貴州省部分馬病血清學(xué)調(diào)查

，

（1.貴州省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州貴陽(yáng) 550008；

2.貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室，貴州貴陽(yáng) 550004）

貴州省部分馬病血清學(xué)調(diào)查

冉隆仲1，洪尼寧2

（1.貴州省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州貴陽(yáng) 550008；

2.貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室，貴州貴陽(yáng) 550004）

[目的]調(diào)查貴州省馬群馬流感病毒、馬皰疹病毒1/4型或馬動(dòng)脈炎病毒感染情況。[方法]用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）對(duì)采自貴州省9個(gè)市（州）及第九屆民運(yùn)會(huì)參賽馬匹的363份血清進(jìn)行了A型流感病毒、馬皰疹病毒1/4型、馬動(dòng)脈炎病毒和非洲馬瘟病毒抗體檢測(cè)。[結(jié)果]結(jié)果顯示這四種病原的血清抗體群陽(yáng)性率分別為79.49%（31/39）、7.69%（3/39）、43.59%（17/39）和0%（0/39），貴州本地役用馬和賽馬差異不顯著（P>0.05）；血清抗體個(gè)體陽(yáng)性率分別57.85%（210/363）、1.38%（5/363）、11.29%（41/363）和0%（0/363），其中貴州本地役用馬陽(yáng)性率分別為38.16%（87/228）、4.39%（1/228）、8.33%（19/228）和0%（0/228），賽馬陽(yáng)性率分別為91.11%（123/135）、2.96%（4/135）、16.30%（22/135）和0%（0/135）。相比之下，A型流感病毒及馬動(dòng)脈炎病毒抗體陽(yáng)性率存在差異（P＜0.01或0.01＜P＜0.05），馬皰疹病毒1/4型病毒抗體陽(yáng)性率差異不顯著（P>0.05）。[結(jié)論]調(diào)查表明貴州省部分馬群存在不同程度的馬流感病毒、馬皰疹病毒1/4型或馬動(dòng)脈炎病毒感染。

馬；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）；馬流感；馬鼻肺炎；馬病毒性動(dòng)脈炎；血清學(xué)調(diào)查

近年來(lái)，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）通報(bào)了數(shù)十起馬病疫情，一些疫病出現(xiàn)新情況、新特點(diǎn)，因此，積極預(yù)防控制馬病就顯得十分重要[1]。馬流行性感冒（equine inf uenza）簡(jiǎn)稱(chēng)馬流感，主要是由正粘病毒科流感病毒屬A型馬流感病毒（Equine inf uenza virus，EIV） H7N7或H3N8亞型引起的馬屬動(dòng)物急性、高度接觸性傳染病，以發(fā)熱、咳嗽、流漿液性鼻液為特征，主要經(jīng)呼吸道和消化道感染，各種年齡、品種和性別的馬都易感[2-3]。馬鼻肺炎（equine rhinopneumonitis，ER）是馬皰疹病毒1/4型（equine herpesvirus type 1/4，EHV-1/4）引起的以呼吸道癥狀、妊娠馬流產(chǎn)、胎兒死亡及少見(jiàn)的神經(jīng)癥狀為特征的馬屬動(dòng)物高度接觸性傳染病，世界各地都有發(fā)生，經(jīng)濟(jì)損失巨大，銷(xiāo)售和賽事過(guò)程接觸病原體的風(fēng)險(xiǎn)最高[4-5]，我國(guó)也有該病流行報(bào)道[6-8]。馬病毒性動(dòng)脈炎（equine viral arteritis，EVA）又稱(chēng)馬傳染性動(dòng)脈炎，是由馬動(dòng)脈炎病毒（equine arteritis virus，EAV）引起的一種急性傳染病，以泛脈管炎誘發(fā)的水腫、出血及孕馬流產(chǎn)為特征，其自然暴發(fā)與實(shí)驗(yàn)感染表現(xiàn)癥狀不同，易與其他馬病混淆，可根據(jù)病理變化、病原體或血清抗體區(qū)分診斷[9]，我國(guó)華南、東北及西北地區(qū)有流行報(bào)道[10-11]。非洲馬瘟（African horse sickness，AHS）是由非洲馬瘟病毒（African horse sickness virus，AHSV）通過(guò)媒介昆蟲(chóng)傳播引起的馬屬動(dòng)物急性或亞急性傳染病，以發(fā)熱、皮下結(jié)締組織和肺水腫及內(nèi)臟出血為特征，病死率高達(dá)95%[12]。

