金黃色葡萄球菌生物被膜檢測及控制方法研究進(jìn)展

王 瓊，唐俊妮，陳 娟，史 輝

（西南民族大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，四川成都 610041）

金黃色葡萄球菌生物被膜檢測及控制方法研究進(jìn)展

王 瓊，唐俊妮*，陳 娟，史 輝

（西南民族大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，四川成都 610041）

金黃色葡萄球菌極易在食品的加工、儲(chǔ)存過程中形成生物被膜，使得被膜內(nèi)的細(xì)菌很難被清除，給食品安全帶來了巨大隱患。綜述了金黃色葡萄球菌生物被膜的形成、檢測、控制方法和影響因素，特別是針對(duì)國內(nèi)外金黃色葡萄球菌生物被膜的檢測及物理、化學(xué)和生物等控制方法進(jìn)行了詳述，旨在為食品工業(yè)領(lǐng)域生物被膜的消除提供借鑒。

金黃色葡萄球菌，生物被膜，形成，檢測，控制方法

細(xì)菌生物被膜是由微生物細(xì)胞以及它們分泌的保護(hù)性和吸附性的基質(zhì)共同形成的三維結(jié)構(gòu)的聚合物[1]。生物被膜的形成為細(xì)菌構(gòu)建了一個(gè)保護(hù)性的生長環(huán)境，使細(xì)菌能夠限制治療的抗生素，以及食品工廠的消毒劑、殺菌劑等化學(xué)品的進(jìn)入，并且屏蔽了寄主的免疫防御功能，使生物被膜里面的細(xì)菌不斷增殖和擴(kuò)散，造成持續(xù)性的慢性感染和食品反復(fù)污染[2]。金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）是一種常見的食源性病原細(xì)菌，很容易形成生物被膜，其產(chǎn)生的生物被膜能引起食品加工過程中能量的損耗、產(chǎn)品貨架期的縮短，給企業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失，更嚴(yán)重的是影響到食品的安全性，導(dǎo)致食源性疾病，給消費(fèi)者的健康帶來危害，甚至威脅到生命安全。同時(shí)，已形成的生物被膜還有可能是其他致病菌及腐敗微生物的藏身之所，生物被膜內(nèi)部細(xì)菌間的群體感應(yīng)使得多種細(xì)菌能夠協(xié)同共生，從而增加了食品加工環(huán)境以及食品本身污染或再污染的風(fēng)險(xiǎn)，甚至引起食物中毒事件。有研究表明食品加工過程中常用設(shè)備中的不銹鋼、鋁等材料表面具有大量微細(xì)溝槽、縫隙等，極易殘留微生物，從而可能形成生物被膜，采用機(jī)械沖洗甚至擦洗、以及消毒劑處理等方法均很難徹底清除生物被膜[3]。鑒于生物被膜形成的復(fù)雜性，為了能更好的控制生物被膜造成的危害，本文根據(jù)近年來的文獻(xiàn)報(bào)道對(duì)金黃色葡萄球菌生物被膜的形成、檢測、控制方法及影響因素等方面進(jìn)行綜述，旨在為食品工業(yè)領(lǐng)域生物被膜的消除提供借鑒。

