狀元深海龍酒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

赫媛媛錢 旭

1 河西學(xué)院醫(yī)學(xué)院，甘肅 張掖 734000；2 張掖市人民醫(yī)院，甘肅 張掖 734000

藥物研制和監(jiān)管

狀元深海龍酒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

赫媛媛1錢 旭2

1 河西學(xué)院醫(yī)學(xué)院，甘肅 張掖 734000；2 張掖市人民醫(yī)院，甘肅 張掖 734000

目的建立狀元深海龍酒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法采用薄層色譜法鑒別酒劑中丹參、人參、桑寄生；采用高效液相法對丹參藥材中的丹參酮ⅡA進(jìn)行含量測定。結(jié)果薄層色譜斑點(diǎn)清晰，丹參酮ⅡA在0．06～0．18 μg（r=0．9996）之間呈良好線性，平均回收率為99．81%，RSD=1．08%（n=6）。結(jié)論本法簡便、可靠、準(zhǔn)確，可用于該制劑的質(zhì)量控制。

狀元深海龍酒；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；薄層色譜法；高效液相色譜法

狀元深海龍酒收載于衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)《中藥成方制劑》第十九冊［1］，由海龍、丹參、羊腰子（砂燙）等22味中藥組成，具有補(bǔ)腎益精作用。原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中沒有主要藥味定性及定量測定，質(zhì)量難以控制。為確保安全有效和質(zhì)量可控，本試驗(yàn)制定了狀元深海龍酒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為有效控制本品質(zhì)量提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

Waters 600 E高效液相色譜儀（美國），TG328B型分析天平 （上海天平儀器廠），ZF-1型三用紫外分析儀（無錫科達(dá)儀器廠）。丹參酮ⅡA、人參皂苷Rg1對照品及桑寄生對照藥材（中國藥品生物制品檢定所，批號分別為110766-200416、110703-200421、121075-200402），甲醇（色譜純），其他試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 薄層鑒別

2.1.1 丹參 取狀元深海龍酒50 ml，蒸至無醇味，分別用乙醚20 ml、15 ml、10 ml萃取3次，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)? ml醋酸乙酯溶解，作為丹參供試品溶液。按處方比例及制法制成不含丹參的陰性對照樣品，同供試品溶液制備方法制成丹參陰性對照液。取丹參酮ⅡA對照品適量，加醋酸乙酯使溶解，制成濃度為2 mg/ml的丹參酮ⅡA的對照品溶液。分別吸取上述3種溶液各15 μl，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，置于石油醚（60～90℃）-丙酮（8∶2）的展開劑中，飽和30 min后展開，取出晾干［2-3］。在供試品色譜與對照品色譜相對應(yīng)的位置顯相同暗紅色的斑點(diǎn)，不含丹參的陰性對照溶液色譜無干擾。見圖1。

2.1.2 人參 取狀元深海龍酒50 ml，蒸至無醇味，分別以用水飽和的正丁醇20 ml、15 ml、10 ml萃取3次，合并正丁醇提取液，再分別用25 ml、15 ml的1%的NaOH溶液洗滌兩次，然后再用以正丁醇飽和的水洗至中性。取正丁醇液蒸干，殘?jiān)? ml甲醇溶解，作為人參供試品溶

液。按處方比例及制法制成不含人參的陰性對照樣品，同供試品溶液制備方法制成人參陰性對照液。取人參皂苷Rg1對照品適量，加甲醇溶解，制成濃度為1 mg/ml的人參皂苷Rg1的對照品溶液。分別吸取上述3種溶液各15 μl，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，置于氯仿-甲醇-水（13∶7∶1）的展開劑中，飽和30min后展開，取出晾干，并噴以10%硫酸乙醇試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)清晰［4-5］。在供試品色譜與對照品色譜相對應(yīng)的位置顯相同褐色的斑點(diǎn)，不含人參的陰性對照溶液色譜無干擾。見圖2。

2.1.3 桑寄生 取狀元深海龍酒50 ml，蒸干，殘?jiān)蛹状?水（1∶1）60 ml，超聲30 min，濾過，濾液水浴濃縮至約20 ml，加水10 ml，再加稀硫酸0.5 ml，超聲30 min，用醋酸乙酯振搖提取2次，每次25 ml，合并提取液，濃縮至約1 ml，作為桑寄生供試品溶液。按處方比例及制法制成不含桑寄生的陰性對照樣品，同以供試品溶液制備方法制成桑寄生陰性對照液。取桑寄生對照藥材1 g，同桑寄生的供試品溶液制備方法制成桑寄生對照藥材溶液。分別吸取上述3種溶液各15 μl，點(diǎn)于同一用0.5%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，置于甲苯（水飽和）-甲酸乙酯-甲酸（5∶4∶1）的展開劑中，飽和30 min后展開，取出晾干，噴以5%三氯化鋁乙醇溶液顯色，于紫外光燈365 nm下檢視［2］。在供試品色譜與對照品色譜相對應(yīng)的位置顯相同黃綠色熒光斑點(diǎn)，不含桑寄生的陰性對照溶液色譜無干擾。見圖3。

