• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    幾種醇對(duì)Lipozyme RM IM催化卵磷脂乙醇解的影響及其工藝條件優(yōu)化

    2014-03-08 06:33:15馬嬌娜楊國(guó)龍陳素琴畢艷蘭
    食品科學(xué) 2014年22期
    關(guān)鍵詞:叔丁醇丙三醇卵磷脂

    馬嬌娜,楊國(guó)龍*,陳素琴,畢艷蘭,劉 偉

    (河南工業(yè)大學(xué)糧油食品學(xué)院,河南 鄭州 450001)

    幾種醇對(duì)Lipozyme RM IM催化卵磷脂乙醇解的影響及其工藝條件優(yōu)化

    馬嬌娜,楊國(guó)龍*,陳素琴,畢艷蘭,劉 偉

    (河南工業(yè)大學(xué)糧油食品學(xué)院,河南 鄭州 450001)

    研究脂肪酶Lipozyme RM IM催化大豆卵磷脂(phosphatidylcholine,PC)乙醇解反應(yīng)制備溶血卵磷脂(lysophosphatidylcholine,LPC)過(guò)程中其他幾種醇對(duì)PC乙醇解的影響,并對(duì)乙醇解條件進(jìn)行了優(yōu)化。發(fā)現(xiàn)正丁醇對(duì)PC乙醇解無(wú)明顯影響,叔丁醇對(duì)PC乙醇解有一定的抑制作用,1,2-丙二醇和丙三醇呈現(xiàn)較好的促進(jìn)作用。最后選用丙三醇作為乙醇解的促進(jìn)劑,通過(guò)響應(yīng)面分析法確定了無(wú)溶劑體系中Lipozyme RM IM催化PC醇解的最佳工藝條件為加酶量15%(以PC質(zhì)量計(jì),m/m)、反應(yīng)溫度28 ℃、加水量8%(水/乙醇溶液,V/V)、丙三醇10% (丙三醇/乙醇溶液,V/V)、底物質(zhì)量濃度1.49 g/mL(PC/乙醇溶液,m/V)、反應(yīng)時(shí)間11h,此條件下 LPC轉(zhuǎn)化率高達(dá)98.2%。實(shí)驗(yàn)證明,丙三醇對(duì)無(wú)溶劑體系中Lipozyme RM IM催化條件下的PC乙醇解反應(yīng)有很好的促進(jìn)作用。

    卵磷脂;Lipozyme RM IM;乙醇解;溶血卵磷脂

    由于磷脂親水親油平衡值較低,僅適用于做水/油型乳化劑,限制了其在很多行業(yè)中的應(yīng)用,因此國(guó)內(nèi)外很多學(xué)者都致力于磷脂的改性研究。其中,酶法改性因其有優(yōu)于物理改性和化學(xué)改性的諸多特點(diǎn),是國(guó)內(nèi)外磷脂改性研究的熱點(diǎn)。溶血磷脂的生產(chǎn),則是磷脂酶法改性技術(shù)的重要應(yīng)用。溶血磷脂在低pH值、高溫、高離子濃度及不同油水比環(huán)境下的乳化性和穩(wěn)定性都遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于普通磷脂,且因其在生理功能、表面活性和抗菌能力等方面的獨(dú)特性能,已被廣泛用于醫(yī)藥、食品、化妝品和飼料加工等領(lǐng)域[1-2]。

    在酶法生產(chǎn)溶血磷脂的研究中,以磷脂酶催化磷脂水解反應(yīng)居多。本實(shí)驗(yàn)采用來(lái)源廣泛、價(jià)格便宜的脂肪酶作為工具酶催化卵磷脂醇解制備溶血卵磷脂。目前酶促醇解反應(yīng)主要用于甘三酯制備生物柴油的研究[3-8],而磷脂的醇解反應(yīng)研究較少,因此有必要對(duì)其做深入研究。另有報(bào)道表明,脂肪酶在不同醇中的反應(yīng)活性不同,且不同醇的組合會(huì)對(duì)酯交換反應(yīng)產(chǎn)生協(xié)同作用[9]。因此,本實(shí)驗(yàn)選用醇解法對(duì)磷脂進(jìn)行酶法改性,并研究醇的相互作用對(duì)醇解反應(yīng)的影響,以期尋求最優(yōu)反應(yīng)條件,達(dá)到提高溶血磷脂產(chǎn)率的目的,為拓展磷脂的應(yīng)用領(lǐng)域提供一定的理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    大豆卵磷脂(phosphatidylcholine,PC,純度>97%) 沈陽(yáng)天峰生物工程技術(shù)有限公司;脂肪酶Lipozyme RM IM 諾維信公司;三氯甲烷、甲醇為色譜純;無(wú)水乙醇、正丁醇、叔丁醇、1,2-丙二醇、丙三醇等試劑均為分析純,使用前經(jīng)分子篩脫水處理。

    1.2 儀器與設(shè)備

    MK-6S棒狀薄層色譜分析儀 日本三菱公司;BSA224S電子天平(最大稱量220 g,感量0.000 1 g)賽多利斯科學(xué)儀器有限公司;DF-101Z集熱式恒溫加熱磁力攪拌器 鞏義市京華儀器有限責(zé)任公司。

    1.3 方法

    1.3.1 脂肪酶Lipozyme RM IM催化卵磷脂醇解制備溶血卵磷脂

    精確稱取一定量的卵磷脂,加入一定體積的醇溶液充分溶解,在恒溫磁力攪拌器中穩(wěn)定20 min后,加入適量脂肪酶,醇解反應(yīng)開(kāi)始,定時(shí)取樣進(jìn)行檢測(cè)分析。

