迪瑞尿液檢驗工作站和顯微鏡鏡檢對尿中紅細胞、白細胞檢測結(jié)果的對比分析

張磊

(濉溪縣醫(yī)院檢驗科，安徽濉溪235100)

迪瑞尿液檢驗工作站和顯微鏡鏡檢對尿中紅細胞、白細胞檢測結(jié)果的對比分析

張磊

(濉溪縣醫(yī)院檢驗科，安徽濉溪235100)

目的探討迪瑞尿液檢驗工作站(由H-800全自動尿液分析儀和FUS-200全自動尿有形成分分析儀組成)、涂片顯微鏡檢測尿紅細胞(RBC)、白細胞(WBC)結(jié)果的對比性分析。方法隨機選取我院479例住院患者尿液標本，分別用H-800全自動尿液分析儀、FUS-200全自動尿有形成分分析儀、涂片顯微鏡檢測尿紅細胞(RBC)、白細胞(WBC)，對比性分析兩個參數(shù)結(jié)果。結(jié)果三種方法對尿液中的RBC、WBC檢出率較一致。(1)H-800全自動尿液分析儀：RBC敏感性為93.3%，特異性為95.5%，假陰性率6.7%、假陽性率4.5%、符合率94.2%；WBC敏感性為77.5%，特異性為99.3%，假陰性率22.5%、假陽性率0.7%、符合率97.5%。(2)用FUS-200全自動尿有形成分分析儀與顯微鏡鏡檢對比：RBC敏感性為80.0%，特異性為99.3%，假陰性率20.0%、假陽性率0.7%、符合率96.2%；WBC敏感性為95.0%，特異性為99.1%，假陰性率5%、假陽性率0.9%、符合率98.8%；H-800全自動尿液分析儀與FUS-200全自動尿有形成分分析儀對RBC、WBC檢查結(jié)果對比分析P＜0.05，表示兩種檢測方法差異有統(tǒng)計學意義。由H-800全自動尿液分析儀、FUS-200全自動尿有形成分分析儀組合而成的尿液檢驗工作站對尿中紅細胞和白細胞的檢出率，可達93.7%、96.7%。結(jié)論H-800全自動尿液分析儀、FUS-200全自動尿有形成分分析儀兩種儀器操作簡便、快速、檢測項目多,重復性好；對于尿液中紅細胞、白細胞檢測，尿液檢驗工作站做篩檢實驗須結(jié)合尿沉渣顯微鏡檢查結(jié)果進行綜合判斷。臨床應根據(jù)患者的病因和癥狀，采用多種方法有機結(jié)合進行診斷，以提高檢測的準確率，避免漏檢和貽誤，為臨床提供可靠的檢測結(jié)果。

尿液檢驗工作站；顯微鏡鏡檢；紅細胞；白細胞

尿液分析是為泌尿系統(tǒng)疾病及其它系統(tǒng)相關疾病提供重要診斷依據(jù)的常規(guī)檢測項目，目前最常用的方法是干化學法和人工光學顯微鏡檢查，本院在2012年新添置了由迪瑞H-800全自動尿液分析儀和迪瑞FUS-200全自動尿有形成分分析儀組成的尿液檢驗工作站。H-800全自動尿液分析儀是利用干化學法的原理來檢測尿液的，具有操作簡便、快速、但檢測結(jié)果受到諸多干擾因素的影響，易產(chǎn)生假陰性和假陽性結(jié)果，只能作為過篩實驗[1]。尿有形成分檢查方法中也存在某些難以避免的干擾因素。光學顯微鏡鏡檢雖操作復雜費時，但對于檢測尿液中的有形成分具有很大的臨床意義，可以作為尿液有形成分檢查的金標準[2]。本文用三種檢測方法同時檢測479例尿液中的紅細胞、白細胞，并對結(jié)果進行對比性分析，以了解單一分析儀及組合狀態(tài)下對尿中紅細胞、白細胞檢測性能，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源隨機選取的479例尿液標本均為安徽省濉溪縣醫(yī)院2013年7月至2013年12月住院的患者，其中男性202例，女性277例，患者年齡1～97歲，平均年齡55.1歲，尿液標本均是用潔凈一次性尿杯留取中段尿，1h內(nèi)完成檢測。

