HPLC法測(cè)定鹽酸伊伐布雷定膠囊的含量

呂義強(qiáng)，王俠，張朋言，王長(zhǎng)江

（青島國(guó)風(fēng)藥業(yè)股份有限公司，山東青島266000）

HPLC法測(cè)定鹽酸伊伐布雷定膠囊的含量

呂義強(qiáng)，王俠，張朋言，王長(zhǎng)江

（青島國(guó)風(fēng)藥業(yè)股份有限公司，山東青島266000）

目的建立高效液相色譜法測(cè)定鹽酸伊伐布雷定膠囊含量的方法。方法采用Ultimate XB－C18色譜柱（4.6 mm×150 mm，5μm），流動(dòng)相為0.05 mol·L－1磷酸二氫鉀溶液（用氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH值為6.8）－乙腈（70∶30），檢測(cè)波長(zhǎng)為285 nm，流速為1.0 mL·min－1。結(jié)果伊伐布雷定在0.06～0.12 mg·mL－1的濃度范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系（r＝0.999 8），平均回收率為99.3%，RSD為1.3%（n＝9）。結(jié)論本法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確，可用于鹽酸伊伐布雷定膠囊的質(zhì)量控制。

高效液相色譜法；鹽酸伊伐布雷定膠囊；含量測(cè)定

伊伐布雷定是一種特異性的If離子通道阻斷劑，通過(guò)選擇性干預(yù)If通道來(lái)控制起搏功能，能夠減慢心率［1］。目前常用的β受體阻滯劑雖然亦能減慢心率，但常伴有使心肌收縮力減弱的副作用.而伊伐布雷定則沒(méi)有這種副作用［2］。伊伐布雷定口服給藥后，能迅速和較徹底地吸收，在禁食條件下，1 h后能達(dá)到血藥峰濃度［3］。并且在冠心病患者人群中具有很好的臨床耐受性［4］。本文建立了RPHPLC法測(cè)定鹽酸伊伐布雷定膠囊含量的方法，準(zhǔn)確、可靠、簡(jiǎn)便、快速，可用于鹽酸伊伐布雷定膠囊的質(zhì)量控制。

1 儀器與試藥

Agilent1200系列高效液相色譜儀（G1311A四元泵；G1314B VWD檢測(cè)器）；電子天平（METTLER，AE240）；乙腈為色譜純，水為超純水，其他試劑為分析純。鹽酸伊伐布雷定膠囊（由青島國(guó)風(fēng)藥業(yè)股份有限公司提供，批號(hào)：130501、130502、130601），鹽酸伊伐布雷定工作對(duì)照品（原料精制后標(biāo)定，批號(hào)：130301，含量為99.5%）。

2 方法與結(jié)果［5］

2.1 色譜條件 采用Ultimate XB－C18色譜柱（4.6 mm×150 mm，5μm）；以0.05 mol·L－1磷酸二氫鉀溶液（用氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH值為6.8）－乙腈（70∶30）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)：285 nm，流速為1.0 mL·min－1，進(jìn)樣量10μL。理論板數(shù)按伊伐布雷定峰計(jì)算不低于3 000。

2.2 溶液的制備 取本品20粒，求出平均裝量，將內(nèi)容物混勻，精密稱取適量（約相當(dāng)于伊伐布雷定10 mg），置100 mL量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液。另取鹽酸伊伐布雷定工作對(duì)照品適量，精密稱定，加流動(dòng)相溶解并稀釋制成每1 mL中約含0.1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.3 系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 取“2.2”項(xiàng)下的供試品溶液及對(duì)照品溶液，按“2.1”項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)行測(cè)定，記錄色譜圖；伊伐布雷定峰的理論板數(shù)為13 065，與相鄰雜質(zhì)峰的分離度大于1.5，圖譜見(jiàn)圖1。

圖1 鹽酸伊伐布雷定膠囊含量測(cè)定HPLC圖譜

2.4 專屬性試驗(yàn) 按“2.1”項(xiàng)下的色譜條件，按處方比例稱取空白輔料，加流動(dòng)相溶解，定容，過(guò)濾，取續(xù)濾液依法測(cè)定，圖譜見(jiàn)圖1，空白輔料對(duì)本品的含量測(cè)定無(wú)干擾。

2.5 線性與范圍試驗(yàn) 取鹽酸伊伐布雷定工作對(duì)照品約53.9 mg（相當(dāng)于伊伐布雷定50 mg），精密稱定，置100 mL量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取3、3.5、4、4.5、5、6 mL，置25 mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取10 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積A對(duì)濃度C進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為：A＝20 895C＋896，r＝0.999 8，表明伊伐布雷定在濃度0.06～0.12 mg·mL－1范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系。

2.6 精密度試驗(yàn) 稱取鹽酸伊伐布雷定工作對(duì)照品適量，加流動(dòng)相溶解并稀釋制成濃度為0.1 mg·mL－1的溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次。結(jié)果，伊伐布雷定峰面積的RSD為0.26%。