上述4種馬病都是OIE規(guī)定的必須報(bào)告的動(dòng)物疫病，其中非洲馬瘟被我國(guó)列為一類(lèi)動(dòng)物疫病。近年來(lái)隨著賽馬業(yè)的發(fā)展，這類(lèi)疫病傳播速度和范圍也在加快和擴(kuò)大，發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)不斷增加。2011年第九屆全國(guó)少數(shù)民族傳統(tǒng)體育運(yùn)動(dòng)會(huì)在貴州成功舉辦，馬術(shù)參賽馬匹的檢疫開(kāi)啟了馬病研究工作，為深入了解貴州貴州省馬傳染病的流行狀況，我們對(duì)馬流感、馬鼻肺炎、馬病毒性動(dòng)脈炎和非洲馬瘟這4種病毒性傳染病進(jìn)行了血清學(xué)調(diào)查。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品 待檢血清采自貴州省9個(gè)市（州）及第九屆民運(yùn)會(huì)參賽馬匹。全群采集民運(yùn)會(huì)8個(gè)參賽代表隊(duì)馬匹血清135份，隨機(jī)抽樣采集9市（州）13縣18個(gè)鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）30個(gè)村及1個(gè)市場(chǎng)馬匹血清228份。按常規(guī)方法采血、分離血清后-20 ℃冷凍備用。

1.1.2 試劑 馬A型流感病毒、馬皰疹病毒1/4型、馬動(dòng)脈炎病毒和非洲馬瘟病毒ELISA抗體檢測(cè)試劑分別是INGEZIM INFLUENZA A 1.0.FLU. K3、INGEZIM RINONEUMONITIS 14.HVE.K1、INGEZIM ARTERITIS 14.EA.K1和INGEZIM AHSV COMPAC PLUS 14.AHS.K3 （西班牙）。

1.2 方法

1.2.1 檢測(cè)方法 按商業(yè)試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，樣品稀釋時(shí)說(shuō)明書(shū)中規(guī)定的血清及稀釋液體積增加1倍，便于充分混勻以減少檢測(cè)誤差。

1.2.2 數(shù)據(jù)分析 χ2檢驗(yàn)使用下載軟件《卡方檢驗(yàn)計(jì)算器》，群陽(yáng)性率檢驗(yàn)采用直接計(jì)算概率法、總體陽(yáng)性率檢驗(yàn)使用發(fā)生數(shù)格式，將發(fā)生數(shù)（陽(yáng)性數(shù)）和未發(fā)生數(shù)（陰性數(shù)）或樣本數(shù)（總數(shù)）輸入相應(yīng)位置，即可得χ2值及P范圍。

2 結(jié) 果

具體檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。

表 1 馬血清抗體檢測(cè)結(jié)果

2.1 群體陽(yáng)性率

2.1.1 A型流感病毒抗體群陽(yáng)性率為79.49%（31/39）。其中，貴州群陽(yáng)性率為74.19%（23/31）、賽馬群陽(yáng)性率為100%（8/8），兩者差異不顯著（P>0.05）。

2.1.2 皰疹病毒1/4型抗體群陽(yáng)性率為7.69%（3/39）。其中，貴州群陽(yáng)性率為3.23% （1/31）、賽馬群陽(yáng)性率為 25.00%（2/8），兩者差異不顯著（P>0.05）。