圖1 丹參薄層色譜

圖2 人參薄層色譜

圖3 桑寄生薄層色譜

2.2 含量測定［6］

2.2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性 色譜柱：C18柱（4.0×250 mm，5 μm）；流動相：甲醇-水（80∶10）；流速1.0 ml/min；檢測波長270 nm；柱溫：35℃；進(jìn)樣量：10 μl，理論塔板數(shù)按丹參酮ⅡA峰計(jì)算不低于2000。

2.2.2 供試品溶液的制備 精密量取狀元深海龍酒50 ml，蒸至約5～10 ml，加入10 g中性Al2O3（100～200），攪拌均勻，裝柱（15 mm），無水乙醇洗脫，收集洗脫液150 ml，蒸干，殘?jiān)眠m量甲醇溶解，并轉(zhuǎn)移至5 ml棕色量瓶，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

2.2.3 對照品溶液的制備 取丹參酮ⅡA對照品適量，精密稱定，置棕色容量瓶，加甲醇至刻度，搖勻，即得對照品溶液（0.008 mg/ml）。

2.2.4 線性關(guān)系考察 精密吸取0.008 mg/ml的丹參酮ⅡA對照品溶液5、8、10、12、15、20 μl進(jìn)樣，測定峰面積，以進(jìn)樣量（μg）為自變量X，峰面積分值為因變量Y，進(jìn)行回歸分析，得回歸方程：Y=116.37 X +1.3312（r=0.9996），線性范圍0.06～0.18 μg。

2.2.5 精密度試驗(yàn) 精密吸取同一供試品溶液20 μl，重復(fù)測定5次，結(jié)果峰面積的RSD為1.30%，表明精密度良好。

2.2.6 重復(fù)性考察 取狀元深海龍酒6份，按含量測定方法測定，結(jié)果峰面積的RSD為1.31%，表明該法重復(fù)性良好。

2.2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 吸取同一狀元深海龍酒供試品溶液適量，于0、2、4、8h分別進(jìn)樣測定，結(jié)果RSD為0.84%，表明本品在8 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.2.8 回收率試驗(yàn) 取已知含量（丹參酮ⅡA為0.4316 μg/ml）的狀元深海龍酒5份，每份100 ml，再分別精密加入對照品溶液4 ml，依法制備供試品溶液，按上述色譜條件進(jìn)行測定，結(jié)果平均回收率為99.81%，RSD為1.08%（n=5）。

2.2.9 樣品測定 取5批樣品，依法制備供試品溶液，進(jìn)行測定，結(jié)果丹參酮ⅡA平均含量為0.4616 μg/ml ，RSD為1.19%。

3討論

3.1 供試品溶液的制備

采用中性氧化鋁柱洗脫的方法除去蔗糖，可降低對設(shè)備的損害及對參酮ⅡA的損耗，操作簡單，分離效果好，對于控制狀元深海龍酒的質(zhì)量有一定的意義。

3.2 增加了丹參、人參、桑寄生的薄層色譜定性鑒別

丹參中丹參酮ⅡA的含量測定，方法簡便，重現(xiàn)性好，可較好地控制狀元深海龍酒的質(zhì)量。

［1］中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.WS3-B-3655-98，中華人民共和國衛(wèi)生藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑（第十九冊）［S］.北京：人民衛(wèi)生出版社，1998，153.

［2］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（1部）［S］.北京:

中國醫(yī)藥科技出版社，2010：8，70，280.

［3］吳笛，王德勤，李楚源.復(fù)方丹參片薄層色譜鑒別方法研究［J］.藥物分析雜志，2012，32（9）：1658-1660.

［4］肖飛，李衛(wèi)民，李其鳳.益心舒膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)［J］.中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011，17（20）：85-88.

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［6］王敏，王逢春，郭琪.丹參藥材脂溶性有效成分的快速指紋圖譜研究［J］.解放軍醫(yī)藥雜志，2013，25（11）：78-80.

Quality Standards Control of Zhuangyuan Shenhailong Liquor

HE Yuanyuan1QIAN Xu21 School of Medicine，Hexi University，Zhangye Gansu 734000，China；2 Zhangye Municipal people's hospital，Zhangye Gansu 734000，China

ObjectiveTo establish standards of Zhuangyuan Shenhailong Liquor．MethodsTLC was adopted to identify Radix Salviae Miltiorrhizae，Radix et Rhizoma Ginseng and Ramulus TAxilli． HPLC was adopted to content determination of Tanshinone ⅡA in Radix Salviae Miltiorrhizae．ResultsThe TLC spots were quite clear． Tanshinone ⅡA showed a good linear relationship in a rang of 0．06～0．18μg（r=0．9996）．The average recovery was 99．81% with RSD 1．08%（n=6）．ConclusionThe method is simple， reliable， accurate， and can be used for the quality control of Zhuangyuan Shenhailong Liquor．

Zhuangyuan Shenhailong Liquor，Quality standard，TLC，HPLC

R286

B

1674-9316（2014）23-0089-03

10．3969/J．ISSN．1674-9316．2014．23．052