1.2 儀器與試劑長春迪瑞H-800全自動尿液分析儀及該機專用11項測試帶。按要求進行室內(nèi)質(zhì)控和加樣測試，操作步驟嚴格按照說明要求進行；(1)長春迪瑞FUS-200全自動尿有形成分分析儀及其配套試劑；(2)奧林巴斯CH30光學顯微鏡；玻片；所用的試劑條均為原裝配套產(chǎn)品。

1.3 檢測方法用一次性潔凈尿杯收集患者中段尿液10ml左右，用尿液檢驗工作站對尿液進行自動進樣分析，完成以后的尿液于離心管中1500r/ min離心5min，棄去上清液留取0.2ml左右沉渣，然后吸取一滴于玻片上做顯微鏡鏡檢，觀察10個高倍鏡視野，計算出鏡下細胞的平均數(shù)。所有的操作步驟都遵循《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第3版。

1.4 臨床評價標準和評價指標用奧林巴斯CH30光學顯微鏡檢測結(jié)果作為臨床評價標準，分別與尿液流水線的FUS-200和H-800兩種檢測方法進行比較，H-800全自動尿液分析儀結(jié)果參考值：隱血(BLD)陰性，白細胞(LEU)陰性；尿沉渣顯微鏡計數(shù)參考區(qū)間遵循《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第3版[3]，RBC：0～3/HP,WBC：0～5/HP；FUS-200全自動尿有形成分分析儀的參考區(qū)間遵循廠家規(guī)定：RBC：0～17/μl，WBC：0～28/μl，超出規(guī)定范圍則視為陽性。

1.5 統(tǒng)計學處理數(shù)據(jù)采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件做統(tǒng)計學分析，進行配對χ2檢驗，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義；運用Kappa檢驗判斷結(jié)果的符合率一致性分析。

2 結(jié)果

通過用H-800全自動尿液分析儀、FUS-200全自動尿有形成分分析儀以及顯微鏡檢查三種方法對479例尿液進行檢驗，本文以光學顯微鏡鏡檢法作為參考對照標準。

2.1 H-800全自動尿液分析儀與顯微鏡鏡檢對比見表1、表2。

表1 H-800全自動尿液分析儀與顯微鏡鏡檢RBC結(jié)果對比

表2 H-800全自動尿液分析儀與顯微鏡鏡檢WBC結(jié)果對比

2.2 用FUS-200全自動尿有形成分分析儀與顯微鏡鏡檢對比見表3、表4。

2.3 H-800全自動尿液分析儀與FUS-200全自動尿有形成分分析儀對RBC WBC結(jié)果對比分析見表5、表6。

3 討論

在本結(jié)果中發(fā)現(xiàn)，H-800全自動尿液分析儀檢測具有使用方便、所需尿量少、重復性好、準確性好、便于實現(xiàn)自動化測定等優(yōu)點，擴大了尿液檢查的內(nèi)涵，極大的提高了工作效率。但是由于該儀器采用干化學方法，尿液成分復雜，項目繁多，其檢測原理各不相同，所以影響因素很多，易出現(xiàn)假陰性和假陽性結(jié)果[4]；FUS-200全自動尿有形成分分析儀其主要特點是采用高速頻閃光源和高速顯微攝像技術的光學系統(tǒng)，每個檢測標本利用流式細胞儀技術在鞘流液的包裹下進入流動池內(nèi)，其厚度和位置正好符合顯微鏡的焦距范圍內(nèi)，標本以平坦對的層流形式流經(jīng)物鏡鏡頭前面，根據(jù)鞘流原理，任何粒子通過時都會以最大的面積直接對準鏡頭的觀測，每個顯微鏡視野被高速頻閃光源(40次/s)瞬間拍攝，由CCD相機拍攝820副含有有形成分的圖像，再由計算機進行圖像分析等技術，對尿中有形成分的大小、對比度、形狀、質(zhì)地特征進行提取，運用形態(tài)識別軟件進行有形成分的分類和定量報告。每種成分均可在顯示屏上顯示其形態(tài)，并可任意選取可疑的成分進行人工智能識別技術復核，是一種全新的分析技術。FUS-200全自動尿有形成分分析儀檢測時尿液無需離心，可以實現(xiàn)尿液分析的全自動化和標準化，具有高效、簡便快速、無攜帶污染和結(jié)果較為準確的性能。對陰性樣本過篩結(jié)果可靠，但是在陽性樣本有形成分識別上有一定的差異。當尿液樣本中含有真菌、結(jié)晶時，F(xiàn)US-200全自動尿有形成分分析儀有可能誤判為紅細胞，而有些脫落的上皮細胞誤判為白細胞等都會使結(jié)果出現(xiàn)假陽性的結(jié)果。而H-800全自動尿液分析儀檢測結(jié)果均為陰性，此時就需要經(jīng)過光學顯微鏡鏡檢復查，得出準確結(jié)果。