    1.3.2 PC及其醇解產(chǎn)物的組成分析

    采用棒狀薄層色譜-氫火焰離子化檢測(cè)器分析PC及其醇解產(chǎn)物中PC、溶血卵磷脂(lysophosphatidylcholine,LPC)、甘油磷脂酰膽堿(glycerylphosphorylcholine,GPC)及其他物質(zhì)的相對(duì)含量(質(zhì)量分?jǐn)?shù))。將PC或醇解產(chǎn)物溶解于三氯甲烷中,配制成質(zhì)量濃度為10~20 mg/mL的溶液,取1 μL溶液點(diǎn)于薄層色譜棒上,在溶劑體系下展開(kāi)后在90 ℃紅外烘箱中干燥5 min,然后進(jìn)行檢測(cè)分析。展開(kāi)液為:CHCl3-CH3OH-H2O(42∶22∶2.5,V/V)。檢測(cè)條件:氫氣流速100mL/min;空氣流速1.5 L/min;掃描速率30 s/棒。

    1.3.3 LPC轉(zhuǎn)化率計(jì)算

    式中:w為質(zhì)量分?jǐn)?shù)。

    1.3.4 響應(yīng)面優(yōu)化分析

    在研究其他醇對(duì)PC乙醇解的影響的單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,找出促進(jìn)作用較好的醇,對(duì)反應(yīng)條件進(jìn)行優(yōu)化。以LPC轉(zhuǎn)化率作為響應(yīng)值,根據(jù)響應(yīng)面法Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理,運(yùn)用Design-Expert 8.0進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 無(wú)溶劑體系下其他醇對(duì)Lipozyme RM IM催化卵磷脂乙醇解的影響

    卵磷脂在乙醇中具有極好的溶解性,乙醇作為反應(yīng)底物的同時(shí),也可為卵磷脂的醇解提供反應(yīng)體系。無(wú)溶劑體系中進(jìn)行的酶催化反應(yīng),產(chǎn)物容易進(jìn)一步精制純化。參考前期研究的結(jié)果[10],確定無(wú)溶劑體系下酶促卵磷脂乙醇解的反應(yīng)條件為:加酶量15%(m/m)、反應(yīng)溫度30 ℃、底物質(zhì)量濃度2 g/mL(PC/醇溶液,m/V),加水量8%(水/醇溶液,V/V)。在卵磷脂乙醇解最優(yōu)條件的基礎(chǔ)上,考察無(wú)溶劑體系中其他醇對(duì)卵磷脂乙醇解的影響。X醇(正丁醇、叔丁醇、1,2-丙二醇和丙三醇)與乙醇的比例為X醇的體積分?jǐn)?shù),即其占醇溶液總體積的百分比。

    2.1.1 正丁醇對(duì)PC乙醇解反應(yīng)的影響

    圖1 正丁醇對(duì)PC乙醇解中LPC轉(zhuǎn)化率的影響Fig.1 Effect of n-butanol on the conversion of LPC during ethanolysis of PC

    有研究[11-12]使用正丁醇作為油脂醇解底物,進(jìn)行酯交換反應(yīng)。本實(shí)驗(yàn)嘗試考察了正丁醇對(duì)卵磷脂乙醇解反應(yīng)的影響,發(fā)現(xiàn)添加正丁醇體積分?jǐn)?shù)為10%和20%時(shí),乙醇解過(guò)程中LPC轉(zhuǎn)化率隨時(shí)間變化趨勢(shì)與不添加正丁醇的乙醇解一致(圖1),反應(yīng)于16 h達(dá)到平衡,LPC轉(zhuǎn)化率達(dá)到92%,正丁醇對(duì)卵磷脂乙醇解無(wú)影響。Rodrigues等[13]研究無(wú)溶劑體系下幾種脂肪酶催化甘三酯與短碳鏈醇的酯交換反應(yīng)時(shí)發(fā)現(xiàn):Lipozyme RM IM在甲醇、乙醇等低分子質(zhì)量醇中易失活,而在正丁醇中轉(zhuǎn)化率較高。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與之相異可能是由于底物不同所致,卵磷脂的極性比甘三酯大,在乙醇中溶解性很好,從而減弱了乙醇對(duì)脂肪酶的失活效果,同時(shí)也削弱了正丁醇的促進(jìn)作用。且正丁醇與乙醇都為直鏈結(jié)構(gòu),雖然其碳鏈長(zhǎng)度較乙醇略有增長(zhǎng),但在最適宜乙醇解條件下其分子動(dòng)能與傳質(zhì)能力并未受到因分子體積增大帶來(lái)的抑制作用,底物分子間的結(jié)合機(jī)率未受到影響,故正丁醇與乙醇間未表現(xiàn)出明顯的相互作用。

    2.1.2 叔丁醇對(duì)PC乙醇解反應(yīng)的影響

    隨著醇溶液中叔丁醇比例的增加,醇解反應(yīng)速率逐漸降低,對(duì)反應(yīng)呈現(xiàn)抑制作用(圖2)。近年來(lái),叔丁醇在酶促油脂酯交換制備生物柴油的研究中備受重視[14-15]。由于甲醇、乙醇等短碳鏈醇在油脂中的溶解性不好而易使酶失活[16],且甘三酯的醇解反應(yīng)產(chǎn)物——甘油對(duì)酶有毒害作用[17]。叔丁醇因其對(duì)甘油的溶解性較好,有助于酶的激活并使固定化脂肪酶穩(wěn)定性增強(qiáng),還可用作酶的前處理及再利用時(shí)的清洗,而被用作酶促酯交換的反應(yīng)介質(zhì)[18-20]。本研究中叔丁醇對(duì)卵磷脂乙醇解呈現(xiàn)抑制作用,與甘三酯醇解中叔丁醇所表現(xiàn)出的積極作用相反,可能是因?yàn)榈孜锏牟煌?,卵磷脂比甘三酯極性大,對(duì)乙醇的溶解性好,且反應(yīng)過(guò)程中無(wú)甘油產(chǎn)生,叔丁醇對(duì)甘三酯醇解的促進(jìn)作用在此無(wú)法體現(xiàn)。而且,由于叔丁醇的空間結(jié)構(gòu)使得羥基受到位阻的影響,叔丁醇羥基與卵磷脂分子的碰撞機(jī)率減少,底物與酶的結(jié)合也受到影響。叔丁醇對(duì)卵磷脂乙醇解表現(xiàn)出抑制作用。

