菲律賓蛤仔凝集素抑菌機(jī)制的研究

佟長(zhǎng)青，李琦，曲敏，金橋，李偉

(大連海洋大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院 遼寧省水產(chǎn)品加工及綜合利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧 大連116023)

目前，已有大量文獻(xiàn)報(bào)道了海洋貝類(lèi)凝集素所具有的抑菌現(xiàn)象，但對(duì)于其抑菌機(jī)理的研究尚不完全清楚。抑菌劑發(fā)揮抑菌作用，首先需要與細(xì)菌細(xì)胞膜結(jié)合，如具有抗菌活性的核酸酶和抗菌肽通過(guò)結(jié)合在細(xì)菌細(xì)胞膜上的脂蛋白受體來(lái)發(fā)揮抗菌活性［1-2］。凝集素可以與細(xì)菌細(xì)胞膜上的寡糖鏈結(jié)合，但凝集素結(jié)合細(xì)菌作用與抑制細(xì)菌活性不具有相關(guān)性，如貽貝凝集素(CGL)具有凝集和抑制枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis、大腸桿菌E.coli 的作用，但CGL 對(duì)金黃色葡萄球菌Staphylococcus aureus卻不具有凝集作用，只具有抑制作用［3-4］。凝集素通過(guò)糖結(jié)合結(jié)構(gòu)域來(lái)實(shí)現(xiàn)結(jié)合細(xì)菌的作用，但凝集素的糖結(jié)合結(jié)構(gòu)域在其抑菌功能過(guò)程中不起決定性作用，因此，可以通過(guò)研究凝集素參與發(fā)揮抑菌作用的結(jié)構(gòu)域來(lái)獲得其抑菌機(jī)理。本研究中，考察了菲律賓蛤仔Ruditapes philippinarum 凝集素(MCLT)對(duì)細(xì)菌呼吸代謝的影響，MCL-T 與金黃色葡萄球菌外膜蛋白(OMP)的相互作用，以及MCL-T 具有的核酸酶(RNase)活性，旨在為全面了解凝集素的抑菌機(jī)制提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

MCL-T 由遼寧省水產(chǎn)品加工及綜合利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室制備;革蘭氏陽(yáng)性菌金黃色葡萄球菌ATCC25923和枯草芽孢桿菌ATCC6633 取自遼寧出入境檢驗(yàn)檢疫局;酵母RNA、辣根過(guò)氧化物酶(Horse radish peroxidase，HRP)、透析袋(8000 -14000)購(gòu)于北京索萊寶科技有限公司;細(xì)菌總RNA 快速抽提試劑盒、細(xì)菌基因組DNA 快速抽提試劑盒、細(xì)菌蛋白抽提試劑盒購(gòu)于生工生物工程(上海)股份有限公司;96 孔U 型酶標(biāo)板購(gòu)于丹麥NUNC 公司;其他試劑均為市售國(guó)產(chǎn)分析純。

1.2 方法

1.2.1 MCL-T 對(duì)細(xì)菌呼吸代謝的影響試驗(yàn) 參照李偉等［5］的方法，用牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基活化枯草芽孢桿菌及金黃色葡萄球菌后，用含0.15 mol/L NaCl 的0.1 mol/L PBS 溶液(pH 7.4)清洗3次，然后用PBS 制成OD600nm值為1.0 的菌懸液。

取15 mL PBS、1 mL 1%的葡萄糖溶液、1 mL菌懸液置于測(cè)量瓶中劇烈攪拌5 min。將溶氧測(cè)定儀傳感器置于菌懸液中，密封后開(kāi)動(dòng)磁力攪拌器，每隔1 min 記錄1次，記錄10 min 內(nèi)平均溶氧含量(mg/L)，計(jì)算空白對(duì)照的耗氧速率。

在空白溶液中分別加入100 μL 50 mg/mL Na3PO4，100 μL 50 mg/mL 丙二酸，100 μL 50 mg/mL碘乙酸，100 μL 12.5 mg/mL MCL-T，100 μL 50 mg/mL Na3PO4+100 μL 12.5 mg/mL MCLT，100 μL 50 mg/mL 碘乙酸+100 μL 12.5 mg/mL MCL-T，100 μL 50 mg/mL 丙二酸+100 μL 12.5 mg/mL MCL-T，測(cè)定存在抑菌劑時(shí)菌體耗氧速率。