1 生物被膜的形成

生物被膜的形成是細(xì)菌為適應(yīng)自然環(huán)境而采取的一種生存策略，當(dāng)細(xì)菌受到各種壓力，如極端的營養(yǎng)缺乏或過剩，低pH，高滲透壓，氧化，抗菌劑和抗生素等，細(xì)菌在接觸物表面與浮游細(xì)菌相對(duì)應(yīng)的一種生長方式，是由附著于惰性或活性實(shí)體的細(xì)菌細(xì)胞分泌的多糖基質(zhì)、纖維蛋白、脂質(zhì)蛋白等多聚物構(gòu)成胞外基質(zhì)，將其自身包裹其中而形成的大量細(xì)菌聚集物[4]。這是細(xì)菌所具有的一種非常重要的環(huán)境適應(yīng)機(jī)制。金黃色葡萄球菌生物被膜的形成通常涉及幾個(gè)明顯的階段，包括起始的黏附，細(xì)胞與細(xì)胞之間的吸附與增殖，生物被膜的成熟以及細(xì)菌的分離與擴(kuò)散等過程[5]，綜合起來如圖1所示。在形成生物被膜的過程當(dāng)中，細(xì)菌細(xì)胞首先和支撐物表面產(chǎn)生瞬時(shí)的表面碰觸，然后定位在其表面，最后細(xì)胞大量積累。這一過程中細(xì)菌細(xì)胞先形成單層的膜，再由單層被膜中的細(xì)菌增殖而形成三維結(jié)構(gòu)完整的成熟的生物被膜[6]。金黃色葡萄球菌生物被膜生物膜的結(jié)構(gòu)非常復(fù)雜，它是一系列復(fù)雜大分子的聚合體。包括多糖物質(zhì)，如β-1，6-聚-N-乙酰葡萄糖胺（PNAG）或胞間黏附多糖（PIA）[7]；胞外DNA[8]（eDNA），指菌體自溶釋放的胞外DNA，是生物膜基質(zhì)的重要組成成分；胞外蛋白 質(zhì) 和 細(xì) 胞 壁 磷 壁 酸[9]；脂 質(zhì)[10]和 其 他 環(huán) 境 中 的 物質(zhì)。已有研究表明金黃色葡萄球菌生物被膜基質(zhì)的組成是可以根據(jù)細(xì)胞外環(huán)境變化而改變的[11]。

圖1 生物被膜形成主要過程示意圖Fig.1 The diagram of biofilm formation

2 生物被膜的檢測

建立快速、靈敏、準(zhǔn)確、簡便的檢測方法，能夠有效控制由生物被膜引起的食品加工環(huán)境以及食品本身的污染或再污染，防止食源性疾病的發(fā)生。目前檢測細(xì)菌生物被膜的方法有三磷酸腺苷（ATP）生物發(fā)光法，高效液相色譜法，熒光素二乙酸酯法，平板擦拭法，掃描電鏡（SEM）和透射電鏡（TEM），激光共聚焦掃描顯微鏡法（CLSM），銀染法，結(jié)晶紫染色法，剛果紅實(shí)驗(yàn)，報(bào)告基因檢測技術(shù)，以及近年來發(fā)展的PCR鑒定，肽核酸（PNA）探針熒光原位雜交技術(shù)等[12]。其中最常用的是染色法和顯微鏡檢法，如Christensen[13]在研究金黃色葡萄球菌在器械表面形成生物被膜時(shí)，首次應(yīng)用了結(jié)晶紫染色法，此后經(jīng)過不斷改進(jìn)，該方法目前已經(jīng)成為一種廉價(jià)，直接和常用的檢測細(xì)菌 生 物 被 膜 形 成 方 法 ；銀 染 法[14]是 被 廣 泛 采 用 的另一種定性檢測生物被膜形成能力的方法，用來證明多糖蛋白復(fù)合物和細(xì)菌生物被膜的共存，樣本需經(jīng)AgNO3等溶液浸泡處理，這種檢測方法可靠、特異、高效、省時(shí)簡便，臨床上可用于大量細(xì)菌生物被膜形成能力的鑒定。顯微鏡檢法利用SEM，TEM和CLSM可以直接檢測細(xì)菌生物被膜表層的形態(tài)學(xué)，對(duì)于細(xì)胞間的連結(jié)、纖維樣多糖和細(xì)胞間質(zhì)清楚可辨，其中CLSM是近年才發(fā)展起來的用于組織形態(tài)學(xué)研究的一項(xiàng)新技術(shù)，也廣泛應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)室生物被膜的檢測，它可對(duì)透光樣本進(jìn)行分層掃描拍攝，常用于細(xì)菌生物被膜立體結(jié)構(gòu)的形態(tài)學(xué)研究[15]。另外，分子檢測技術(shù)也不斷在發(fā)展，Arciola等[16]通過剛果紅平板法驗(yàn)證icaA和icaD基因只在能夠形成被膜的菌株中存在，由此采用了一種簡單、快捷、可靠的PCR鑒定方法來檢測金黃色葡萄球菌生物被膜形成與icaA和icaD基因的關(guān)系，結(jié)果顯示這種方法應(yīng)用于檢測金黃色葡萄球菌被膜形成是可靠的，且比傳統(tǒng)的剛果紅實(shí)驗(yàn)更高效。肽核酸探針熒光原位雜交技術(shù)是Malic等[17]發(fā)現(xiàn)的一種檢測慢性傷口生物被膜菌感染的一個(gè)可靠的工具，這種技術(shù)具有良好的雜交特異性和雜交動(dòng)力特性，與CLSM配合使用，探針熒光原位雜交技術(shù)還能檢測和鑒定慢性傷口感染生物膜中的細(xì)菌種類立體結(jié)構(gòu)及分布情況[18]。