    圖2 叔丁醇對(duì)PC乙醇解中LPC轉(zhuǎn)化率的影響Fig.2 Effect of t-butanol on the conversion of LPC during ethanolysis of PC

    2.1.3 1,2-丙二醇對(duì)PC乙醇解反應(yīng)的影響

    圖3 1,2-丙二醇對(duì)PC乙醇解中LPC轉(zhuǎn)化率的影響Fig.3 Effect of 1,2-propanediol on the conversion of LPC during ethanolysis of PC

    向乙醇溶液中添加體積分?jǐn)?shù)為10%和15%的1,2-丙二醇后,醇解反應(yīng)速率逐步增加,達(dá)到反應(yīng)平衡所用時(shí)間縮短,且產(chǎn)品得率有所提升(圖3)。添加20%的丙二醇的醇解反應(yīng)趨勢(shì)與15%時(shí)差別不大,反應(yīng)于12h接近平衡,LPC轉(zhuǎn)化率達(dá)95%。1,2-丙二醇對(duì)卵磷脂乙醇解反應(yīng)表現(xiàn)出較好的促進(jìn)作用,可能是因?yàn)楸甲鳛槎?,與卵磷脂都是極性物質(zhì),且其極性比乙醇大,對(duì)體系中微量水有很好的溶解性和分散性,可能會(huì)有效調(diào)節(jié)水與酶的接觸[21]。

    2.1.4 丙三醇對(duì)PC乙醇解反應(yīng)的影響

    圖4 丙三醇對(duì)PC乙醇解中LPC轉(zhuǎn)化率的影響Fig.4 Effect of glycerol on the conversion of LPC during ethanolysis of PC

    向反應(yīng)體系中加入體積分?jǐn)?shù)為5%和10%的丙三醇后,醇解反應(yīng)速率明顯提升,產(chǎn)品得率顯著增加;反應(yīng)于10h達(dá)到平衡,LPC轉(zhuǎn)化率達(dá)96%(圖4)。許多報(bào)道研究[22-26]指出脂肪酶催化甘三酯制備生物柴油時(shí),甘油在油中難溶,易吸附于固定化酶表面而對(duì)酶的活性及穩(wěn)定性產(chǎn)生影響。本實(shí)驗(yàn)中丙三醇不僅未表現(xiàn)出抑制作用反而有促進(jìn)作用,是因?yàn)楸寄軌蜉^好地分散于卵磷脂、乙醇和溶血卵磷脂組成的混合體系中,丙三醇很難與固定化脂肪酶發(fā)生強(qiáng)的相互作用從而堵塞固定化酶的多孔性通道。丙三醇也可能會(huì)使微量水分保留在脂肪酶周圍,有助于激活并穩(wěn)定固定化脂肪酶[27]。加入20%的丙三醇后,反應(yīng)速率有所提升,但產(chǎn)品最終得率與加入10%丙三醇時(shí)一致,因加入過(guò)多的丙三醇,底物已經(jīng)達(dá)到飽和,且其極性對(duì)酶有不利影響,丙三醇對(duì)反應(yīng)的促進(jìn)作用保持穩(wěn)定??傊?,無(wú)溶劑體系下丙三醇對(duì)Lipozyme RM IM催化的卵磷脂乙醇解有顯著的促進(jìn)作用。

    2.2 響應(yīng)面優(yōu)化分析

    通過(guò)對(duì)無(wú)溶劑體系下其他醇對(duì)Lipozyme RM IM催化卵磷脂乙醇解影響的考察,發(fā)現(xiàn)1,2-丙二醇和丙三醇對(duì)卵磷脂的乙醇解反應(yīng)有促進(jìn)作用。綜合考慮兩者的價(jià)格及所需添加比例,選擇丙三醇體積分?jǐn)?shù)為10%的乙醇溶液進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)。

    表1 Lipozyme RM IM催化醇解反應(yīng)試驗(yàn)因素與水平Table 1 Factors and levels used in the experimental design for Lipozyme RM IM catalyzed ethanolysis of PC

    以LPC轉(zhuǎn)化率為響應(yīng)值,選取對(duì)其影響較大的3 個(gè)因素變量做三因素三水平響應(yīng)面試驗(yàn)。固定其他反應(yīng)條件為:加酶量15%(m/m)、加水量為醇溶液總體積的8%、丙三醇占醇溶液總體積10%。試驗(yàn)因素水平見(jiàn)表1,響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見(jiàn)表2。

    各因素經(jīng)二次多項(xiàng)回歸擬合后,得到回歸方程:LPC轉(zhuǎn)化率=95.91-1.76A-0.61B+15.48C+17.49AB-4.48AC+1.68BC-10.63A2-10.93B2-7.99C2。

    表2 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果Table 2 Experimental design and results

    從表3可知,回歸方程極顯著。相關(guān)系數(shù)R2=0.984 2,說(shuō)明響應(yīng)值的變化有98.42%來(lái)源于所選變量,即反應(yīng)溫度、底物質(zhì)量濃度和反應(yīng)時(shí)間。因此,回歸方程可較好地描述各因素與響應(yīng)值之間的關(guān)系。當(dāng)P值小于0.05時(shí),表示該因素對(duì)響應(yīng)值變化的影響是顯著的。由方差分析表可知,因素C、AB、AC、B2、C2是顯著的,表明各試驗(yàn)因素對(duì)響應(yīng)值變化的影響并不是簡(jiǎn)單的線性關(guān)系。

    表3 LPC轉(zhuǎn)化率模型方差分析Table 3 Analysis of variance for the regression model describing LPC conversion

    圖5~7可直觀反應(yīng)各因素間的交互作用對(duì)LPC轉(zhuǎn)化率的影響。通過(guò)比較可以發(fā)現(xiàn),反應(yīng)時(shí)間和底物質(zhì)量濃度的交互作用影響不顯著,反應(yīng)溫度和反應(yīng)時(shí)間、反應(yīng)溫度和底物質(zhì)量濃度的交互作用影響顯著。

