瑞香狼毒地上部分化學成分的研究

路利芹，崔海燕，張立春，劉 權，秦 波*

1中國科學院蘭州化學物理研究所中國科學院西北特色植物資源化學重點實驗室/甘肅省天然藥物重點實驗室，蘭州 730000;2內(nèi)蒙古通遼市氣象局，通遼 028000

瑞香狼毒(Stellera chamaejasme L.)為瑞香科狼毒屬多年生草本植物，廣泛分布于中國東北、華北、西南及西北等地區(qū)的草地及高山向陽處。近年來，瑞香狼毒在我國局部草原地區(qū)大面積蔓延，逐漸取代原有物種，形成優(yōu)勢種群，影響草地植物生態(tài)平衡。瑞香狼毒全株有毒，早春時節(jié)，牲畜搶青誤食造成中毒致死，危害草地畜牧業(yè)生產(chǎn)［1］。瑞香狼毒根入藥，能散結(jié)、逐水、止痛、殺蟲，主治水氣腫脹、淋巴結(jié)核、骨結(jié)核［2］。迄今為止，國內(nèi)外對瑞香狼毒根的化學成分及其生物活性進行了大量研究，從中分離得到了二萜類、木脂素類、揮發(fā)油類、香豆素類和黃酮類化合物［3］，但對其地上部分化學成分的研究鮮有報道。為充分開發(fā)利用瑞香狼毒地上部位豐富的植物資源，我們對其化學成分進行了研究，從中分離得到了11 種化合物，結(jié)合理化性質(zhì)和波譜分析，分別鑒定為:1-亞油酸-棕櫚酸-甘油酯(1)亞麻酸(2)，亞油酸(3)，β-谷甾醇(4)，亞麻酸乙酯(5)，西瑞香素(6)，異新狼毒素A(7)，丙二酸單乙酯(8)，傘形花內(nèi)酯(9)，新狼毒素B(10)和龍膽酸(11)。其中，化合物1、8 和11 為首次從該植物中分離得到。

1 儀器與材料

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀SW-CJ-2G 購自瑞士Buchi 公司，柱層析用硅膠(200～300 目)由青島海洋化工廠生產(chǎn)，凝膠Sephadex LH-20 為Pharmacia Fine Chemical 公司生產(chǎn)，薄層色譜用硅膠板GF254(0.20～0.25 mm)為青島海洋化工廠出品。1H 和13C NMR 譜在氘代溶劑中用Varian Mercury-400BB 超導核磁共振儀測定，以TMS 為內(nèi)標，單位為δ ppm。所用化學試劑均為分析純。

瑞香狼毒地上部分實驗樣品2011 年9 月采自甘肅天祝，由甘肅農(nóng)業(yè)大學的徐長林教授鑒定。

2 提取和分離

瑞香狼毒地上部分樣品14 kg，陰干，粉碎，采用滲濾法以95%乙醇提取，提取液經(jīng)減壓濃縮后得棕黑色浸膏約1068 g。將此浸膏懸浮于蒸餾水，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，萃取液減壓濃縮得到上述四個部分萃取物和水相提取物。取石油醚萃取物285 g，硅膠拌樣后上硅膠柱，以石油醚∶丙酮(1∶0～0∶1)梯度洗脫，其中石油醚∶丙酮30∶1 洗脫部分經(jīng)反復硅膠柱層析，得到化合物1(28 mg)、2(8 mg)和3(4 mg)，石油醚∶丙酮10∶1 洗脫部分經(jīng)反復硅膠柱層析，得到化合物4(1020 mg);氯仿萃取物240 g，硅膠拌樣后上硅膠柱，以氯仿∶甲醇(1∶0～0∶1)梯度洗脫，其中氯仿∶甲醇50∶1 洗脫部分經(jīng)反復硅膠柱層析和Sephadex LH-20 純化，得到化合物5(12 mg)和6(30 mg)，氯仿∶甲醇20∶1洗脫部分經(jīng)反復硅膠柱層析和Sephadex LH-20 純化，得到化合物7(17 mg)和8(4 mg);乙酸乙酯萃取物40 g，硅膠拌樣后上硅膠，以氯仿∶甲醇(1∶0～0∶1)梯度洗脫，再經(jīng)反復硅膠柱層析和Sephadex LH-20 純化，得到化合物9(12 mg)、10(520 mg)和11(38 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 黃色油狀物，1H NMR (CD3Cl，400 MHz)δ:5.31 (4H，m，H-9'，H-10'，H-12'，H-13')，4.30 (2H，dd，J=4.3 Hz，11.9 Hz，H-1)，4.17 (2H，dd，J=6.2 Hz，11.9 Hz，H-3)，2.73 (1H，m，H-2)，2.33 (4H，m，H-2'，2'')，0.84 (6H，m，H-18'，16'');13C NMR (CD3Cl，100 MHz)δ:62.2 (t，C-1，3)，69.1 (d，C-2)，173.2 (s，C-1')，174.5 (s，C-1'')，130.2 (d，C-9')，130.1 (d，C-10')，128.1 (d，C-12')，127.9 (d，C-13)，33.9～22.5 (t，CH2)，14.01 (q，C-18'，16'')。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［4］報道一致，故鑒定其為1-亞油酸-棕櫚酸-甘油酯。

