豬繁殖與呼吸綜合征母源抗體監(jiān)測(cè)與消長(zhǎng)水平分析

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（1.新疆畜牧科學(xué)院獸醫(yī)研究所，新疆烏魯木齊 830000；2.新疆維吾爾自治區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，新疆烏魯木齊 830063；3.吐魯番地區(qū)動(dòng)物疾病控制與診斷中心，新疆吐魯番 838000；4.吐魯番市畜牧獸醫(yī)站，新疆吐魯番 838000；5.奇臺(tái)縣動(dòng)物疾病預(yù)防控制中心，新疆昌吉 831800）

豬繁殖與呼吸綜合征母源抗體監(jiān)測(cè)與消長(zhǎng)水平分析

陸桂麗1，張?zhí)焓?，成進(jìn)1，王文2，阿達(dá)力·卡克馬爾旦3，吳國(guó)梁3，布瑪麗亞·阿不都熱合曼4，史國(guó)忠5，夏俊1，王娟5，彭曉玲2

（1.新疆畜牧科學(xué)院獸醫(yī)研究所，新疆烏魯木齊 830000；2.新疆維吾爾自治區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，新疆烏魯木齊 830063；3.吐魯番地區(qū)動(dòng)物疾病控制與診斷中心，新疆吐魯番 838000；4.吐魯番市畜牧獸醫(yī)站，新疆吐魯番 838000；5.奇臺(tái)縣動(dòng)物疾病預(yù)防控制中心，新疆昌吉 831800）

為了獲得仔豬PRRS母源抗體的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，制定科學(xué)的PRRS免疫程序，作者對(duì)新疆吐魯番市和奇臺(tái)縣專業(yè)養(yǎng)豬場(chǎng)的商品代仔豬，用間接ELISA方法對(duì)血清樣品進(jìn)行豬繁殖與呼吸綜合征母源抗體的跟蹤監(jiān)測(cè)。結(jié)果顯示，吐魯番3個(gè)試驗(yàn)組和奇臺(tái)縣5個(gè)試驗(yàn)組的商品代仔豬的豬繁殖與呼吸綜合征母源抗體持續(xù)期隨著時(shí)間的推移呈遞減趨勢(shì)。在仔豬28-35日齡時(shí)，8個(gè)試驗(yàn)組的商品代仔豬PRRS母源抗體水平逐漸下降到臨界值（S/ P值≥0.4），并確定PRRS首免日齡為28日齡。

仔豬；豬繁殖與呼吸綜合征；母源抗體

豬繁殖與呼吸綜合征（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome，PRRS）是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus，PRRSV）引起的，俗稱“豬藍(lán)耳病”[1]。該病以懷孕母豬流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎和木乃伊胎等繁殖障礙以及仔豬和育肥豬的呼吸道癥狀為特征[1-2]。1987年P(guān)RRS首次發(fā)于美國(guó)，隨后2～3年內(nèi)迅速在北美和歐洲廣泛流行，以后蔓延至亞太地區(qū)，造成世界范圍的大流行，給世界養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，成為危害當(dāng)今養(yǎng)豬業(yè)的主要疫病之一[3-4]。

仔豬可通過(guò)吮吸免疫母豬的初乳獲得對(duì)PRRSV的免疫保護(hù)，使仔豬在PRRS疫苗首免之前免受PRRSV感染。然而確定仔豬PRRS疫苗首免日齡，消除母源抗體干擾是仔豬獲得免疫保護(hù)的關(guān)鍵問(wèn)題。本試驗(yàn)對(duì)新疆兩個(gè)不同地區(qū)的專業(yè)養(yǎng)豬場(chǎng)的仔豬進(jìn)行了PRRS母源抗體的監(jiān)測(cè)，以期獲得仔豬PRRS母源抗體的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，為制定科學(xué)的PRRS免疫程序提供了可靠的科學(xué)依據(jù)?，F(xiàn)將試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 診斷試劑 豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體X3檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自IDEXX公司，批號(hào)為40959–0111。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)方案 在吐魯番和奇臺(tái)分別選擇不同的2個(gè)種豬場(chǎng)的母豬，分為8個(gè)試驗(yàn)組。每組試驗(yàn)仔豬頭數(shù)見(jiàn)表1。對(duì)出生仔豬每間隔7天前腔靜脈采血，分離血清，進(jìn)行PRRS母源抗體監(jiān)測(cè)。具體試驗(yàn)分組見(jiàn)表1。