事實(shí)上，在實(shí)際操作過程中通常是將這幾種檢測 技術(shù) 結(jié) 合 起 來 使 用 ，如 邢 明 勛 等[18]在 研 究 阿 奇 霉素對(duì)金黃色葡萄球菌生物被膜形成能力的實(shí)驗(yàn)中，通過剛果紅平板法初步驗(yàn)證受試菌株產(chǎn)生生物被膜的能力，再通過結(jié)晶紫染色、銀染和熒光染色結(jié)合CLSM技術(shù)，進(jìn)一步觀察金黃色葡萄球菌形成生物被膜的形態(tài)，證明了生物被膜在結(jié)構(gòu)上存在多樣性、開放性、不均一性等特點(diǎn)。唐俊妮[19]、黃瑩瑩等[20]研究則采用微孔板法來檢測金黃色生物被膜形成能力，并結(jié)合SEM及CLSM對(duì)已形成的生物被膜進(jìn)行形態(tài)學(xué)研究。

3 生物被膜的控制

在食品加工過程中，許多食源性病原菌易在富有養(yǎng)分和有機(jī)物質(zhì)的固體表面黏附并形成生物被膜。這些黏附的微生物比浮游生長的細(xì)菌對(duì)消毒劑具有更強(qiáng)的抵抗能力。對(duì)各種化學(xué)藥品（包括各種消毒劑）、加熱、光照和干燥都存在耐受性，在清洗過程中，病原菌的散播會(huì)產(chǎn)生空氣懸浮粒，然后附著在加工設(shè)備材料表面，尤其易在一些不易清洗的地方形成生物被膜，如裂紋、拐角處、墊圈、管道材料連接處等。生物被膜中的細(xì)菌被厚厚的胞外多糖蛋白復(fù)合物包繞，不易獲得養(yǎng)分和氧氣，代謝率比較低，被膜深層的細(xì)菌處于休眠狀態(tài)，不進(jìn)行頻繁的細(xì)胞分裂，往往體積較小，對(duì)殺菌劑不敏感[3]。因此，在越來越強(qiáng)調(diào)食品安全的大環(huán)境下，迫使人們不得不加強(qiáng)研究力度去尋找控制生物被膜的方法。