2.7 回收率試驗(yàn) 取鹽酸伊伐布雷定工作對(duì)照品適量，精密稱定，并按處方量加入輔料，置研缽中研細(xì)混勻，分別精密稱取適量（約相當(dāng)于含伊伐布雷定16、20、24 mg），各3份，分別置200 mL量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液。另取鹽酸伊伐布雷定工作對(duì)照品適量，加流動(dòng)相溶解并稀釋制成每1 mL中約含0.1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。取上述兩種溶液，按

“2.1”項(xiàng)下的色譜條件，精密量取10μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。測(cè)得平均回收率99.3%，RSD為1.3%（n＝9）。

2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn) 稱取鹽酸伊伐布雷定工作對(duì)照品適量，加流動(dòng)相溶解并稀釋制成濃度為0.1 mg·mL－1的溶液，分別于0、1、2、4、6、8 h進(jìn)樣，測(cè)定。結(jié)果，伊伐布雷定峰面積的RSD＝0.7%。

2.9 樣品的測(cè)定 取“2.2”項(xiàng)下的對(duì)照品溶液、供試品溶液，分別精密量取10μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算含量。3批樣品的含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 鹽酸伊伐布雷定膠囊3批樣品含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

取伊伐布雷定對(duì)照品溶液，經(jīng)二極管陣列檢測(cè)器檢測(cè)，由光譜指數(shù)圖可見(jiàn)伊伐布雷定在285 nm波長(zhǎng)處有最大吸收，因此選擇285 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。對(duì)磷酸二氫鉀溶液的濃度及pH值進(jìn)行了試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)當(dāng)磷酸二氫鉀溶液的濃度為0.05 mol·L－1、pH值為6.8時(shí)峰形最佳；對(duì)兩種常用的有機(jī)相乙腈和甲醇進(jìn)行了對(duì)比，試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，有機(jī)相采用乙腈比甲醇能獲得更好的峰形，與相鄰雜質(zhì)峰的分離更好；對(duì)乙腈與磷酸二氫鉀溶液的比例進(jìn)行了試驗(yàn)，以乙腈－0.05 mol·L－1磷酸二氫鉀溶液（30∶70）時(shí)最優(yōu)，保留時(shí)間適中，主峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度符合要求。

綜上所述，本法的專屬性好，精密度、回收率高、操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，可用于鹽酸伊伐布雷定膠囊的含量測(cè)定。

［1］梁可，張浩，曹蕾，等.第一個(gè)竇房結(jié)If電流選擇特異性抑制劑——鹽酸伊伐布雷定的研究進(jìn)展［J］.中國(guó)處方藥，2007，66（9）：18－19.

［2］伊伐布雷定在中國(guó)地區(qū)的療效臨床實(shí)驗(yàn)即將啟動(dòng)［J］.心血管病防治知識(shí)，2007，12：13.

［3］李楠，曾玉杰，心臟起搏電流抑制劑ivabradine的臨床應(yīng)用［J］.臨床心血管病雜志，2008，24（12）：957－960.

［4］何躍輝，魏萬(wàn)林，張靈，等.特異性降低心率藥物——If抑制劑伊伐布雷定在心血管疾病中的應(yīng)用研究進(jìn)展［J］.中國(guó)偱證心血管醫(yī)學(xué)雜志，2009，1（5）：308－311.

［5］姚娜，方克忠，劉阿利.HPLC法測(cè)定鹽酸伊伐布雷定片的含量［J］.齊魯藥事，2012，31（5）：275－276.

Determ ination of Ivabradine Hydrochloride Capsules by HPLC

LV Yi-qiang，WANG Xia，ZHANG Peng-yan，WANG Chang-jiang
（Qingdao Growful Medicine Co.，Ltd.，Qingdao 266000，China）

ObjectiveTo establish an HPLC method for the determination of Ivbradine Hydrochloride Capsules.MethodsUltimate XB－C18column（4.6 mm×150 mm，5μm）was adopted with 0.05 mol·L－1Potassium dihydrogen phosphate solution（adjust pH to 6.8 with sodium hydroxide）－acetonitrile（70∶30）mixture asmobile phase，detected atwavelength of285 nm and flow rate was 1.0 mL·min－1.ResultsThe ivabradine showed a good linear relationship with the range of0.06～0.12mg·mL－1（r＝0.999 8）.The average recovery was99.3%，and the RSD was1.3%（n＝9）.ConclusionThe method was convenient，rapid and accurate.It can be used for the quality control of Ivabradine Hydrochloride capsules.

HPLC；Ivabradine Hydrochloride Capsules；Determination

R927.2

：A

2095－5375（2014）03－0153－002

呂義強(qiáng)，男，研究方向：新藥研究，E－mail：qiang－1001＠163.com