表1試驗(yàn)分組

1.2.2 血清樣品采集 從7日齡開(kāi)始，每間隔一周應(yīng)用一次性10ml采血器對(duì)仔豬進(jìn)行前腔靜脈采血2～3ml，每組隨機(jī)采樣，分離血清，–20℃凍存?zhèn)淇贵w檢測(cè)使用。

1.2.3 抗體檢測(cè) 豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體X3檢測(cè)試劑盒恢復(fù)至室溫（18～25℃）；加入40倍稀釋的血清樣品100uL，加入未稀釋的陽(yáng)性和陰性對(duì)照，18～25℃孵育30min；洗滌5次，加入100uL酶結(jié)合物，18～25℃孵育30min；洗滌5次，加入100uLTMB底物，18～25℃孵育15min；加入100uL終止液，吸光度值A(chǔ)650nm進(jìn)行讀板；S/P值≥0.4判為陽(yáng)性，反之為陰性。

2 結(jié)果

2.1 吐魯番試驗(yàn)組PRRS母源抗體的檢測(cè)結(jié)果

吐魯番3個(gè)試驗(yàn)組的仔豬PRRS母源抗體的檢測(cè)數(shù)據(jù)（平均值）結(jié)果見(jiàn)表2，抗體消長(zhǎng)見(jiàn)圖1。結(jié)果表明，隨著時(shí)間的推移，PRRS母源抗體呈遞減趨勢(shì)，在仔豬35日齡的時(shí)候，第1和第2試驗(yàn)組PRRS免疫抗體下降到臨界值以下，第3組免疫抗體為陽(yáng)性。

表2 PRRS母源抗體檢測(cè)結(jié)果

2.2 奇臺(tái)試驗(yàn)組PRRS母源抗體的檢測(cè)結(jié)果

奇臺(tái)5個(gè)試驗(yàn)組的仔豬PRRS母源抗體的檢測(cè)數(shù)據(jù)（平均值）結(jié)果見(jiàn)表2，抗體消長(zhǎng)見(jiàn)圖1。結(jié)果表明，在仔豬35日齡的時(shí)候，第4組、第5組和第7組PRRS免疫抗體下降到臨界值以下；第6組和第7組雖然分別在仔豬35日齡和28日齡時(shí)PRRS免疫抗體為陽(yáng)性（S/P值≥0.4），但是也接近與臨界值以下。

圖1 PRRS母源抗體消長(zhǎng)水平

3 討論

母豬在接種疫苗之后，可以有效將母源抗體傳遞給仔豬，使仔豬獲得被動(dòng)的免疫抗體。我國(guó)采取強(qiáng)制免疫方法預(yù)防和控制PRRS。在實(shí)際免疫操作中遇到諸多問(wèn)題，其中之一是確定PRRS首免時(shí)間。如果PRRS母源抗體水平過(guò)高時(shí)接種疫苗，抗原則會(huì)被母源抗體所干擾，仔豬得不到應(yīng)有的保護(hù)；母源抗體過(guò)低或完全消失時(shí)接種疫苗，仔豬則在免疫空白期易受病原的侵襲。所以要根據(jù)仔豬群PRRS的母源抗體水平，合理制定仔豬最佳首免時(shí)間。

通過(guò)本試驗(yàn)可知，仔豬通過(guò)攝入免疫母豬的乳汁而獲得的對(duì)PRRS的被動(dòng)免疫保護(hù)，這種保護(hù)隨著仔豬日齡的增長(zhǎng)和母源抗體的滴度的衰減而降低。當(dāng)S/P值≥0.4時(shí)PRRS母源抗體為陽(yáng)性。由圖1可知，8個(gè)試驗(yàn)組商品代仔豬隨著日齡的增加，在28～35日齡時(shí)，PRRS母源抗體水平逐漸下降到臨界值，從避免出現(xiàn)免疫空白期考慮，可以確定PRRS首免日齡為28日齡。一些相關(guān)的研究論文[5-7]也證實(shí)了PRRS首免日齡確定在21～28日齡之間。