化合物2 無色油狀物，1H NMR (CD3Cl，400 MHz)δ:5.36 (6H，m，H-9，10，12，13，15，16)，2.79(4H，br s，H-11，14)，2.35 (2H，t，J=7.2 Hz，H-2)，1.95～2.07 (4H，m，H-8，17)，1.53～1.65 (2H，m，H-3)，1.25～1.45 (8H，m)，0.95 (3H，t，J=7.2 Hz，H-18)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［5］報道一致，故鑒定其為亞麻酸。

化合物3 無色油狀物，1H NMR (CD3Cl，400 MHz)δ:5.36 (4H，m，J=1.2 Hz，H，10，12，13)，2.77 (2H，m，J=6.4 Hz，H-11)，2.35 (2H，t，J=7.2 Hz，H-2)，2.04 (4H，m，J=7.2 Hz，H-8，14)，0.89 (3H，m，J=3.6 Hz，H-18)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［6］報道一致，故鑒定其為亞油酸。

化合物4 無色針狀結(jié)晶，1H NMR (CD3Cl，400 MHz)δ:5.35 (1H，br d，J=4.8 Hz，H-6)，3.58(1H，m，H-3)，1.01 (3H，s，H-29)，0.91 (3H，d，J=8.0 Hz，H-21)，0.85 (3H，m，H-29)，0.84 (3H，m，H-26)，0.74(3H，m，H-27)，0.68(3H，s，H-18)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［7］報道一致，與標準品β-谷甾醇薄層對照Rf值一致，故鑒定為β-谷甾醇。

化合物5 淡黃色油狀物，1H NMR (CD3Cl，400 MHz)δ:4.12 (2H，dd，J=7.2 Hz，-OCH2-)，0.88 (3H，t，J=7.2 Hz，-CH3)，其他數(shù)據(jù)與亞麻酸一致，C 譜上δ=60.1 的峰也證明了有酯基的存在，故鑒定為亞麻酸乙酯。

化合物6 無色結(jié)晶，1H NMR (CD3OD，400 MHz)δ:7.89 (1H，s，H-4)，7.22 (1H，s，H-5)，6.87(1H，s，H-8)，6.39 (1H，d，J=9.6 Hz，H-3')，8.05(1H，d，J=9.2 Hz，H-4)，7.72 (1H，d，J=8.4 Hz，H-5')，7.12 (1H，dd，J=8.4，2.4 Hz，H-6)，7.20(1H，d，J=2.4 Hz，H-8)，3.82 (3H，s，-OCH3);13C NMR (CD3OD，100 MHz)δ:159.9 (C-2)，159.6(C-2')，156.9 (C-7')，154.9 (C-9')，150.4(C-7)，147.4 (C-9)，145.6 (C-3')，144.0 (C-6')，135.7(C-3)，130.9(C-4)，129.8 (C-5')，114.4(C-10)，113.9 (C-10')，113.4 (C-4')，110.1 (C-5)，109.3(C-6)，104.0 (C-8)，102.7 (C-8')，56.0 (-OCH3)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［8］報道一致，故鑒定為西瑞香素。