    圖5 反應(yīng)溫度和底物質(zhì)量濃度交互作用對(duì)LPC轉(zhuǎn)化率的影響Fig.5 Interaction between temperature and substrate concentration on LPC conversion

    圖6 反應(yīng)溫度和反應(yīng)時(shí)間交互作用對(duì)LPC轉(zhuǎn)化率的影響Fig.6 Interaction between reaction temperature and time on LPC conversion

    圖7 反應(yīng)時(shí)間和底物質(zhì)量濃度交互作用對(duì)LPC轉(zhuǎn)化率的影響Fig.7 Interaction between reaction time and substrate concentration on LPC conversion

    以LPC轉(zhuǎn)化率最大化為目標(biāo),運(yùn)用回歸模型分析得到最佳反應(yīng)條件為:反應(yīng)溫度27.92 ℃、底物質(zhì)量濃度1.49 g/mL、反應(yīng)時(shí)間10.99 h。在此條件下LPC轉(zhuǎn)化率理論值為98.6%??紤]到實(shí)際操作的可能性,將工藝條件確定為:反應(yīng)溫度28 ℃、底物質(zhì)量濃度1.49 g/mL、反應(yīng)時(shí)間11 h。按此條件進(jìn)行平行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),得LPC轉(zhuǎn)化率平均值為98.2%,與理論值相差不大。因此,基于響應(yīng)面分析法得到的優(yōu)化工藝條件可靠,有一定的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

    3 結(jié) 論

    無(wú)溶劑體系下Lipozyme RM IM催化PC乙醇解的過(guò)程中,正丁醇對(duì)PC乙醇解無(wú)明顯影響,叔丁醇對(duì)PC乙醇解有一定的抑制作用,1,2-丙二醇和丙三醇呈現(xiàn)較好的促進(jìn)作用。最后選用丙三醇與乙醇進(jìn)行協(xié)同作用,通過(guò)響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)確定了無(wú)溶劑體系中Lipozyme RM IM催化PC醇解的最佳工藝條件為加酶量15%(m/m)、反應(yīng)溫度28℃、加水量8%(水/醇溶液,V/V)、丙三醇10%(丙三醇/醇溶液,V/V)、底物質(zhì)量濃度1.49 g/mL(PC/醇溶液,m/V)、反應(yīng)時(shí)間11 h,此條件下LPC轉(zhuǎn)化率為98.2%。實(shí)驗(yàn)證明,利用丙三醇可以使Lipozyme RM IM催化的卵磷脂乙醇解反應(yīng)速率明顯提升,且產(chǎn)品得率得以顯著增加,可為溶血磷脂的生產(chǎn)提供一定參考,但其產(chǎn)生協(xié)同作用的具體機(jī)理還有待深入研究。

    [1] 劉曄, 裘愛(ài)泳. 溶血磷脂的性能研究[J]. 中國(guó)油脂, 1999, 24(5): 48-50.

    [2] 潘麗, 谷克仁, 常振剛. 溶血磷脂乳化穩(wěn)定性研究[J]. 糧食與油脂, 2007, 21(3): 23-25.

    [3] ARANSIOLA E F. Lipase catalysed ethanolysis of Jatropha oil for biodiesel production[J]. Energy and Environment Research, 2013, 3(1): 85-92.

    [4] BERNARDES O L, BEVILAQUA J V, LEAL M C, et al. Biodiesel fuel production by the transesterification reaction of soybean oil using immobilized lipase[J]. Applied Biochemistry and Biotecnology, 2007, 136/140(1): 105-114.

    [5] SHIMADA Y, WATANABE Y, SUGIHARA A, et al. Enzymatic alcoholysis for biodiesel fuel production and application of the reaction to oil processing[J]. Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic, 2002, 17(3): 133-142.

    [6] FAN Xiaohu, NIEHUS X, SANDOVAL G. Lipases as biocatalyst for biodiesel production[M]. London: Humana Press, 2012: 471-483.

    [7] DU Wei, XU Yuanyuan, LIU Dehua, et al. Comparative study on lipase-catalyzed transformation of soybean oil for biodiesel production with different acyl acceptors[J]. Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic, 2004, 30(3/4): 125-129.

    [8] SHAH S, SHARMA S, GUPTA M. Biodiesel preparation by lipasecatalyzed transesterification of Jatropha oil[J]. Energy and Fuels, 2004, 18(1): 154-159.

    [9] KIM M, DIMAGGIO C, YAN S, et al. The synergistic effect of alcohol mixtures on transesterification of soybean oil using homogeneous and heterogeneous catalysts[J]. Applied Catalysis A: General, 2010, 378(2): 134-143.

    [10] 王渝鷺, 楊國(guó)龍, 畢艷蘭, 等. Lipozyme RM IM催化大豆卵磷脂乙醇解制備溶血卵磷脂[J]. 河南工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào): 自然科學(xué)版, 2012, 33(2): 35-38.

    [11] DOSSAT V, COMBES D, MARTY A. Lipase-catalysed transesterification of high oleic sunflower oil[J]. Enzyme and Microbial Technology, 2002, 30(1): 90-94.

    [12] ISO M, CHEN B, EGUCHI M, et al. Production of biodiesel fuel from triglycerides and alcohol using immobilized lipase[J]. Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic, 2001, 16(1): 53-58.

    [13] RODRIGUES R C, VOLPATO G, WADA K, et al. Enzymatic synthesis of biodiesel from transesterification reactions of vegetable oils and short chain alcohols[J]. Journal of the American Oil Chemists’Society, 2008, 85(10): 925-930.

    [14] HALIM S F, KAMARUDDIN A H, FERNANDO W. Continuous biosynthesis of biodiesel from waste cooking palm oil in a packed bed reactor: optimization using response surface methodology (RSM) and mass transfer studies[J]. Bioresource Technology, 2009, 100(2): 710-716.

    [15] 李堂. 脂肪酶催化菜籽油乙醇解制備生物柴油[D]. 湘潭: 湖南科技大學(xué), 2007: 42-54.