3.1 物理方法

去除生物被膜常見的物理方法有超高磁場、超聲波處理、高脈沖電場、低電場等[3]。楊葆華等[21]用優(yōu)化的超聲波平板法，利用超聲波的“空化”效應(yīng)，設(shè)定超聲波功率135W，處理時(shí)間14min，處理溫度35℃，將生物被膜從接觸表面充分剝離，實(shí)驗(yàn)效果優(yōu)于平板擦拭法。低強(qiáng)度的電流（Electrical Current，EC）能夠增強(qiáng)抗菌劑對(duì)生物被膜的抗菌活性，del Pozo等[22]證明了應(yīng)用EC可以增強(qiáng)萬古霉素對(duì)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的殺滅作用，但EC增強(qiáng)抗菌劑對(duì)生物被膜的清除作用因菌種和抗菌劑的不同，效果會(huì)有所改變。常壓等離子體失活技術(shù)[23]，是利用高壓放電在低氣壓狀態(tài)下發(fā)生輝光放電產(chǎn)生活性氧和自由基來滅活微生物，該技術(shù)對(duì)細(xì)菌形成的生物被膜和浮游菌都具有殺菌作用。Niemira等[24]認(rèn)為電離輻射能夠有效地的殺滅生物被膜菌和浮游菌，是一種有效的物理去除生物被膜的方法，常用于處理與食品接觸的衛(wèi)生設(shè)備表面生物被膜相關(guān)的細(xì)菌。

3.2 化學(xué)方法

二氧化氯是一種速效、廣譜、低毒的新型消毒劑，陳 秋 云 等[25]研 究 了 不 銹 鋼 表 面 金 黃 色 葡 萄 球 菌生物被膜對(duì)二氧化氯的敏感性，結(jié)果顯示金黃色葡萄球菌生物被膜形式比以浮游形式對(duì)二氧化氯具有更強(qiáng)的抵抗能力且營養(yǎng)物質(zhì)能明顯減弱二氧化氯的殺菌效果。生物被膜的形成和有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)大大提高了其耐藥性，對(duì)殺菌劑的殺菌效果影響很大，因此，食品加工企業(yè)在日常消毒時(shí)，一定要有效去除附于加工設(shè)備表面（尤其是死角處）的有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)，選用適當(dāng)?shù)那鍧崉┖拖緞?，防止生物被膜形成，這樣才能達(dá)到有效的消毒效果。Chaw等[26]研究表明低濃度的銀離子（50μg/L）對(duì)生物膜中的細(xì)菌沒有滅活能力，但離子狀態(tài)的銀離子可以結(jié)合在生物分子的供電子基團(tuán)表面，可以減穩(wěn)生物被膜基質(zhì)與胞外多聚物的分子間作用力，因此，可采用協(xié)同作用方式利用銀離子對(duì)生物被膜分子間作用力進(jìn)行減穩(wěn)。Schlag等[27]證實(shí)5mmol/L的亞硝酸鹽能夠抑制金黃色葡萄球菌生物被膜的形成。郭志華等[28]研究證明了0.2mmol/L的EDTA可有效抑制金黃色葡萄球菌生物被膜形成；EDTA只能影響金黃色葡萄球菌生物被膜形成的早期階段；Ba2+不能完全阻斷EDTA抑制生物被膜生成，F(xiàn)e2+、Ca2+、Mg2+可以阻斷EDTA抑制生物被膜的效應(yīng)；即使是高濃度的EDTA也不能影響成熟的細(xì)胞被膜數(shù)量；EDTA能抑制細(xì)胞之間的黏附作用。

3.3 天然提取物

近年來，植物原料作為新的殺菌劑也得到廣泛應(yīng)用。牛至精油和其主要酚類化合物——香芹酚和百里香酚具有廣泛的抗菌譜。Nostro等[29]研究表明，牛至精油和2種酚類化合物對(duì)生物被膜態(tài)的金黃色葡萄球菌的殺滅濃度分別0.25%～1.0%（v/v）和0.125%～0.500%（v/v），亞致死濃度的精油可以削弱金黃色葡萄球菌的生物被膜形成。Nostro等[30]進(jìn)一步證實(shí)香芹酚能夠顯著降低聚苯乙烯表面的生物量和細(xì)菌黏附數(shù)，并進(jìn)一步證明在其亞抑制劑量（1/2，1/4和1/8 MIC）時(shí)，酸性pH條件下香芹酚對(duì)表皮葡萄球菌生物被膜較中性pH條件下具有更高的清除作用，對(duì)生物被膜的形成也具有潛在的抑制作用。在用5%茶樹油處理1h之后，不僅金黃色葡萄球菌的生物被膜被完全去除，而且其中的金黃色葡萄球菌也被殺滅[31]。王曉紅等[32]研究證明了從新西蘭桃柁羅漢松中提取出天然活性物質(zhì)桃柁酚，可以有效減少胞外DNA（eDNA）的釋放并抑制金黃色葡萄球菌生物被膜的形成，并且抑制趨勢(shì)呈劑量依賴關(guān)系，而當(dāng)桃柁酚添加量為1/8× MIC藥物濃度時(shí)，可以誘導(dǎo)生物被膜形成。此外，桃柁酚也可以通過影響Agr和Sar調(diào)控系統(tǒng)，作用于cidA基因進(jìn)而影響eDNA釋放及生物被膜的形成。