按照文獻(xiàn)［6 -7］中的方法，計(jì)算抑制劑對(duì)細(xì)菌的呼吸抑制率IR和典型抑制劑對(duì)MCL-T 的呼吸疊加抑制率RR。

1.2.2 MCL-T 對(duì)細(xì)菌DNA、RNA和可溶性蛋白合成的影響試驗(yàn) 將枯草芽孢桿菌及金黃色葡萄球菌在牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中活化30 min 后，分裝于無(wú)菌試管中(3 mL/管)，再加入不同質(zhì)量濃度的MCL-T 溶液，36 ℃下以120 r/min在空氣浴恒溫振蕩器中孵育6 h。

按照試劑盒說(shuō)明書(shū)提取DNA、RNA和可溶性蛋白，并根據(jù)二苯胺法、光度法、Lowry等［8］的方法分別測(cè)量DNA、RNA和可溶性蛋白含量。

1.2.3 細(xì)菌NOS 活性的測(cè)定 按照“1.2.2”節(jié)方法，將菌懸液于4 ℃下以9000 r/min 離心20 min，取上清液，按文獻(xiàn)［9］中方法計(jì)算NO 含量。

1.2.4 金黃色葡萄球菌OMP 的分離 取用LB 培養(yǎng)基培養(yǎng)的金黃色葡萄球菌，用生理鹽水洗滌3次后，在冰水浴中用超聲波破碎(400 W，間隔時(shí)間3 s，工作時(shí)間3 s，總時(shí)間30 min)后，按文獻(xiàn)［10］中的方法提取金黃色葡萄球菌的OMP 后，透析、凍干。

1.2.5 MCL-T -HRP 固相吸附的測(cè)試 取5 mg HRP 溶解于1 mL ddH2O 中，加入0.2 mL 新配制的0.1 mol/L NaIO4溶液，室溫下避光攪拌20 min，4 ℃下在1 mmol/L 醋酸鈉緩沖溶液(pH 4.4)中透析過(guò)夜;將透析液中加入20 μL 0.2 mol/L 碳酸鹽緩沖溶液(pH 9.5)后，立即加入10 mg 溶解于1 mL 0.01 mol/L 碳酸鹽緩沖液的MCL-T，室溫下避光輕輕攪拌2 h;再加入0.1 mL 新配的4.0 mg/mL NaBH4溶液，混勻，4 ℃下靜置2 h，4 ℃下在0.15 mol/L PBS 溶液(pH 7.4)中透析過(guò)夜，制得MCL-T-HRP［11］。

將金黃色葡萄球菌的OMP 溶于0.1 mol/L 碳酸鹽緩沖溶液(pH 9.5)中，分別取100 μL 溶液加入96 孔板中，4 ℃下過(guò)夜;用含0.15 mol/L NaCl、0.05% Tween 20 的0.02 mol/L PBS 洗 液(pH 7.2)洗滌3次，每次間隔3 min;洗滌后，每孔加入200 μL 含有0.1% BSA、0.15 mol/L NaCl 的BSA-PBS，4 ℃下封閉過(guò)夜。以上述相同方式用PBS 洗液洗滌3次。

將MCL-T-HRP 溶液稀釋100 倍后，再進(jìn)行倍比 稀 釋(1∶ 100、1∶ 200、1∶ 400、1∶ 800、1∶1600)。取各稀釋液100 μL 加入到金黃色葡萄球菌OMP 包被的96 孔板中，4 ℃下過(guò)夜;用PBS洗液洗滌3次，加入100 μL 新配制的4 mg 鄰苯二胺與10 mL 磷酸- 檸檬酸(pH 5.0)的混合液，以及15 μL H2O2溶液，37 ℃下孵育10 min，以2 mol/L H2SO4終止反應(yīng)，于492 nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度?？瞻讓?duì)照以BSA 代替金黃色葡萄球菌的OMP。每個(gè)試驗(yàn)設(shè)3 個(gè)重復(fù)。