表3 用FUS-200全自動尿有形成分分析儀與顯微鏡鏡檢RBC結(jié)果對比

表4 用FUS-200全自動尿有形成分分析儀與顯微鏡鏡檢WBC結(jié)果對比

表5 H-800全自動尿液分析儀與FUS-200全自動尿有形成分分析儀檢測RBC

表6 H-800全自動尿液分析儀與FUS-200全自動尿有形成分分析儀檢測WBC

合理建立尿有形成分顯微鏡復檢的規(guī)則，規(guī)范化與標準化尿液檢查工作[5]。(1)H-800與FUS-200的檢測結(jié)果有較高的符合一致性(RBC:93.7%; WBC:96.7%)。如果均為陰性時不需要復檢；如果均為陽性并且陽性量級相當時，不需要復檢[6]。(2) FUS-200檢查RBC陽性而H-800檢查為陰性時，大多數(shù)情況是尿液中存在不同數(shù)量體積較小的結(jié)晶、真菌、細菌所致，對結(jié)果產(chǎn)生干擾[7]。(3)H-800檢查RBC為不同程度的陽性而FUS-200檢查為陰性的，原因：①可能尿液中存在類過氧化酶的物質(zhì)，其具有與血紅蛋白相同的氧化色原的作用，而造成潛血實驗假陽性，②也可能有技術操作人員能力有限，誤判所致；③進行FUS-200檢測時，由于留取尿液樣本量過少的，為了滿足儀器的需要，就需要對樣本進行生理鹽水稀釋，從而導致尿有形成分分析時單位體積內(nèi)RBC數(shù)量較少，結(jié)果出現(xiàn)假陰性，樣本需要復檢鑒別。

尿液紅細胞檢查結(jié)果中，479例樣本5例樣本H-800陰性而鏡檢陽性可能由于尿中含有過氧化物酶樣的物質(zhì)，從而產(chǎn)生假陰性。有報道指出尿液中若存在高濃度的維生素C、青霉素、亞硝酸鹽或其他還原物質(zhì)也可導致干化學法檢測紅細胞結(jié)果呈現(xiàn)假陰性[8]。H-800全自動尿液分析儀(干化學試法)的原理，其檢測隱血的原理是根據(jù)血紅蛋白的亞鐵血紅素具有過氧化物酶樣活性，可催化分解氧化物，釋放新生態(tài)氧，使鄰聯(lián)甲苯胺氧化呈色，其色澤的深淺與尿液中血紅蛋白或紅細胞量呈正比。在FUS-200的RBC檢測中，479例樣本中18例與顯微鏡鏡檢不符，不符合率3.8%。由于顯微鏡鏡檢只能檢測出完整紅細胞，離心對尿液有形成分的影響很大，讓紅細胞的數(shù)量減少，從而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。而FUS-200檢測不需要離心可直接檢測樣本，這就可能是其紅細胞檢出率接近于甚至好于顯微鏡鏡檢的原因。在本文中三種方法對RBC檢測結(jié)果同時是陽性和陰性的為92.3%(442/ 479)，符合一致性較高。