2.1.3 動(dòng)脈炎病毒抗體群陽(yáng)性率為43.59%（17/39）。其中，貴州群陽(yáng)性率為41.93% （13/31）、賽馬群陽(yáng)性率為 50.00%（4/8），兩者差異不顯著（P>0.05）。

2.1.4 非洲馬瘟病毒抗體群陽(yáng)性率為0%（0/39）。

2.1.5 A型流感病毒和馬皰疹病毒1/4型雙抗體群陽(yáng)性率為5.12%（2/39）。其中，貴州群陽(yáng)性率為0%（0/31）、賽馬群陽(yáng)性率為25%（2/8），兩者差異顯著（P＜0.05）。

2.1.6 A型流感病毒和馬動(dòng)脈炎病毒雙抗體群陽(yáng)性率為28.21%（11/39）。其中，貴州群陽(yáng)性率為22.58% （7/31）、賽馬群陽(yáng)性率為 50%（4/8），兩者差異不顯著（P>0.05）。

2.2 樣本陽(yáng)性率

2.2.1 A型流感病毒抗體總體陽(yáng)性率為57.85%（210/363）。其中，貴州本地役用馬陽(yáng)性率為38.16%（87/228），賽馬陽(yáng)性率為91.11%（123/135），兩者差異極顯著（P＜0.01）。

2.2.2 皰疹病毒1/4型抗體總體陽(yáng)性率為1.38%（5/363）。其中，貴州本地役用馬陽(yáng)性率為4.39%（1/228），賽馬陽(yáng)性率為2.96%（4/135），兩者差異不顯著（P>0.05）。

2.2.3 動(dòng)脈炎病毒抗體總體陽(yáng)性率為11.29%（41/363）。其中，貴州本地役用馬陽(yáng)性率為8.33%（19/228），賽馬陽(yáng)性率為16.30%（22/135），兩者差異顯著（0.01＜P＜0.05）。

2.2.4 非洲馬瘟病毒抗體總體陽(yáng)性率為0%（0/363）。

2.2.5 A型流感病毒和馬皰疹病毒1/4型雙抗體總體陽(yáng)性率為1.10%（4/363）。其中，貴州本地役用馬陽(yáng)性率為0%（0/228），賽馬陽(yáng)性率為2.96%（4/135），兩者差異顯著（0.01＜P＜0.05）。

2.2.6 A型流感病毒和馬動(dòng)脈炎病毒雙抗體總體陽(yáng)性率為5.79%（21/363）。其中，貴州本地役用馬陽(yáng)性率為4.39% （1/228），賽馬陽(yáng)性率為14.81%（20/135），兩者差異極顯著（P＜0.01）。

3 討論

本次馬傳染性疫病血清學(xué)調(diào)查涉及民運(yùn)會(huì)8個(gè)代表隊(duì)全群馬血清135份及隨機(jī)抽取9市（州）13縣18個(gè)鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）30個(gè)村及1個(gè)市場(chǎng)的馬血清228份，采樣馬群未接種過(guò)所調(diào)查病種疫苗。馬A型流感病毒、馬皰疹病毒1/4型、馬動(dòng)脈炎病毒和非洲馬瘟病毒抗體群陽(yáng)性率分別為79.49%（31/39）、7.69 %（3/39）、43.59%（17/39）和0%（0/39），樣本總體陽(yáng)性率分別為57.85%（210/363）、1.38%（5/363）、11.29%（41/363）和0%（0/363），貴州本地役用馬和賽馬A型流感病毒抗體總體陽(yáng)性率及A型流感病毒和馬動(dòng)脈炎病毒雙抗體總體陽(yáng)性率差異極顯著（P＜0.01）、馬動(dòng)脈炎病毒抗體總體陽(yáng)性率及A型流感病毒和馬皰疹病毒1/4型雙抗體總體陽(yáng)性率差異顯著（0.01＜P＜0.05）、馬皰疹病毒1/4型病毒抗體總體陽(yáng)性率及同病種抗體（A型流感病毒和馬皰疹病毒1/4型雙抗體除外）群陽(yáng)性率差異不顯著（P>0.05），這為區(qū)別防控這類(lèi)疫病提供了依據(jù)。