本實(shí)驗(yàn)對(duì)種豬群接種疫苗后的8組商品代仔豬的PRRS母源抗體進(jìn)行追蹤監(jiān)測(cè)，為商品代仔豬的PRRS疫苗的首次免疫時(shí)間的確定提供了科學(xué)依據(jù)。我們根據(jù)8組仔豬實(shí)驗(yàn)獲得了PRRS首免日齡，因此，建議商品代仔豬在進(jìn)行PRRS疫苗的首免時(shí)，最好進(jìn)行母源抗體的檢測(cè)，根據(jù)母源抗體水平來(lái)確定首免日期。

[1] 殷震，劉景華.動(dòng)物病毒學(xué)[M].2版.北京：科學(xué)出版社，1997.

[2] 楊漢春.我國(guó)新發(fā)豬病的流行現(xiàn)狀與防控的科學(xué)問(wèn)題[C]//中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)2011年學(xué)術(shù)年會(huì).中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)2011年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集.成都：中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)2011年學(xué)術(shù)年會(huì)，2011：69.

[3] 蔡寶祥.我國(guó)高致病性豬繁殖與呼吸綜合征研究進(jìn)展[C]//中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物傳染病學(xué)分會(huì).中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物傳染病學(xué)分會(huì)第四次豬病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集.鄭州：中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物傳染病學(xué)分會(huì)第四次豬病學(xué)術(shù)研討會(huì)，2010：1–4．

[4] 高影凝.部分豬場(chǎng)豬繁殖與呼吸綜合征、圓環(huán)病毒-2、豬流感、豬瘟的病原檢測(cè)和初步分析[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫，2012，29（4）：56-58.

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[6] 李景云，曹世禎，孟曉琴，等.高致病性豬藍(lán)耳病疫苗免疫抗體效價(jià)試驗(yàn)報(bào)告[J].國(guó)外畜牧學(xué)–豬與禽，2012，32（7）：66-68.

[7] 韓先桂，王佩良，紹坤，等.仔豬高致病性豬藍(lán)耳病首免日齡抗體測(cè)定試驗(yàn)[J].山東畜牧獸醫(yī)，2011，（10）：9-10.

Detection and Analysis of Maternal Antibodies against Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome

Lu Gui-li1，Zhang Tianshu2，Cheng Jin1，Wang Wen2，Adali · Kakemaerdan3，Wu Guoliang3，Bumaliya · Abudureheman4，Shi Guozhong5，Xia Jun1，Wang Juan5，Peng XiaoLing2
（1.Veterinary Research Institute，Xinjiang Academy of Animal Sciences，Urumqi，Xinjiang 830000；2.Animal Health Supervision Institute of Xinjiang Uyghur Autonomous Region，Urumqi，Xinjiang 830063；3. Turpan Center for Animal Disease Control and Diagnosis，Turpan，Xinjiang 838000；4. Turpan City Animal Husbandry and Veterinary Station，Turpan，Xinjiang，838000；5. Qitai County Center for Animal Disease Control and Diagnosis，Changji，Xinjiang 831800）

A The maternal antibodies against porcine reproductive and respiratory syndrome（PRRS）in commercial piglets in professional pig farms of Turpan and Qitai County were surveyed by direct ELISA. The results indicated that the level of maternal antibodies in piglets of 3 test groups of Turpan and 4 test groups of Qitai County was gradually reduced and went out with the time after immunization. The level of maternal antibodies against PRRS in 28～35-day-old commercial piglets of the 8 test groups was gradually decreased to a critical value（S/P≥0.4），and hence the frst immunization was determined at 28-day-old age.

piglets；porcine reproductive and respiratory syndrome；maternal antibodies

S858.28

：B

：1005-944X（2014）06-0065-03

新疆自治區(qū)科技計(jì)劃項(xiàng)目（201031106）

彭曉玲

注：陸桂麗、張?zhí)焓鎸?duì)本文貢獻(xiàn)相同，并列第一作者。