3.4 抗生素類

阿奇霉素作為一種廣譜抗生素，具有免疫調(diào)節(jié)、抗微生物、抗生物被膜等作用，并且還具有良好的耐受性，成為了最常用的抗生素之一。邢明勛等[18]研究表明，阿奇霉素對(duì)金黃色葡萄球菌懸浮菌和生物被膜具有較好的抗菌活性及抗毒素作用，同時(shí)對(duì)金黃色葡萄球菌生物被膜的形成及兔紅細(xì)胞的溶血活性具有顯著的抑制作用，這將有助于治療由金黃色葡萄球菌導(dǎo)致的感染。氨溴索（AMB）能破壞金黃色葡萄球菌已經(jīng)形成的生物被膜，與萬古霉素（VAN）聯(lián)合應(yīng)用后，可使生物被膜內(nèi)金黃色葡萄球菌顯著減少，顯示出了協(xié)同殺菌作用[33]。低于最低抑菌濃度的黃芩苷在體外對(duì)金黃色葡萄球菌的生物被膜具有破壞作用，與左氧氟沙星聯(lián)合應(yīng)用，可顯著增強(qiáng)左氧氟沙星對(duì)生物被膜的殺菌作用[12]。黃芩素能破壞耐甲氧西林金黃色葡萄球菌已形成的早期生物被膜，增強(qiáng)萬古霉素對(duì)生物被膜內(nèi)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的清除作用，且黃芩素破壞生物被膜及其協(xié)同殺菌作用強(qiáng)于克拉霉素（CLR）[34]。克拉霉素可以協(xié)同抗生素增強(qiáng)其對(duì)生物被膜內(nèi)金黃色葡萄球菌的殺菌作用。單用氧氟沙星抗菌效果并不顯著，克拉霉素可明顯增強(qiáng)其抗菌能力，二者具有協(xié)同作用，十四元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類藥物克拉霉素能夠抑制生物膜，并提高氧氟沙星透過菌膜的能力，提示克拉霉素可作為控制金黃色葡萄球菌生物膜形成及相關(guān)感染的藥物，應(yīng)用于臨床治療此類疾病[35]。

五倍子的濃度在大于或等于0.25mg/mL時(shí)，對(duì)浮游的金黃色葡萄球菌有殺菌、抑菌的作用，但對(duì)金黃色葡萄球菌生物被膜作用不明顯；當(dāng)五倍子與1/4最低抑菌濃度（MIC=0.128mg/mL）的阿奇霉素聯(lián)合作用后可顯著減少細(xì)菌的黏附性，減少培養(yǎng)液和被膜中存活菌數(shù)，證明五倍子與阿奇霉素聯(lián)合用藥可增強(qiáng)對(duì)金黃色葡萄球菌生物被膜的殺菌作用[36]。然而采用抗生素也只局限于實(shí)驗(yàn)條件下，在實(shí)際環(huán)境中，生物被膜外面還附著有大量的細(xì)胞碎片、血小板、以及機(jī)體的各種代謝物，抗生素的作用并不能達(dá)到理想的效果，對(duì)于食品加工環(huán)境以及其他環(huán)境，這種方法并不可取。