自1956年分離H7N7亞型、1963年分離H3N8亞型馬流感病毒以來(lái)，世界各地兩型馬流感均有暴發(fā)流行，近年來(lái)ELISA 檢測(cè)方法在我國(guó)的馬流感防治與監(jiān)測(cè)中也發(fā)揮著重要的作用[3]。梁基等（1991）采用血凝抑制試驗(yàn)（H I）檢測(cè)H7N7亞型陽(yáng)性率為0%（0/879），H3N8 亞型陽(yáng)性率在30.5%～65.8 % 之間，平均為45.9%（537/1204），非馬流感流行區(qū)檢出率為零[2]。此次血清學(xué)調(diào)查采用國(guó)際上通用的A型流感ELISA試劑檢測(cè)貴州本地役用馬陽(yáng)性率（38.16%）明顯低于賽馬陽(yáng)性率（91.11%）（P＜0.01），考慮到貴州省的馬群檢出陽(yáng)性抗體74.19%（23/31）和賽馬群陽(yáng)性率100%（8/8）相比差異不顯著（P>0.05），該病在貴州省的流行情況有待進(jìn)一步調(diào)查。

馬鼻肺炎在大量養(yǎng)馬的國(guó)家呈地方性流行，大多數(shù)成年馬存在EHV-1/4抗體，有些地區(qū)感染率高達(dá)90%，3歲以下的馬常呈急性、熱性呼吸道病征經(jīng)過(guò)并很快傳遍全群。成年馬攜帶EHV-1/4病毒常呈亞臨床感染，1～2周內(nèi)可完全恢復(fù)，但可明顯影響賽馬比賽，該病容易與其他病原導(dǎo)致的上呼吸道感染、流產(chǎn)或神經(jīng)性疾病相混淆，需要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)進(jìn)行確診[4-6]。此次調(diào)查顯示馬皰疹病毒1/4型抗體總體群陽(yáng)性率為7.69 %、總體陽(yáng)性率為1.38 %，貴州本地役用馬與賽馬相比馬皰疹病毒1/4型病毒抗體群及總體陽(yáng)性率差異不顯著（P>0.05），與單文魯?shù)龋?003）報(bào)道總體陽(yáng)性率0.86%（25/2821）[7]接近（P>0.05），而與阿依吐拉·肉孜等（2013）報(bào)道總體陽(yáng)性率16.04%（238/1484）[8]差異極大（P＜0.01），考慮貴州省特殊的地理位置和畜群管理實(shí)際，本次調(diào)查為防治馬鼻肺炎提供了一定的參考依據(jù)。

馬病毒性動(dòng)脈炎是馬的全球性傳染病，能引起嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[9]。李紅梅等（2012）報(bào)道華南及華中地區(qū)賽馬陽(yáng)性率分別為26%和0%、東北及西北地區(qū)役用馬陽(yáng)性率分別為8．26%和7．55%[10]，阿依吐拉·肉孜等（2013）曾報(bào)道新疆4個(gè)地區(qū)馬匹總體陽(yáng)性率為0.46%（2/435）[11]。此次調(diào)查顯示總體陽(yáng)性率為11.29%（41/363），其中貴州本地役用馬和賽馬陽(yáng)性率分別為8.33%（19/228）和16.30%（22/135），兩者差異顯著（0.01＜P＜0.05）。近年來(lái)隨著馬術(shù)運(yùn)動(dòng)和地區(qū)貿(mào)易的開(kāi)展，馬匹及其產(chǎn)品的流動(dòng)變得頻繁，馬病毒性動(dòng)脈炎有可能危害我國(guó)養(yǎng)馬業(yè)健康發(fā)展，有必要加強(qiáng)監(jiān)測(cè)、有效防控此病。