1.2.6 pH 對(duì)MCL-T-HRP 結(jié)合OMP 的影響試驗(yàn)將OMP 包被96 孔板，各孔內(nèi)分別加入90 μL 0.05 mol/L pH 為5.0 的HAc-NaAc、pH 為6.0 的NaH2PO4- Na2HPO4、pH 為7.0 的NaH2PO4-Na2HPO4、pH 為8.0 的Tris - HCl、pH 為9.0 的Gly - NaOH 溶液，然后再加入90 μL MCL- T -HRP，4 ℃下過(guò)夜。其余的洗滌、顯色反應(yīng)、吸光度測(cè)定過(guò)程同MCL-T-HRP 的制備。

1.2.7 GalNAc、PSM 對(duì)MCL-T -HRP 結(jié)合OMP的影響試驗(yàn) 將OMP 包被96 孔板，各孔內(nèi)分別加入質(zhì)量濃度為3.25、1.63、0.81、0.41、0.20 mg/mL的GalNAc 20 μL，再加入稀釋10 倍的MCL-T-HRP 20 μL，4 ℃下過(guò)夜。其余的洗滌、顯色反應(yīng)、吸光度測(cè)定過(guò)程同MCL-T-HRP 的制備。

將OMP 包被96 孔板，各孔內(nèi)分別加入質(zhì)量濃度為5.00、2.50、1.25、0.63、0.32 mg/mL 的PSM 溶液50 μL，然后再加入稀釋100 倍的MCLT-HRP 50 μL，4 ℃下過(guò)夜。其余的洗滌、顯色反應(yīng)、吸光度測(cè)定過(guò)程同MCL-T-HRP 的制備。

1.2.8 MCL-T RNase 活性的測(cè)定 依次在離心管中加入25 μL 30 mmol/L DTT，40 μL 10 mg/mL酵母RNA，0、10、20、40、80、160 μL 凝集素溶液，175 μL 0.05 mol/L NaAC -HAC 緩沖液(pH 5.0)，并用ddH2O 補(bǔ)至700 μL，混勻后置于37 ℃水浴鍋中孵育30 min，冰水浴中孵育5 min;加入700 μL 0.02 mol/L La(NO3)3與0.2 mol/L HCl 的混合溶液，混勻后于4 ℃下靜置10 min，4 ℃下以1100 ×g 離心20 min;取上清液300 μL，加入2.7 mL ddH2O 混勻，于260 nm 下測(cè)定吸光度。以雙蒸水代替凝集素做空白對(duì)照［12］，每個(gè)試驗(yàn)設(shè)3 個(gè)重復(fù)，觀察MCL-T 裂解酵母RNA 的情況。

凝集素降解酵母RNA 的活力單位定義為:在37 ℃下，每毫升孵育液中，30 min 催化降解酵母RNA 生成1 mg 產(chǎn)物時(shí)所用凝集素的毫克數(shù)為1 個(gè)活力單位(U)。

依次在離心管中加入25 μL 30 mmol/L DTT，25 μL 1 mg/mL 酵母RNA，0、5、10、20、40、80 μL 凝集素溶液，并用0.05 mol/L NaAC - HAC(pH 5.0)補(bǔ)足至700 μL，其余孵育、吸光度測(cè)定過(guò)程同MCL-T 裂解酵母RNA，并計(jì)算MCL-T 催化降解酵母RNA 的米氏常數(shù)。

1.3 數(shù)據(jù)處理

所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)均以平均值± 標(biāo)準(zhǔn)差表示，用SPSS 13.0 軟件進(jìn)行單因素方差分析，用Duncan 法進(jìn)行多重比較，顯著性水平設(shè)為0.05。

2 結(jié)果與討論

2.1 MCL-T 對(duì)細(xì)菌呼吸代謝的影響

丙二酸、碘乙酸和磷酸鈉分別抑制細(xì)菌呼吸代謝過(guò)程中三羧酸循環(huán)途徑(TCA)、糖酵解途徑(EMP)和磷酸戊糖途徑(HMP)。當(dāng)兩種抑制劑共存時(shí)，若兩種抑制劑具有不同的呼吸代謝抑制途徑時(shí)，這種共存可協(xié)同增加抑制效應(yīng)，而當(dāng)兩種抑制劑具有相同的呼吸代謝抑制途徑時(shí)，這種協(xié)同效應(yīng)降低。因此，通過(guò)觀察每種抑制劑對(duì)細(xì)菌的呼吸抑制率以及組合抑制劑的呼吸抑制率，可以得出未知抑制劑對(duì)細(xì)菌的呼吸代謝抑制途徑［7］。