    [16] MATASSOLI A L, CORRˉA I N, PORTILHO M F, et al. Enzymatic synthesis of biodiesel via alcoholysis of palm oil[J]. Applied Biochemistry and Biotechnology, 2009, 155(1/3): 44-52.

    [17] SHAW J F, WANG D L. Lipase-catalysed ethanolysis and isopropanolysis of triglycerides with long-chain fatty acids[J]. Enzyme and Microbial Technology, 1991, 13(7): 544-546.

    [18] ROYON D, DAZ M, ELLENRIEDER G, et al. Enzymatic production of biodiesel from cotton seed oil using t-butanol as a solvent[J]. Bioresoure Technology, 2007, 98(3): 648-653.

    [19] FJERBAEK L, CHRISTENSEN K V, NORDDAHL B. A review of the current state of biodiesel production using enzymatic transesterification[J]. Biotechnology and Bioengineering, 2009, 102(5): 1298-1315.

    [20] CHEN J W, WU Wenteng. Regeneration of immobilized Candida antarctica lipase for transesterification[J]. Journal of Bioscience and Bioengineering, 2003, 95(5): 466-469.

    [21] HASS M J, SCOTT K M. Diesel fuel as a solvent for the lipase-catalyzed aicoholysis of triglycerides and phosphatidylcholine[J]. Journal of the American Oil Chemists’ Society, 1996, 73(11): 1497-1504.

    [22] LI Lilin, DU Wei, LIU Dehua, et al. Lipase-catalyzed transesterification of rapeseed oils for biodiesel production with a novel organic solvent as the reaction medium[J]. Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic, 2006, 43(1/4): 58-62.

    [23] DIZGE N, KESKINLER B. Enzymatic production of biodiesel from canola oil using immobilized lipase[J]. Biomass Bioenergy, 2008, 32(12): 1274-1278.

    [24] DOSSAT V, COMBES D, MARTY A. Continuous enzymatic transesterification of high oleic sunflower oil in a packed bed reactor: influence of the glycerol production[J]. Enzyme and Microbial Technology, 1999, 25(3): 194-200.

    [25] DU Wei, XU Yuanyuan, LIU Dehua. Lipase-catalysed transesterification of soya bean oil for biodiesel production during continuous batch operation[J]. Biotechnology and Applied Biochemistry, 2003, 38(2): 103-106.

    [26] BAKO B K, KOVACS F, GUBICZA L, et al. Enzymatic biodiesel production from sunflower oil by Candida antarctica lipase in a solvent-free system[J]. Biocatalysis and Biotransformation, 2002, 20(6): 437-439.

    [27] SIM J H, KAMARUDDIN A H, BHATIA S. Biodiesel (FAME) productivity, catalytic efficiency and thermal stability of Lipozyme TL IM for crude palm oil transesterification with methanol[J]. Journal of the American Oil Chemists’ Society, 2010, 87(9): 1027-1034.

    Effect of Other Alcohols on Lipozyme RM IM-Catalyzed Ethanolysis of Phosphatidylcholine and Optimization of the Ethanolysis Process

    MA Jiao-na, YANG Guo-long*, CHEN Su-qin, BI Yan-lan, LIU Wei
    (School of Food Science and Technology, Henan University of Technology, Zhengzhou 450001, China)

    The effects of other alcohols on the Lipozyme RM IM-catalyzed ethanolysis of soy phosphatidylcholine (PC) for the preparation of lysophosphatidylcholine (LPC) were studied and the ethanolysis conditions were optimized. The results showed that n-butanol had no significant synergistic or inhibitory effect on the ethanolysis of PC, while tert-butanol displayed an inhibitory effect, and 1,2-propylene glycol and glycerol exhibited a significant synergistic effect. Glycerol was chosen as the synergistic agent for PC ethanolysis. The optimal conditions for the ethanolysis catalyzed by Lipozyme RM IM in solvent-free system were obtained by response surface methodology as follows: lipase dosage, 15% (based on the mass of PC); temperature, 28 ℃; ratio of water to ethanol solution, 8% (V/V); ratio of glycerol to ethanol solution, 10% (V/V); substrate concentration, 1.49 g/mL (PC/ethanol solution ratio, m/V), and reaction time, 11 h. Under these conditions, the conversion rate of LPC was 98.2%. Glycerol exhibited a significant synergistic effect on the ethanolysis of PC.

    phosphatidylcholine; Lipozyme RM IM; ethanolysis; lysophosphatidylcholine

    TS201.2

    A

    1002-6630(2014)22-0092-05

    10.7506/spkx1002-6630-201422017

    2014-04-08

    河南省高等學(xué)校青年骨干教師資助計(jì)劃項(xiàng)目(2011GGJS-079);河南工業(yè)大學(xué)研究生教育創(chuàng)新計(jì)劃項(xiàng)目(2012YJCX10)

    馬嬌娜(1988—),女,碩士研究生,研究方向?yàn)橹|(zhì)生物改性。E-mail:13592547284@163.com

    *通信作者:楊國(guó)龍(1974—),男,副教授,博士,研究方向?yàn)橹|(zhì)化學(xué)與生物技術(shù)。E-mail:ygl88888@haut.edu.cn