非洲馬瘟對(duì)社會(huì)、經(jīng)濟(jì)影響極大，高密度易感馬群及庫(kù)蠓屬媒介昆蟲(chóng)的存在是該病暴發(fā)的潛在風(fēng)險(xiǎn)[12]，此次調(diào)查顯示貴州本地役用馬和賽馬抗體均呈陰性，表明賽馬所在省份和貴州省目前還未傳入該病，我們要繼續(xù)加強(qiáng)監(jiān)控，嚴(yán)防本病。

此次調(diào)查還發(fā)現(xiàn)在賽馬樣本中同時(shí)檢測(cè)出A型流感病毒和馬皰疹病毒1/4型雙抗體陽(yáng)性率為2.96%，在貴州本地役用馬中未發(fā)現(xiàn)；而A型流感病毒和馬動(dòng)脈炎病毒雙抗體在賽馬和貴州本地役用馬中均檢測(cè)出陽(yáng)性，賽馬陽(yáng)性率為14.81%，20份陽(yáng)性樣品來(lái)自4個(gè)群，但貴州本地役用馬陽(yáng)性率僅為4.39%，這1份陽(yáng)性樣品僅分布于貴州省的一個(gè)采樣點(diǎn)，因此，說(shuō)明同時(shí)感染A型流感病毒和馬皰疹病毒1/4型或馬動(dòng)脈炎病毒的風(fēng)險(xiǎn)賽馬明顯高于本地役用馬，但兩種病之間的關(guān)系有待進(jìn)一步研究。

貴州省馬的地方品種較多，民間有遛馬、賽馬的習(xí)慣，飼養(yǎng)馬匹主要作為役用和交通工具，這次血清學(xué)調(diào)查表明貴州省部分馬群存在不同程度的馬A型流感病毒、馬皰疹病毒1/4型或馬動(dòng)脈炎病毒感染，深入開(kāi)展病原學(xué)調(diào)查、采取綜合防控措施顯得非常必要。

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Serological Investigation of some Equine Diseases in Guzhou

Ran Longzhong1，Hong Nining2

（1.Guizhou Animal Disease Prevention and Control Center，Guiyang，Guizhou 550008；
2.Department of Physiology，School of Basic Medical Sciences，Guiyang Medical University，Guiyang，Guizhou 550004）

Serological Investigation of Infections with Equine Inf uenza Virus，Equine Herpesvirus Type 1/4，Equine Arteritis Virus and African Horse Sickness Virus in Guizhou Province. 363 equine serum samples taken from 31 working and 8 racing horse herds in Guizhou Province were examined for antibodies against equine inf uenza virus （EIV），equine herpesvirus type 1/4 （EHV-1/4），equine arteritis virus （EAV） and African horse sickness virus （AHSV）by enzyme-linked immunosorbert assay （ELISA）.The results showed that the positive rates of the four pathogens in the sampled horses were 57.85%（210/363），1.38%（5/363），11.29%（41/363）and 0%（0/363）and the positive rates in herds were 79.49%（31/39），7.69 %（3/39），43.59%（17/39）and 0%（0/39）respectively.The local working horses were different from racing horses in the positive rate of inf uenza A virus antibody （P < 0.01）and of equine arteritis virus antibody （0.01 < P < 0.05），while the positive rates of herds and the total positive rate of equine herpes virus type 1/4 virus antibody were not signif cant （P>0.05）.

equine；enzyme-linked immunosorbert assay（ELISA）inf uenza；rhinopneumonitis；viral arteritis；serological investigation

S858.21

：B

：1005-944X（2014）11-0086-04

貴州省科學(xué)技術(shù)基金項(xiàng)目“適量采集、安全處理重大動(dòng)物疫病樣品的方法研究”（20102114）

洪尼寧