MCL-T 對(duì)金黃色葡萄球菌及枯草芽孢桿菌表現(xiàn)出較高的抑菌活性［5］。從表1可見(jiàn):MCL-T 對(duì)兩種細(xì)菌均具有呼吸抑制作用，其中MCL-T 對(duì)金黃色葡萄球菌的呼吸代謝抑制率為40.63%，對(duì)枯草芽孢桿菌呼吸代謝抑制率為19.23%;當(dāng)MCLT 分別與丙二酸、碘乙酸和磷酸鈉3種典型抑制劑組合形成組合抑制劑后，磷酸鈉對(duì)MCL-T 的疊加抑制率最小，分別為24.21%和26.67%，這表明MCL-T 抑制這兩種菌糖氧化代謝途徑中的HMP。

2.2 MCL-T 對(duì)細(xì)菌總DNA、總RNA和可溶性蛋白合成的影響

從圖1 -A可見(jiàn)，隨著MCL-T 質(zhì)量濃度的增加，枯草芽孢桿菌的總DNA 含量呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，金黃色葡萄球菌的總DNA 含量呈極緩慢下降趨勢(shì)。多重比較結(jié)果表明:MCL- T 質(zhì)量濃度為160 μg/mL時(shí)，金黃色葡萄球菌的總DNA 含量與空白組有顯著性差異(P＜0.05)，其余質(zhì)量濃度組與空白組均無(wú)顯著性差異(P ＞0.05);MCL-T 質(zhì)量濃度為10 μg/mL以上時(shí)，枯草芽孢桿菌的總DNA含量與空白組均有顯著性差異(P＜0.05)。

表1 MCL-T 對(duì)金黃色葡萄球菌及枯草芽孢桿菌呼吸代謝的影響Tab.1 Effect of MCL- T on respiratory metabolism of bacteria Staphylococcus aureus and Bacillus subtilis

從圖1 -B可見(jiàn):MCL-T 質(zhì)量濃度為0 ～20 μg/mL時(shí)，隨著MCL-T 質(zhì)量濃度的增加，金黃色葡萄球菌總RNA 含量呈快速下降趨勢(shì)，隨著MCL-T 質(zhì)量濃度的繼續(xù)增加，其總RNA 含量下降速度較慢;MCL- T 質(zhì)量濃度為0 ～20 μg/mL時(shí)，隨著MCL-T 質(zhì)量濃度的增加，枯草芽孢桿菌總RNA 含量呈快速下降趨勢(shì)，隨著MCL-T 質(zhì)量濃度的繼續(xù)增加，其總RNA 含量變化不明顯。多重比較結(jié)果表明，MCL- T 質(zhì)量濃度為10 μg/mL以上時(shí)，金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的總RNA 含量與空白組均有顯著性差異(P＜0.05)。

從圖1 -C可見(jiàn):MCL-T 質(zhì)量濃度為0 ～40 μg/mL時(shí)，隨著MCL-T 質(zhì)量濃度的增加，金黃色葡萄球菌中的可溶性蛋白含量呈快速下降趨勢(shì)，隨著MCL-T 質(zhì)量濃度的繼續(xù)增加，其可溶性蛋白含量下降趨勢(shì)變緩;而MCL- T 質(zhì)量濃度為0 ～40 μg/mL時(shí)，隨著MCL-T 質(zhì)量濃度的增加，枯草芽孢桿菌中的可溶性蛋白含量下降較快，當(dāng)MCL-T質(zhì)量濃度為40 μg/mL以上時(shí)，其可溶性蛋白含量下降減緩。多重比較結(jié)果表明，MCL-T 質(zhì)量濃度為20 μg/mL以上時(shí)，金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的可溶性蛋白含量與空白組均有顯著性差異(P＜0.05)。本研究表明，MCL-T 抑制了金黃色葡萄球菌及枯草芽孢桿菌中總DNA、總RNA和可溶性蛋白的合成。