    猜你喜歡
    叔丁醇丙三醇卵磷脂
    Au/Co3O4-ZnO催化劑上CO2-丙三醇羰基化合成丙三醇碳酸酯
    高效減排環(huán)己酮氨肟化技術(shù)的開(kāi)發(fā)及其工業(yè)化應(yīng)用
    葉絲氣流干燥過(guò)程中水分和丙三醇遷移特性
    煙草科技(2022年11期)2022-12-20 05:58:40
    氨肟化裝置叔丁醇回收系統(tǒng)雙效精餾的節(jié)能改造
    丙三醇制丙三醇碳酸酯催化研究進(jìn)展
    遼寧化工(2021年8期)2021-09-07 09:14:46
    氣相色譜法快速測(cè)定環(huán)境水中叔丁醇的含量
    卵磷脂/果膠鋅凝膠球在3種緩沖液中的釋放行為
    中成藥(2018年6期)2018-07-11 03:01:12
    丙三醇對(duì)氧化鋁陶瓷支撐體性能的影響
    提高雞蛋卵磷脂含量的調(diào)控措施及其機(jī)制
    廣東飼料(2016年7期)2016-12-01 03:43:35
    環(huán)己烷-叔丁醇-水共沸精餾模擬研究
    天津化工(2015年4期)2015-12-26 08:11:47
    免费一级毛片在线播放高清视频 | 久久婷婷人人爽人人干人人爱 | 69精品国产乱码久久久| 精品欧美国产一区二区三| 狠狠狠狠99中文字幕| 日韩三级视频一区二区三区| 精品乱码久久久久久99久播| 日韩欧美一区视频在线观看| av中文乱码字幕在线| 国产精品综合久久久久久久免费 | 88av欧美| 久久精品人人爽人人爽视色| 一边摸一边抽搐一进一小说| 人人妻人人澡人人看| av天堂久久9| 又黄又爽又免费观看的视频| 国产精品综合久久久久久久免费 | 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 精品久久久久久成人av| 色婷婷久久久亚洲欧美| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 91成年电影在线观看| 成人手机av| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 欧美日本视频| 亚洲欧美日韩无卡精品| 久久人妻熟女aⅴ| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 亚洲 欧美一区二区三区| 在线观看免费视频日本深夜| 国产主播在线观看一区二区| 日本 欧美在线| 精品欧美一区二区三区在线| 亚洲一区中文字幕在线| 精品人妻在线不人妻| 18禁美女被吸乳视频| 极品人妻少妇av视频| 脱女人内裤的视频| 老熟妇仑乱视频hdxx| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 99在线视频只有这里精品首页| av天堂久久9| 一级a爱视频在线免费观看| 国产xxxxx性猛交| 男女之事视频高清在线观看| 欧美成人免费av一区二区三区| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 国产精品日韩av在线免费观看 | 久久国产乱子伦精品免费另类| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 制服诱惑二区| 成人欧美大片| 此物有八面人人有两片| 国产成人精品在线电影| 国产97色在线日韩免费| 日韩精品中文字幕看吧| 少妇被粗大的猛进出69影院| 又大又爽又粗| 两个人看的免费小视频| 久久久久久免费高清国产稀缺| 一区二区日韩欧美中文字幕| 精品免费久久久久久久清纯| 首页视频小说图片口味搜索| 欧美日本视频| 国产不卡一卡二| а√天堂www在线а√下载| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 精品卡一卡二卡四卡免费| 91字幕亚洲| 亚洲精品粉嫩美女一区| 日本vs欧美在线观看视频| 热re99久久国产66热| 12—13女人毛片做爰片一| 日本免费一区二区三区高清不卡 | 可以在线观看毛片的网站| 激情视频va一区二区三区| 男女午夜视频在线观看| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 淫妇啪啪啪对白视频| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产一卡二卡三卡精品| 午夜精品久久久久久毛片777| 我的亚洲天堂| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 久久久久久大精品| 少妇的丰满在线观看| 90打野战视频偷拍视频| 欧美黄色淫秽网站| av免费在线观看网站| 久久精品国产清高在天天线| 又大又爽又粗| 一级毛片精品| 婷婷精品国产亚洲av在线| 亚洲人成77777在线视频| 亚洲成a人片在线一区二区| 国产亚洲精品一区二区www| 最好的美女福利视频网| 亚洲黑人精品在线| 多毛熟女@视频| 又紧又爽又黄一区二区| 欧美日本中文国产一区发布| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 国产野战对白在线观看| 一夜夜www| 成熟少妇高潮喷水视频| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 韩国av一区二区三区四区| 波多野结衣av一区二区av| 搡老妇女老女人老熟妇| av天堂久久9| 身体一侧抽搐| 国产亚洲精品久久久久5区| 欧美一级毛片孕妇| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 久久午夜亚洲精品久久| av电影中文网址| 一级a爱片免费观看的视频| 色播亚洲综合网| 欧美中文综合在线视频| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 男女床上黄色一级片免费看| 极品人妻少妇av视频| 国产免费男女视频| 亚洲激情在线av| 国产av又大| 中文字幕av电影在线播放| 韩国精品一区二区三区| 久久中文字幕人妻熟女| 人妻久久中文字幕网| 国产精品免费视频内射| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 久久这里只有精品19| 黄色a级毛片大全视频| 亚洲中文字幕日韩| 黑丝袜美女国产一区| 性欧美人与动物交配| 美女国产高潮福利片在线看| 亚洲成人国产一区在线观看| 99精品久久久久人妻精品| 精品高清国产在线一区| 日本 av在线| 在线观看免费日韩欧美大片| 麻豆一二三区av精品| 亚洲自拍偷在线| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 超碰成人久久| 亚洲男人天堂网一区| 欧美日韩福利视频一区二区| 午夜福利影视在线免费观看| av在线播放免费不卡| 十八禁人妻一区二区| 免费在线观看日本一区| 亚洲国产看品久久| 欧美成狂野欧美在线观看| 热re99久久国产66热| 国产xxxxx性猛交| 嫁个100分男人电影在线观看| 怎么达到女性高潮| 国产又爽黄色视频| 后天国语完整版免费观看| 精品久久久久久久久久免费视频| 自线自在国产av| 18禁美女被吸乳视频| 亚洲精品国产色婷婷电影| 不卡一级毛片| 高清黄色对白视频在线免费看| 级片在线观看| 最好的美女福利视频网| 欧美乱妇无乱码| 可以在线观看毛片的网站| 亚洲国产毛片av蜜桃av| tocl精华| 欧美日本视频| 99国产精品免费福利视频| x7x7x7水蜜桃| 国产精品99久久99久久久不卡| 岛国视频午夜一区免费看| 老司机午夜十八禁免费视频| 国产午夜福利久久久久久| 天天添夜夜摸| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 久久久久久人人人人人| 免费人成视频x8x8入口观看| 久久国产亚洲av麻豆专区| 国产成人系列免费观看| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 成年版毛片免费区| 国产三级黄色录像| 校园春色视频在线观看| 欧美日韩黄片免| 