對于白細胞檢測而言，H-800全自動尿液分析儀(干化學法)的原理是基于中性粒細胞胞質(zhì)內(nèi)含有的酯酶作用于帶膜塊中的吲哚酚酯，使吲哚酚酯釋放吲哚酚，后者與重氮鹽反應產(chǎn)生紫色，以其顏色深淺換算成白細胞數(shù)。本本文中H-800檢測WBC的假陰性率22.5%，其主要原因可能與干化學法測定白細胞原理有關。此外，尿中H-800陽性而顯微鏡鏡檢陰性，可能是由于尿液滲透壓、酸堿度、藥物(頭孢拉定和慶大霉素)及離心等因素所導致。H-800檢測WBC假陰性率為0.7%，可能是尿液在膀胱中貯存時間過長或者離心過快等原因?qū)е掳准毎茐模ッ羔尫湃肽蛑兴?。FUS-200檢測WBC陽性，而H-800檢測陰性時，大部分是由于尿液中WBC是以單核細胞和淋巴細胞為主，而干化學是針對中性粒細胞的酯酶反應，從而呈現(xiàn)假陰性結(jié)果[9]。H-800檢測WBC為不同程度陽性，F(xiàn)US-200檢測為陰性的例數(shù)，可能是WBC破碎所致，需要復檢鑒別。另外，F(xiàn)US-200全自動尿有形成分分析儀檢出的4例假陽性標本經(jīng)人工審核及鏡檢發(fā)現(xiàn)，小圓上皮細胞和移行上皮細胞體積膨大變性在光學顯微鏡下WBC的形態(tài)特點非常相近且容易誤判，特別是女性患者白帶增多，冬季鹽類結(jié)晶析出等原因使結(jié)果呈現(xiàn)出假陽性[10]。本研究中三種方法對WBC檢測結(jié)果同時是陽性和陰性的為96.5%(462/479)，符合一致性較高。

綜上所述，尿液分析對于泌尿系統(tǒng)疾病的診斷、鑒別、治療和預后有重要的臨床意義和參考價值。H-800尿干化學分析儀、FUS-200全自動尿有形成分分析儀、以及顯微鏡鏡檢檢測RBC和WBC受到諸多干擾因素的影響使結(jié)果呈現(xiàn)假陽性或假陰性結(jié)果。通過本結(jié)果分析證實，三種檢測方法有各自的優(yōu)缺點，H-800操作簡便、快速、但檢測結(jié)果受到諸多干擾因素的影響，易產(chǎn)生假陰性和假陽性結(jié)果，只能作為過篩實驗。FUS-200全自動尿有形成分分析儀具有檢測速度快，操作簡單，批量進樣以及圖像傳出真實等優(yōu)點，與光學顯微鏡鏡檢結(jié)果具有很高的符合率和良好的一致性，對尿液中的紅細胞和白細胞識別具有高特異性和高靈敏度，報告結(jié)果規(guī)范，有很大的臨床實用價值。光學顯微鏡鏡檢時需要尿液少，是一種操作簡單、檢出率和精確度高的方法，但是顯微鏡法在用于大群疾病篩查時操作比較復雜，工作效率低，需要投入大量的人力，并且離心尿液對尿有形成分產(chǎn)生影響，檢測結(jié)果也受技術人員主觀因素和技術水平影響較大。因此，要加強尿液分析檢測的規(guī)范化和標準化，必須把H-800尿干化學分析儀、FUS-200全自動尿有形成分分析儀以及顯微鏡鏡檢三者結(jié)合起來，相互補充，只有這樣才能提高尿液檢測的準確性和可靠性，為臨床提供準確的參考、診斷和治療依據(jù)。

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R446.12+1

A

1674-1129(2014)05-0552-004

10.3969/j.issn.1674-1129.2014.05.023

2014-03-07；

2014-07-14)