2.3 MCL-T 對(duì)細(xì)菌NOS 的影響

細(xì)菌生長(zhǎng)代謝過(guò)程中，外界環(huán)境中的各種因素對(duì)其產(chǎn)生刺激，使得細(xì)菌產(chǎn)生相應(yīng)的各類(lèi)應(yīng)激信號(hào)。其中一氧化氮(NO)是生物體一氧化氮合酶催化產(chǎn)生的具有抵抗氧應(yīng)激反應(yīng)的物質(zhì)。NO 產(chǎn)生量的多少，在一定程度上反映氧應(yīng)激的強(qiáng)度。采用Griess 試劑測(cè)定液體培養(yǎng)基中亞硝酸鹽的含量，可以計(jì)算出NO 產(chǎn)生的量［13］。

圖1 MCL-T 對(duì)細(xì)菌總DNA、總RNA和可溶性蛋白含量的影響Fig.1 Effect of MCL-T on total DNA，total RNA and protein levels in the bacteria

從圖2可見(jiàn):MCL- T 質(zhì)量濃度為0 ～20 μg/mL時(shí)，金黃色葡萄球菌菌懸液上清液中NO 含量呈上升趨勢(shì)，隨著MCL- T 質(zhì)量濃度的繼續(xù)增加，NO 含量開(kāi)始快速下降;當(dāng)MCL- T 存在時(shí)，枯草芽孢桿菌菌懸液上清液中NO 含量均增加，當(dāng)MCL-T 質(zhì)量濃度為0 ～160 μg/mL時(shí)，NO 含量呈現(xiàn)急劇上升后緩慢下降的趨勢(shì)。多重比較結(jié)果表明:MCL-T在質(zhì)量濃度為20、40 μg/mL時(shí)，金黃色葡萄球菌的NO 產(chǎn)生量與空白組均有顯著性差異(P＜0.05);MCL-T 質(zhì)量濃度為10 μg/mL以上時(shí)，枯草芽孢桿菌NO 產(chǎn)生量與空白組有顯著性差異(P＜0.05)。

圖2 12 h 內(nèi)MCL-T 對(duì)金黃色葡萄球菌及枯草芽孢桿菌NO 產(chǎn)生量的影響Fig.2 Effects of concentrations of MCL-T on production of NO in cultivation medium of S.aureus and B.subtilis in 12 h

2.4 MCL-T 與金黃色葡萄球菌OMP 的相互作用

將提取分離獲得的金黃色葡萄球菌的OMP 與新制備的不同濃度的MCL-T -HRP在96 孔酶聯(lián)免疫吸附板上進(jìn)行結(jié)合測(cè)試，結(jié)果見(jiàn)圖3 -A。從圖3 -A可見(jiàn)，MCL-T 與OMP可以結(jié)合，而且隨著MCL-T 質(zhì)量濃度的增加，與OMP 結(jié)合的量也增加，且在MCL- T 質(zhì)量濃度為0.25 ～2.00 mg/mL 時(shí)，OMP 與MCL-T 的結(jié)合具有含量依賴(lài)關(guān)系。

從圖3 - B可見(jiàn)，隨著PSM 含量的增加，MCL-T 結(jié)合金黃色葡萄球菌OMP 的量顯著下降。這表明，MCL-T 與OMP 的結(jié)合受到PSM 的抑制。PSM 上的糖鏈與其核心蛋白之間是通過(guò)蛋白上Ser或Thr 側(cè)鏈上的羥基與GalNAc 上的羥基通過(guò)O -糖苷鍵連接［14］。PSM 含有12 個(gè)由1 ～5 個(gè)糖殘基組成的糖鏈，其核心為Gal β1 -3 GalNAc α -O-Ser/Thr，該核心結(jié)構(gòu)是PSM 執(zhí)行其功能的重要部分［15］。

從圖3 -C可見(jiàn)，隨著GalNAc 質(zhì)量濃度的增加，MCL-T 結(jié)合金黃色葡萄球菌OMP 的量逐漸下降。這表明，MCL-T 與OMP 的結(jié)合受到Gal-NAc 的抑制。