3.5 酶類

溶葡萄球菌酶是一種最初從模仿葡萄球菌中分離獲得的含Zn2+內(nèi)切肽酶，對(duì)細(xì)菌胞壁肽聚糖交聯(lián)結(jié)構(gòu)中的五甘氨酸橋聯(lián)具有特異水解作用[37]。白寧等[38]通過研究重組溶葡萄球菌酶對(duì)金黃色葡萄球菌的體外清除作用，發(fā)現(xiàn)不同濃度的重組溶葡萄球菌酶能夠有效地減少金黃色葡萄球菌生物被膜中的活菌數(shù)。唐俊妮等[19]研究表明，耐熱核酸酶和DNaseⅠ對(duì)金黃色葡萄球菌生物被膜的形成起到抑制作用。Mann等[39]發(fā)現(xiàn)證實(shí)了葡萄球菌核酸酶可以降解胞外DNA，促進(jìn)了細(xì)胞的分散，抑制了生物被膜的形成。

3.6 食品添加劑

謝麗斯等[40]在添加低質(zhì)量濃度防腐劑山梨酸鉀和苯甲酸鈉后，金黃色葡萄球菌成膜能力降低，當(dāng)兩者質(zhì)量濃度均≥0.4g/L時(shí)，能夠完全抑制被膜的形成，且山梨酸鉀抑制成膜趨勢(shì)比苯甲酸鈉明顯；添加質(zhì)量濃度為3g/L的單甘酯時(shí)成膜率最低，而雙甘酯質(zhì)量濃度為4g/L成膜率最低，兩者比較，在質(zhì)量濃度2~4g/L范圍內(nèi)單甘酯抑制成膜比雙甘酯好；對(duì)于蔗糖酯類乳化劑，在質(zhì)量濃度0.3~4g/L范圍，能顯現(xiàn)抑制成膜作用；非離子型表面活性劑吐溫-80、Span-60對(duì)金黃色葡萄球菌成膜影響不同，與兩者自身親水親油性相關(guān)。因此，這幾類食品添加劑對(duì)金黃色葡萄球菌生物被膜具有一定抑制作用。Shanks等[41]研究顯示，濃度高于0.5%的檸檬酸鈉，可以有效地抑制金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌生物被膜的形成及細(xì)胞生長，然而，對(duì)于大多數(shù)受試的金黃色葡萄球菌，亞抑菌濃度的檸檬酸鈉能夠顯著地刺激其生物被膜的形成。Sauer等[42]用7%（w/v）檸檬酸鈉緩沖液（0.24mmol/L，pH=6.2），0.05% 亞 甲 基 藍(lán) ，0.15% 對(duì) 羥基苯甲酸甲酯和0.015%對(duì)羥基苯甲酸丙酯制成聯(lián)合殺菌劑：檸檬酸/亞甲基藍(lán)/對(duì)羥基苯甲酸酯（citrate/ methylene blue/parabens，C/MB/P）能夠顯著減少金黃色葡萄球菌生物被膜形成量及生物被膜的厚度，對(duì)預(yù)成型以及成熟的生物被膜中的金黃色葡萄球菌有迅速殺滅作用，能夠完全清除從生物被膜中分離的浮游態(tài)細(xì)菌。