黄色视频,在线免费观看| 国产亚洲欧美精品永久| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 久久久久久久精品吃奶| 中文字幕久久专区| 午夜福利一区二区在线看| 中文字幕人妻熟女乱码| 久热爱精品视频在线9| 变态另类丝袜制服| 成人亚洲精品av一区二区| 国产午夜福利久久久久久| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 亚洲精品国产一区二区精华液| 久久久久久免费高清国产稀缺| 久久中文字幕一级| 国内精品久久久久精免费| 日韩成人在线观看一区二区三区| 99riav亚洲国产免费| 麻豆一二三区av精品| 亚洲片人在线观看| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 老司机深夜福利视频在线观看| 宅男免费午夜| 色综合欧美亚洲国产小说| 老司机靠b影院| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 国产激情欧美一区二区| avwww免费| 国产熟女午夜一区二区三区| 日韩国内少妇激情av| 在线永久观看黄色视频| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 亚洲精品在线美女| 高清黄色对白视频在线免费看| 免费在线观看日本一区| 亚洲激情在线av| 女人精品久久久久毛片| 日韩免费av在线播放| 久久狼人影院| 美女 人体艺术 gogo| 黄色成人免费大全| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 国产激情欧美一区二区| 两个人免费观看高清视频| 国产极品粉嫩免费观看在线| 亚洲欧美激情在线| 国产伦人伦偷精品视频| 亚洲中文日韩欧美视频| 十八禁网站免费在线| 人妻久久中文字幕网| 午夜福利高清视频| 黄片大片在线免费观看| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 色综合站精品国产| 亚洲在线自拍视频| 久久狼人影院| 性少妇av在线| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| tocl精华| 午夜两性在线视频| 日本 欧美在线| 国产精品,欧美在线| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 丁香六月欧美| 涩涩av久久男人的天堂| 国产精品 国内视频| 午夜成年电影在线免费观看| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 国产亚洲欧美在线一区二区| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 婷婷六月久久综合丁香| 国产色视频综合| 欧美久久黑人一区二区| 日韩精品青青久久久久久| 国产成人精品在线电影| 亚洲av电影不卡..在线观看| 国产精品免费视频内射| 亚洲av成人av| aaaaa片日本免费| 欧美乱码精品一区二区三区| 两个人免费观看高清视频| 日韩大码丰满熟妇| 热re99久久国产66热| 涩涩av久久男人的天堂| 久久精品成人免费网站| 午夜免费鲁丝| 久久久国产欧美日韩av| www.www免费av| 日日爽夜夜爽网站| 国产91精品成人一区二区三区| 欧美成人免费av一区二区三区| 久久欧美精品欧美久久欧美| 两性夫妻黄色片| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 亚洲九九香蕉| 精品国产国语对白av| 天堂√8在线中文| 国产高清videossex| 日韩成人在线观看一区二区三区| 美女 人体艺术 gogo| 999久久久精品免费观看国产| av网站免费在线观看视频| 香蕉久久夜色| 亚洲性夜色夜夜综合| 淫妇啪啪啪对白视频| 国产av一区二区精品久久| 成人国语在线视频| 国产男靠女视频免费网站| 麻豆国产av国片精品| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 国产精品亚洲一级av第二区| 国产精品久久视频播放| 国产精品免费视频内射| 国产精品久久视频播放| 少妇 在线观看| 亚洲七黄色美女视频| 久久 成人 亚洲| 欧美在线黄色| 最近最新中文字幕大全免费视频| 色综合站精品国产| 青草久久国产| 一本大道久久a久久精品| 宅男免费午夜| 国产成人精品久久二区二区91| 久9热在线精品视频| 欧美日本视频| 久热这里只有精品99| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 国产精品电影一区二区三区| 999精品在线视频| 极品教师在线免费播放| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| av免费在线观看网站| 婷婷六月久久综合丁香| 国产成人av教育| 亚洲一区中文字幕在线| 免费av毛片视频| 首页视频小说图片口味搜索| 激情视频va一区二区三区| 男女床上黄色一级片免费看| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 手机成人av网站| 黄色视频不卡| 精品午夜福利视频在线观看一区| 精品福利观看| 岛国视频午夜一区免费看| 黄色片一级片一级黄色片| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| av在线天堂中文字幕| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | 嫩草影视91久久| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 久久久久久免费高清国产稀缺| a在线观看视频网站| 国产精品98久久久久久宅男小说| 大型av网站在线播放| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 久久中文字幕一级| 超碰成人久久| 亚洲国产精品成人综合色| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 日韩欧美免费精品| 亚洲国产精品合色在线| 亚洲国产欧美一区二区综合| 曰老女人黄片| 麻豆av在线久日| 亚洲专区国产一区二区| 在线观看免费日韩欧美大片| 黄色 视频免费看| 一级,二级,三级黄色视频| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 两个人免费观看高清视频| 欧美中文综合在线视频| 亚洲视频免费观看视频| 精品第一国产精品| 一区二区日韩欧美中文字幕| av片东京热男人的天堂| 自线自在国产av| av福利片在线| 亚洲三区欧美一区| 日本a在线网址| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 久久人妻熟女aⅴ| 老司机深夜福利视频在线观看| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 757午夜福利合集在线观看| 最近最新中文字幕大全免费视频| 欧美不卡视频在线免费观看 | 免费看美女性在线毛片视频| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 人成视频在线观看免费观看| 亚洲av五月六月丁香网| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 久久人人精品亚洲av| 桃色一区二区三区在线观看| 免费少妇av软件| 欧美一级毛片孕妇| 国产免费av片在线观看野外av| 黄色丝袜av网址大全| 国产91精品成人一区二区三区| 91大片在线观看| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 精品国产乱子伦一区二区三区| 在线观看一区二区三区| 日韩有码中文字幕| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 午夜福利一区二区在线看| 