從圖3 - D可見(jiàn)，當(dāng)pH 值從5 增加到6 時(shí)，MCL-T 結(jié)合金黃色葡萄球菌OMP 的量增加，而隨著pH 值的進(jìn)一步增加，MCL-T 結(jié)合金黃色葡萄球菌OMP 的能力逐漸下降。這表明，MCL- T與OMP 的結(jié)合受到pH 值的影響，且在pH 為6 時(shí)兩者結(jié)合最多。

Odintsova等［16］研究凝集素DTL 時(shí)發(fā)現(xiàn)，該凝集素不僅具有糖結(jié)合位點(diǎn)，還具有膠原蛋白結(jié)合位點(diǎn)，膠原蛋白結(jié)合位點(diǎn)對(duì)于DTL 黏附HeLa 細(xì)胞活性非常重要。對(duì)于MCL- T 與OMP 的結(jié)合來(lái)說(shuō)，MCL-T 上的OMP 結(jié)合位點(diǎn)受到PSM 及GalNAc 的抑制。一般來(lái)說(shuō)，凝集素上的糖結(jié)合位點(diǎn)具有專(zhuān)一性，因此，OMP 結(jié)合位點(diǎn)與糖結(jié)合位點(diǎn)分別存在于凝集素上兩個(gè)不同的結(jié)構(gòu)域中。本研究中，OMP結(jié)合位點(diǎn)受到糖配體結(jié)合凝集素的干擾，表明凝集素分子不是剛性分子;而凝集素與糖配體的結(jié)合導(dǎo)致了其構(gòu)象變化，其與OMP 的結(jié)合結(jié)構(gòu)域亦發(fā)生了改變，以致其與OMP 結(jié)合減少。這表明，MCL-T 分子不是剛性分子，凝集素與糖配體的結(jié)合導(dǎo)致了其構(gòu)象的變化，其功能結(jié)構(gòu)域也發(fā)生了改變。

圖3 MCL-T 結(jié)合金黃色葡萄球菌外膜蛋白的影響因素Fig.3 Factors influencing MCL-T binding to out membrahe proteins(OMP)of S.aureus

2.5 MCL-T 的RNase 活性

在生物體內(nèi)，mRNA、tRNA、rRNA等協(xié)同作用實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)的合成。RNA 經(jīng)降解形成寡核苷酸后，就喪失了其生物功能，生物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝就會(huì)發(fā)生混亂，從而導(dǎo)致生物體死亡。因此，自然界中存在大量起著抑菌作用的RNase。Lin等［17］研究指出，人核酸酶7(hRNase 7)具有對(duì)銅綠假單胞菌Pseudomonas aeruginosa 的抑菌活性。

本研究中，在37 ℃下用MCL-T 進(jìn)行降解酵母RNA 試驗(yàn)，結(jié)果表明，MCL-T 降解酵母RNA 30 min，生成1 mg 寡核苷酸需凝集素127.15 mg(圖4)。通過(guò)作Lineweaver -Burk圖獲得了MCLT 酶解酵母RNA 的米氏常數(shù)Km(37.23)及降解酵母RNA 的速率vmax(0.52 μg/min)。這表明，MCLT 具有RNase 活性，而MCL-T 所具有的RNase 活性是否與其抑菌活性相關(guān)，需進(jìn)一步研究。

圖4 MCL-T 降解酵母RNA 的Lineweaver-Burk圖Fig.4 Lineweaver - Burk of RNA in MCL- T - degrading yeast

從傳統(tǒng)的定義來(lái)講，凝集素通常不具有酶活性，但近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)有許多凝集素具有酶活性。從荷蘭鳶尾Iris hollandica var.Professor Blaauw 及接骨木Sambucus nigra 中提取的凝集素具有酶活性［18-19］;從牛蛙Rana catesbeiana 卵中分離出的唾液酸特異性凝集素(cSBL)具有 RNase 活性［20-22］。cSBL 的氨基酸序列有65%與從該牛蛙肝中的RNase 同源，從結(jié)構(gòu)及功能上來(lái)看，cSBL 屬于人胰RNase 酶超家族?，F(xiàn)在把這些具有酶活性的凝集素稱(chēng)為“凝集酶”(leczymes)。本研究中發(fā)現(xiàn)，MCL- T 具有RNase 活性結(jié)構(gòu)域，這可能是MCL-T 具有抑菌活性的原因之一。

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