有60%,乙酸-乙腈溶液的提取效果較好,當(dāng)乙酸-乙腈的體積比為1∶100時(shí),干擾物質(zhì)少,回收率高,因而采取酸化乙腈(V(乙酸)∶V(乙腈)=1∶100)溶液作為萃取溶劑。

    2.2 提取條件的選擇

    本實(shí)驗(yàn)比較超聲波、渦旋、均質(zhì)3 種不同的提取方式,通過回收率和實(shí)際樣品驗(yàn)證,3 種方式最優(yōu)條件下的回收率差別不大,但實(shí)際樣品中陽性含量有一定的差別,均質(zhì)方式測(cè)定豆芽中的多菌靈含量最高,分析原因,可能是添加藥物未滲透到樣品中,直接提取回收率影響不大,但是豆芽在生長過程中添加藥物,通過代謝進(jìn)入到組織,還有可能以不同化合物形態(tài)存在,均質(zhì)在10 000 r/min時(shí)能夠破碎組織中的細(xì)胞,使得藥物能過被充分提取。在一定量的提取溶劑情況下,少量多次提取效果比一次性加入溶劑提取,提取藥物效果要好很多,對(duì)恩諾沙星藥物尤為明顯。

    2.3 凈化條件的選擇

    圖1 5 種固相萃取小柱的凈化效果比較Fig.1 Comparison of the effectiveness of 5 different solid-phase extraction cartridges

    由于凈化效果對(duì)基質(zhì)效應(yīng)具有較大的影響,為了獲得較好的凈化效果,本實(shí)驗(yàn)分別選用C18、Florisil、NH2、WAX、Carb/NH2五種類型的固相萃取小柱,分別考察凈化效果和保留行為,由多菌靈、2,4-D、恩諾沙星在不同固相萃取小柱上的凈化效果(圖2)可知,WAX固相萃取小柱對(duì)多菌靈、2,4-D、恩諾沙星具有較好的吸附作用,凈化效果較好,從多菌靈、2,4-D、恩諾沙星的綜合保留與凈化效果來看,WAX固相萃取小柱比其他4 類固相萃取小柱更適合于多菌靈、2,4-D、恩諾沙星的保留與凈化,所以選擇WAX固相萃取小柱進(jìn)行凈化。

    2.4 色譜條件的優(yōu)化

    高效的色譜柱是多組分分析的前提條件,本實(shí)驗(yàn)比較選用Waters ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7 μm)色譜柱分離多菌靈、2,4-D、恩諾沙星,此色譜柱對(duì)各化合物具有較強(qiáng)地保留,各色譜峰峰形較好,并得到了有效地分離,減少了雜質(zhì)的干擾。

    分別選擇甲醇和乙腈作為強(qiáng)洗脫流動(dòng)相。實(shí)驗(yàn)證明:當(dāng)甲醇作流動(dòng)相時(shí),離子化受到不同程度的抑制,豐度明顯降低,導(dǎo)致靈敏度下降,而甲醇的離子化效率明顯優(yōu)于乙腈,故本實(shí)驗(yàn)采用甲醇強(qiáng)洗脫流動(dòng)相。在流動(dòng)相中加入 甲酸能增加2,4-D在ESI-模式下的離子化效率,改善2,4-D的峰形,而且甲酸的加入明顯地提高了洗脫效果,加快出峰時(shí)間。本實(shí)驗(yàn)分別配制0、0.1%、0.5%的甲酸溶液作為流動(dòng)相,經(jīng)實(shí)驗(yàn)表明0.1%的甲酸溶液體系能提供最佳離子化條件,峰面積信號(hào)最強(qiáng),靈敏度最高。圖2為多菌靈、2,4-D、恩諾沙星混合標(biāo)準(zhǔn)溶液、空白樣品和加標(biāo)樣品的MRM色譜圖。

    圖2 50 μg/L多菌靈、2,4-D、恩諾沙星的MRM色譜圖Fig.2 MRM chromatograms of 50 μg/L carbendazim, 2,4-D and enrofloxacin

    2.5 質(zhì)譜條件的優(yōu)化

    在電噴霧質(zhì)譜、正負(fù)離子監(jiān)測(cè)模式下,分別對(duì)毛細(xì)管電壓、錐孔電壓、碰撞能量和選擇離子等進(jìn)行了充分的優(yōu)化,選取經(jīng)碰撞后所得豐度較高的兩個(gè)子離子作為定量和定性離子,并確定最佳碰撞能量的電壓值。最終所選擇確定的母離子、子離子和碰撞能量等參數(shù)見表1。