化合物7 淺黃色粉末，1H NMR (CD3COCD3，400 MHz)δ:7.08 (4H，d，J=8.4 Hz，H-2'，2'''，6'，6''')，6.80 (4H，d，J=8.4 Hz，H-3'，3'''，5'，5''')，5.94 (2H，d，J=2.0 Hz，H-8，H-8'')，5.81 (2H，d，J=2.0 Hz，H-6，H-6'')，5.48(1H，s，H-2，H-2'')，3.33 (2H，s，H-3，3'');13C NMR (CD3COCD3，100 MHz)δ:197.0 (C-4，C-4'')，167.3(C-7，C-7'')，164.9 (C-5，C-5'')，163.9 (C-9，C-9'')，157.9 (C-4'，4''')，128.2 (2'，2'''，6'，6''')，128.0 (C-1'，1''')，116.0 (C-3'，3'''，5'，5''')，102.3 (C-10，C-10'')，96.4 (C-6，C-6'')，95.3 (C-8，C-8'')，81.3(C-2，C-2''')，497.3 (C-3，3'')。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［9］報道一致，故鑒定為異新狼毒素A。

化合物8 白色粉末，1H NMR (CD3COCD3，400 MHz)δ:1.24 (3H，t，J=7.2 Hz，-CH3)，3.37(2H，s，H-2)，4.15 (2H，q，J=7.2 Hz，OCH2)，10.21 (1H，br s，-COOH);13C NMR (CD3COCD3，100 MHz)δ:14.3 (C-5)，41.7 (C-2)，61.5 (C-4)，167.4 (C-3)，168.1 (C-1)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［10］報道一致，故鑒定為丙二酸單乙酯。

化合物9 無色結(jié)晶，1H NMR (CD3COCD3，400 MHz)δ:6.16(1H，d，J=9.2 Hz，H-3)，6.76(1H，d，J=8.4 Hz，H-8)，6.85 (1H，d，J=8.4 Hz，H-6)，7.52(1H，d，J=8.4 Hz，H-5)，7.87 (1H，d，J=9.6 Hz，H-4)，9.5 (1H，br s，-OH);13C NMR(CD3COCD3，100 MHz)δ:160.2 (C-2)，149.7 (C-7)，145.1 (C-8a)，143.7 (C-4)，132.2 (C-8)，118.9 (C-5)，112.5 (C-6)，112.1 (C-3)，111.2 (C-4a)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［11］報道一致，故鑒定為傘形花內(nèi)酯。

化合物10 棕色粉末，1H NMR (CD3COCD3，400 MHz)δ:3.16 (1H，br s，H-3)，3.36 (1H，dd，J=9.2，3.6 Hz，H-3'')，5.17 (1H，d，J=9.2 Hz，H-2)，5.41 (1H，d，J=4.8 Hz，H-2')，5.88 (2H，s，H-6'，H-8')，5.98 (1H，s，H-6)，6.10 (1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，6.77 (2H，J=8.8 Hz，H-13'，H-15')，6.89(2H，d，J=8.4 Hz，H-12'，16')，7.01 (2H，d，J=8.8 Hz，H-13，15)，7.24 (2H，d，J=7.6 Hz，H-12，16);13C NMR (CD3COCD3，100 MHz)δ:49.0 (C-3)，49.8 (C-3'')，80.8 (C-2)，82.8 (C-2'')，95.7 (C-8)，96.0 (C-8'')，96.8 (C-6)，97.1 (C-6'')，103.7(C-10)，104.8 (C-10'')，116.0 (C-3'，5')，116.4(C-3'''，5''')，128.1 (C-2'，6')，128.5 (C-1')，129.9(C-1''')，130.6 (C-2'''，6''')，158.3(C-4')，158.6(C-4''')，162.8 (C-9)，164.8 (C-5，9'')，165.3 (C-5'')，167.3 (C-7)，167.5 (C-7'')，196.0(C-4)，198.1 (C-4'')。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［12］報道一致，故鑒定為新狼毒素B。

化合物11 無色針晶，1H NMR (CD3COCD3，400 MHz)δ:6.85(1H，d，J=8.8 Hz，H-3)，7.09(1H，dd，J=8.8 Hz，3.2 Hz，H-4)，7.36 (1H，d，J=3.2 Hz，H-6)，10.49 (2H，brs，2，5-OH);13C NMR(CD3COCD3，100 MHz)δ:112.8 (C-3)，115.5 (C-6)，118.7 (C-1)，124.9 (C-4)，150.2 (C-5)，156.3(C-2)，172.3 (-COOH)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻［13］報道一致，故鑒定為龍膽酸。

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