欧美色欧美亚洲另类二区 | 最近最新中文字幕大全免费视频| 久久热在线av| 在线视频色国产色| 国产亚洲av嫩草精品影院| 成人永久免费在线观看视频| 欧美激情 高清一区二区三区| 欧美丝袜亚洲另类 | 国产精品免费视频内射| 国产亚洲欧美在线一区二区| 人妻久久中文字幕网| 亚洲专区中文字幕在线| 电影成人av| 亚洲国产欧美网| 亚洲激情在线av| 99久久综合精品五月天人人| 国产高清视频在线播放一区| 国产精品久久视频播放| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 亚洲一码二码三码区别大吗| 一二三四在线观看免费中文在| 视频在线观看一区二区三区| 免费在线观看影片大全网站| aaaaa片日本免费| 在线视频色国产色| 色尼玛亚洲综合影院| 久久天堂一区二区三区四区| 一级毛片女人18水好多| 国产精品精品国产色婷婷| 不卡av一区二区三区| av网站免费在线观看视频| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 在线观看日韩欧美| 免费看a级黄色片| 欧美成人免费av一区二区三区| 两个人免费观看高清视频| xxx96com| 亚洲av电影在线进入| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 欧美日韩黄片免| 国产极品粉嫩免费观看在线| 亚洲国产精品999在线| 午夜成年电影在线免费观看| 亚洲久久久国产精品| 在线播放国产精品三级| 免费少妇av软件| 两个人免费观看高清视频| 国产精品久久视频播放| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 午夜精品久久久久久毛片777| 国产精品亚洲美女久久久| 99在线人妻在线中文字幕| 国产激情久久老熟女| 男女午夜视频在线观看| 中文字幕人妻熟女乱码| 一区二区三区激情视频| 欧美色视频一区免费| 神马国产精品三级电影在线观看 | 日韩av在线大香蕉| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 久久久久国内视频| 午夜视频精品福利| 老司机午夜福利在线观看视频| 日本 av在线| 精品久久久久久久久久免费视频| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 亚洲色图av天堂| 一区二区三区精品91| 国产99白浆流出| 很黄的视频免费| 国产又色又爽无遮挡免费看| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| av在线天堂中文字幕| 成年版毛片免费区| 久久久国产成人免费| 91成人精品电影| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 亚洲成人国产一区在线观看| 亚洲av片天天在线观看| 日本 欧美在线| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 免费在线观看亚洲国产| 婷婷六月久久综合丁香| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 一夜夜www| 成人特级黄色片久久久久久久| 人人妻人人澡人人看| 亚洲国产精品sss在线观看| 国产成人啪精品午夜网站| 免费高清视频大片| 欧美乱色亚洲激情| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 精品国产一区二区久久| 国产一区在线观看成人免费| 久久人妻av系列| 日韩视频一区二区在线观看| 97人妻天天添夜夜摸| 99在线视频只有这里精品首页| 色在线成人网| 9色porny在线观看| 精品国产乱码久久久久久男人| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 免费在线观看亚洲国产| 色综合亚洲欧美另类图片| 一级毛片高清免费大全| 国产精品 国内视频| 纯流量卡能插随身wifi吗| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 国产精品亚洲美女久久久| 日韩大码丰满熟妇| 国产男靠女视频免费网站| www.熟女人妻精品国产| videosex国产| 精品福利观看| 在线观看午夜福利视频| 一级a爱视频在线免费观看| 一边摸一边抽搐一进一小说| 中文亚洲av片在线观看爽| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 男人操女人黄网站| 97碰自拍视频| 在线播放国产精品三级| 免费高清在线观看日韩| 亚洲专区国产一区二区| 亚洲欧美激情综合另类| 18禁国产床啪视频网站| 精品久久久精品久久久| 午夜福利视频1000在线观看 | 国产片内射在线| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 成年版毛片免费区| bbb黄色大片| 在线观看一区二区三区| 精品久久久久久久人妻蜜臀av | 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 久久九九热精品免费| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 日韩大尺度精品在线看网址 | 999精品在线视频| 大码成人一级视频| 变态另类丝袜制服| 97人妻天天添夜夜摸| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 国产av一区二区精品久久| 亚洲国产欧美网| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 1024香蕉在线观看| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 在线观看免费日韩欧美大片| 国产在线观看jvid| 日日夜夜操网爽| cao死你这个sao货| 此物有八面人人有两片| 制服人妻中文乱码| 一夜夜www| 纯流量卡能插随身wifi吗| 日本三级黄在线观看| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 午夜两性在线视频| 精品久久蜜臀av无| 国产一区二区三区综合在线观看| 老司机在亚洲福利影院| 精品无人区乱码1区二区| 亚洲成人国产一区在线观看| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 久久香蕉激情| 亚洲无线在线观看| 在线观看66精品国产| 精品一区二区三区四区五区乱码| 国产精品免费一区二区三区在线| 午夜福利影视在线免费观看| 波多野结衣一区麻豆| 午夜福利欧美成人| 男男h啪啪无遮挡| a在线观看视频网站| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 日日夜夜操网爽| 1024视频免费在线观看| 91成人精品电影| 免费在线观看日本一区| 黄频高清免费视频| 九色亚洲精品在线播放| 视频区欧美日本亚洲| 女警被强在线播放| 大型黄色视频在线免费观看| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 日本五十路高清| 久久久久国产一级毛片高清牌| 免费在线观看完整版高清| 中文字幕精品免费在线观看视频| 99香蕉大伊视频| 国产免费av片在线观看野外av| 国产伦一二天堂av在线观看| 后天国语完整版免费观看| 婷婷六月久久综合丁香| 一本综合久久免费| 亚洲人成电影免费在线| 91麻豆精品激情在线观看国产| 不卡av一区二区三区| 无人区码免费观看不卡| 亚洲男人天堂网一区| 亚洲av五月六月丁香网| 桃色一区二区三区在线观看| 欧美日本中文国产一区发布| 一级黄色大片毛片| 精品欧美一区二区三区在线| 午夜福利免费观看在线| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 757午夜福利合集在线观看| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 男女床上黄色一级片免费看|