    表1 多菌靈、2,4-D、恩諾沙星的質(zhì)譜分析參數(shù)Table 1 LC-MS-MS parameters for carbendazim, 2,4-D, and enrofloxacin

    2.6 方法學(xué)驗(yàn)證

    2.6.1 線性范圍和檢出限

    表2 多菌靈、2,4-D、恩諾沙星的線性方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限和定量限Table 2 Linear equations, correlation coefficients, LOD and LOQ of carbendazim, 2,4-D and enrofloxacin

    取質(zhì)量濃度分別為0、5、10、20、50、100、150 μg/L一系列基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液,以峰面積(y)對(duì)相應(yīng)的質(zhì)量濃度(x)作圖,得標(biāo)準(zhǔn)曲線,并求出相應(yīng)的線性回歸方程及相關(guān)系數(shù),結(jié)果見表2。結(jié)果表明:多菌靈、2,4-D、恩諾沙星在5~150 μg/L的質(zhì)量濃度范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)r均在0.999 0以上。按信噪比為3的條件下得到樣品中多菌靈、2,4-D、恩諾沙星的檢出限為0.5 μg/kg。按信噪比為3的條件下得到樣品中多菌靈、2,4-D、恩諾沙星的定量限為1.5 μg/kg。

    2.6.2 精密度和穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

    在陰性的黃豆芽樣品中添加10 μg/kg的多菌靈、2,4-D、恩諾沙星標(biāo)準(zhǔn)溶液 ,按1.3.3節(jié)方法進(jìn)行預(yù)處理,平行操作7 次,以黃豆芽基質(zhì)配制標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行校正分析,結(jié)果見表3,按日內(nèi)精密度的預(yù)處理 方法,多菌靈、2,4-D、恩諾沙星的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(relative standard deviation,RSD)范圍為1.25%~2.10%。按日間精密度的預(yù)處理方法,每天取樣1份,連續(xù)7 d測(cè)定,多菌靈、2,4-D、恩諾沙星的RSD范圍為3.16%~5.47%,結(jié)果表明,該實(shí)驗(yàn)重復(fù)性較好。

    表3 多菌靈、2,4-D、恩諾沙星的精密度結(jié)果Table 3 Precision (RSD) of the UPLC-MS-MS method %

    2.6.3 回收率實(shí)驗(yàn)

    分別在陰性的黃豆芽、綠豆芽、黑豆芽和豌豆芽樣品基質(zhì)中添加5、10、25 μg/kg三種不同水平的多菌靈、2,4-D、恩諾沙星標(biāo)準(zhǔn)溶液,以各種樣品基質(zhì)配制標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行校正分析,按1.3.3節(jié)方法進(jìn)行預(yù)處理,回收率見表4。結(jié)果表明:多菌靈回收率在85.5%~93.1%,2,4-D回收率在80.4%~88.6%,恩諾沙星回收率在88.6%~97.8%。

    表4 多菌靈、2,4-D、恩諾沙星的回收率結(jié)果(n=3)Table 4 Recovery rates of carbendazim, 2,4-D and enrofloxacin from spiked samples (n= 3)

    2.7 基質(zhì)效應(yīng)

    本實(shí)驗(yàn)采用固相萃取凈化的前處理程序以消除部分基質(zhì)效應(yīng)的影響,但是基質(zhì)效應(yīng)在藥物殘留分析中非常普遍,藥物和樣品本身的性質(zhì)都是影響基質(zhì)效應(yīng)的因素,因此,本實(shí)驗(yàn)分別用流動(dòng)相和空白樣品溶液稀釋了一系列的標(biāo)準(zhǔn)溶液,進(jìn)行液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜對(duì)比檢測(cè)。結(jié)果表明:多菌靈、2,4-D、恩諾沙星的基質(zhì)標(biāo)樣峰面積較流動(dòng)相標(biāo)樣的峰面積大,說明基質(zhì)對(duì)多菌靈、2,4-D、恩諾沙星存在一定的電離增大作用。因而,在實(shí)際樣品測(cè)試中,采用空白基質(zhì)提取液配制標(biāo)樣以消除基質(zhì)效應(yīng),不同種類豆芽的基質(zhì)效應(yīng)依次為黑豆芽>綠豆芽>黃豆芽>豌豆芽。多菌靈、2,4-D、恩諾沙星在甲醇和提取空白基質(zhì)中的標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖3。