4 其他外界影響因素

金黃色葡萄球菌具有溫和的疏水性和顯著的路易斯堿的性質(zhì)，其在聚苯乙烯上形成被膜的最初黏附與生長基質(zhì)中離子強(qiáng)度呈正相關(guān)。大多數(shù)菌株在37℃時(shí)較25℃時(shí)形成的生物被膜多；增加葡萄糖的量能提高被膜生成量；孵化時(shí)，NaCl和MgCl2的存在能夠顯著降低生物被膜形成量[43]。我們實(shí)驗(yàn)室通過對(duì)金黃色葡萄球菌生物被膜形成變化與外在培養(yǎng)條件影響關(guān)系進(jìn)行研究，也證實(shí)了培養(yǎng)基中的糖類可以促進(jìn)生物被膜的形成，NaCl對(duì)生物被膜的形成起抑制作用，并且不同的培養(yǎng)基在實(shí)驗(yàn)室條件下對(duì)被膜形成的影響具有很大差異[44]。通過改善食品接觸表面的表面性質(zhì)以阻止微生物在其表面上的黏附也可以作為一種控制生物被膜的途徑。不同的食品接觸表面形成生物被膜的能力有所不同，與玻璃和PE塑料相比，不銹鋼表面黏附形成生物被膜的活菌數(shù)較多[45]。Jaglic等[46]證明在不利于微生物生長的溫度（6~ 22℃）和靜態(tài)條件下，會(huì)導(dǎo)致表皮葡萄球菌的黏附和形成生物被膜。相反，在有利于微生物生長的溫度下，微生物的大量繁殖則使得黏附的細(xì)胞很容易從不銹鋼表面上脫附下來。

5 結(jié)論與展望

生物被膜是一種復(fù)雜的微生境，生物被膜的形成受到菌種、菌量、接觸表面類型、營養(yǎng)條件和生長環(huán)境等諸多因素的影響。各種不同的細(xì)菌生物被膜的形成沒有一致的途徑，即使是同一種細(xì)菌也沒有明確的具體途徑，它們可以隨著環(huán)境的變化而產(chǎn)生相應(yīng)的變化。鑒于食品加工過程中常用設(shè)備中的不銹鋼、鋁等材料表面具有大量微細(xì)溝槽、縫隙等，極易殘留微生物，從而形成細(xì)菌生物被膜。食品生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)建立完整HACCP體系，確定食品生產(chǎn)過程中可能形成生物被膜的關(guān)鍵點(diǎn)，并對(duì)各個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)采取適宜，高效和安全的方法進(jìn)行控制。通過抑制生物被膜的形成和殺滅生物被膜中的金黃色葡萄球菌，從而降低食品中由金黃色葡萄球菌生物被膜引發(fā)的食源性疾病暴發(fā)。

隨著生物信息學(xué)的發(fā)展，在研究生物被膜形成過程中越來越多的引入了生物信息學(xué)的方法，以后通過提高細(xì)菌生物被膜檢測水平，建立快速靈敏準(zhǔn)確簡便的檢測方法，利用芯片技術(shù)、雙向電泳、有效的報(bào)告基因和基因敲除等分子技術(shù)，結(jié)合核磁共振和激光共聚焦顯微技術(shù)，從基因組水平和蛋白組水平來構(gòu)建生物被膜形成的分子模型，充分了解金黃色葡萄球菌生物被膜的形成機(jī)理[6]，為建立有效的生物被膜去除和預(yù)防策略奠定理論基礎(chǔ)。

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Research progress in detection and control methods of Staphylococcus aureus Biofilm formation

WANG Qiong，TANG Jun-ni*，CHEN Juan，SHI Hui
（College of Life Science and Technology，Southwest University for Nationalities，Chengdu 610041，China）

Staphylococcus aureus is easy to form biofilm in food processing and storage，which makes the bacteria in the biofilm more difficult to be eradicated and brings great dangers to food safety.The biofilm formation，detection，control methods and influence factors of S.aureus were reviewed in this text，especially for the detection and physical，chemical and biological control methods.It would provide an important guidance on S.aureus biofilm elimination for food industry.

Staphylococcus aureus；biofilm；formation；detection；control methods

TS201.6

A

1002-0306（2014）22-0371-05

10.13386/j.issn1002-0306.2014.22.073

2014－03－11

王瓊（1990-），女，碩士研究生，研究方向：畜產(chǎn)品加工與安全。

* 通訊作者：唐俊妮（1971-），女，副研究員，研究方向：食品安全。

國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（31071515，31371781）；教育部新世紀(jì)人才支持計(jì)劃（NCET-11-0847）。