    圖3 多菌靈、2,4-D、恩諾沙星在甲醇和提取空白基質(zhì)中的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖Fig.3 Calibration curves of carbendazim, 2,4-D and enrofloxacin in pure solvent (methanol) and blank matrix extract

    2.8 實(shí)際樣品測(cè)試

    在當(dāng)?shù)爻匈徺I20 批次豆芽(其中黃豆芽5 批、綠豆芽5 批、黑豆芽5 批、豌豆芽5 批)進(jìn)行分析測(cè)試,部分樣品發(fā)現(xiàn)多菌靈和恩諾沙星藥物,其中陽性豆芽中多菌靈的含量為16.73~124.66 μg/kg,陽性豆芽中恩諾沙星的含量為8.63~37.89 μg/kg,而2,4-D都檢出。

    3 結(jié) 論

    本實(shí)驗(yàn)建立了超高效液相色譜-質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定豆芽中多菌靈、2,4-D、恩諾沙星殘留量的分析方法。該方法具有靈敏度高,前處理方法簡單,回收率高且穩(wěn)定,準(zhǔn)確度和精密度高等優(yōu)點(diǎn),適用于多類豆芽中多菌靈、2,4-D、恩諾沙星殘留量的檢測(cè)和確證。此外,與傳統(tǒng)的液相色譜和氣相色譜檢測(cè)方法相比,串聯(lián)質(zhì)譜有效地降低了由儀器檢測(cè)所產(chǎn)生假陽性,保證了定性和定量結(jié)果的可靠性,而且液相色譜不能同時(shí)測(cè)定恩諾沙星和多菌靈,2,4-D用氣相色譜或氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定時(shí)需要衍生化。

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    Determination of Carbendazim, 2,4-D and Enrofloxacin Residues in Bean Sprouts by Ultra Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry

    DING Li1,2, ZENG Shao-dong2, WEI Xiao-yi1, WANG Ming-yue2, LI Ji-hua1,*, CHENG Sheng-hua1,2
    (1. Agricultural Products Processing Research Institute, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences, Zhanjiang 524001, China; 2. Laboratory of Quality and Safety Risk Assessment on Agro-products Processing, Ministry of Agriculture, Zhanjiang 524001, China)

    A method was established for determining carbendazim, 2,4-D, enrofloxacin residues in bean sprouts by ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (UPLC-MS-MS). Samples were extracted with acidified acetonitrile, and cleaned up on a WAX cartridge. Th e target analytes were separated on a Waters C18column with gradient elution using a mobile phase made up of methanol and 0.1% formic acid. Detection was carried out using positive/ negative electrospray ionization and multiple-reaction monitoring (MRM), and the external standard method was used for quantification. In the linear range of 5–150 μg/L, the correlation coefficients were all larger than 0.999 0 f or carbendazim, 2,4-D and enrofloxacin. The limits of detection (LODs) were 0.5 μg/kg and the limits of quantitation (LOQs) were 1.5 μg/kg. The recovery rates at three spiked levels of 5.0, 10.0 and 25.0 μg/kg were in the range of 80.4%–97.8%. The relative standard deviation (RSD) of intra-day and inter-day assays was 1.25%–5.47%. The method proved to be simple, sensitive, rapid and suitable for the determination of carbendazim, 2,4-D and enrofloxacin residues in bean sprouts.

    ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (UPLC-MS-MS); carbendazim; 2,4-D; enrofloxacin; residue; bean sprout

    O657.63

    A

    1002-6630(2014)22-0169-07

    10.7506/spkx1002-6630-201422032

    2014-01-16

    農(nóng)業(yè)部財(cái)政專項(xiàng),農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管(風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估)項(xiàng)目

    丁麗(1982—),女,助理研究員,碩士研究生,研究方向?yàn)槭称芳庸?。E-mail:gdzjding@hotmail.com

    *通信作者:李積華(1979—),男,研究員,博士,研究方向?yàn)槭称芳庸づc副產(chǎn)品綜合利用。E-mail:1105063165@qq.com

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