核基質(zhì)蛋白22定量分析及尿液細(xì)胞學(xué)檢查評(píng)估膀胱癌復(fù)發(fā)的價(jià)值研究

彭曉暉，梁培育，歐善際，祖雄兵

膀胱癌是目前泌尿生殖系統(tǒng)最常見(jiàn)的腫瘤之一，發(fā)病率較高。流行病學(xué)調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)，膀胱癌的發(fā)病率占整個(gè)泌尿系統(tǒng)腫瘤的48.3%[1]。淺表性膀胱癌是來(lái)自泌尿系統(tǒng)上皮的惡性腫瘤，能達(dá)到70%的發(fā)病率，且淺表性膀胱癌復(fù)發(fā)的幾率較高。有研究證實(shí)，淺表性膀胱癌的復(fù)發(fā)率可達(dá)到60%～85%[2-3]。臨床建議對(duì)腫瘤患者進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間的隨訪以監(jiān)測(cè)腫瘤的復(fù)發(fā)及病情的進(jìn)展，因此膀胱癌患者通常在手術(shù)后前2年，每3個(gè)月或4個(gè)月行膀胱鏡檢查以及尿液細(xì)胞學(xué)檢查，其中膀胱鏡檢查被認(rèn)為是診斷的金標(biāo)準(zhǔn)。在后期也建議對(duì)患者進(jìn)行定期隨訪以監(jiān)測(cè)腫瘤的復(fù)發(fā)情況[4-6]。但由于膀胱鏡在檢查中易對(duì)人體造成侵襲性損傷，且檢查費(fèi)用相對(duì)較高，因此臨床中出現(xiàn)了很多新技術(shù)用于對(duì)膀胱癌的復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)，包括：流式細(xì)胞術(shù)、定量熒光圖像分析,核基質(zhì)蛋白22(NMP22)定量分析法等，目前針對(duì)這些方法在膀胱癌復(fù)發(fā)檢測(cè)中的準(zhǔn)確性研究現(xiàn)已廣泛開(kāi)展[7-11]。NMP22試驗(yàn)可以定量分析核基質(zhì)蛋白的含量，NMP22即為核有絲分裂器蛋白，其中核有絲分裂器由泌尿上皮細(xì)胞凋亡后產(chǎn)生[12-14]。NMP22主要存在于尿液中，膀胱癌患者尿液中的NMP22水平顯著增高。有研究表明，膀胱癌患者尿液中NMP22的水平可達(dá)到正常人群的20～80倍[13]。NMP22在膀胱癌診斷中的靈敏度可以達(dá)到尿液細(xì)胞學(xué)檢查的靈敏度[15]。鑒于此，本研究通過(guò)對(duì)膀胱移行細(xì)胞癌復(fù)發(fā)的不同階段和時(shí)期進(jìn)行尿液NMP22定量分析以及尿液細(xì)胞學(xué)檢查，以比較兩種方法評(píng)估膀胱癌復(fù)發(fā)的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2008—2012年在海南醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院住院的淺表性膀胱癌患者144例，其中男125例，女19例；年齡26～86歲，平均61.8歲。淺表性膀胱癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)[16]為：非肌層浸潤(rùn)性膀胱癌或淺表性膀胱癌占初發(fā)膀胱癌的70%，其中Ta期占70%、T1期占20%、Tis期占10%。排除合并尿路感染、泌尿系結(jié)石及其他惡性腫瘤的患者。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，且患者均簽署書(shū)面知情同意書(shū)。

1.2 試驗(yàn)方法 患者均在3 d內(nèi)連續(xù)每天提供3份用于尿液細(xì)胞學(xué)檢查的尿液樣本以及1份用于NMP22定量分析的尿液樣本。

1.2.1 尿液細(xì)胞學(xué)檢查 將患者尿液離心取沉淀物制片，干燥后行蘇木精-伊紅染色(HE染色)，普通光鏡觀察并進(jìn)行細(xì)胞學(xué)診斷，發(fā)現(xiàn)膀胱腫瘤細(xì)胞(腫瘤細(xì)胞具有核大、畸形、深染等特點(diǎn))，為尿液細(xì)胞學(xué)檢查陽(yáng)性。

1.2.2 NMP22定量分析 本研究使用Matritech公司的NMP22試劑盒(Matritech Inc,330 Nevada St,Newton,MA)進(jìn)行檢測(cè)，NMP22定量分析按Matritech公司的試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。于膀胱鏡檢查前收集患者單次新鮮自排尿50～100 ml，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法(美國(guó)Matritech公司生產(chǎn))，按照說(shuō)明書(shū)操作，經(jīng)全自動(dòng)酶標(biāo)儀在490 nm處比色，數(shù)據(jù)經(jīng)儀器所配置計(jì)算機(jī)處理系統(tǒng)處理，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，計(jì)算樣本NMP22水平。NMP22試劑盒將膀胱癌定性的截點(diǎn)設(shè)定為10 U /ml,測(cè)試結(jié)果> 10 U /ml作為陽(yáng)性結(jié)果。

1.2.3 膀胱鏡檢查 患者均經(jīng)膀胱鏡檢查常規(guī)觀察腫瘤部位、形態(tài)，并做腫瘤活檢，其病理結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)。膀胱鏡檢查過(guò)程中，任何可疑的腫塊以及病灶均取病理活檢，檢查結(jié)果按照TNM系統(tǒng)[17]進(jìn)行分期〔原位癌(CIS)、Ta期(非浸潤(rùn)性乳頭狀癌)、T1期(腫瘤侵及上皮下結(jié)締組織)、T2期(腫瘤侵犯肌層)〕以及WHO系統(tǒng)[18]進(jìn)行分級(jí)〔Ⅰ級(jí)(尿路上皮癌，分化良好)、Ⅱ級(jí)(尿路上皮癌，中度分化)、Ⅲ級(jí)(尿路上皮癌，分化不良)〕。在膀胱鏡檢查中視野內(nèi)為正常組織或者組織病理學(xué)檢查結(jié)果為非惡性組織的定義為陰性；對(duì)于膀胱鏡檢查未發(fā)現(xiàn)腫塊，但患者尿液細(xì)胞學(xué)檢查以及NMP22定量分析有陽(yáng)性發(fā)現(xiàn)的患者需要進(jìn)一步行膀胱內(nèi)隨機(jī)組織病理學(xué)活檢[19]以排除泌尿系腫瘤的可能。根據(jù)膀胱癌復(fù)發(fā)進(jìn)展等方面的風(fēng)險(xiǎn)因素，將所有患者病理學(xué)結(jié)果劃分為3個(gè)風(fēng)險(xiǎn)層次：低度風(fēng)險(xiǎn)(單個(gè)病灶為T(mén)aG1期，且病灶直徑<3 cm)，中度風(fēng)險(xiǎn)〔排除低度及高度風(fēng)險(xiǎn)的患者,包括腫瘤多發(fā)、Ta～T1期、G1～G2期(低級(jí)別尿路上皮癌)、病灶直徑>3 cm〕，高度風(fēng)險(xiǎn)〔多個(gè)病灶T1G2期,Tis期(CIS),T1G3期,TaG3期〕對(duì)于高度風(fēng)險(xiǎn)的患者應(yīng)每4周復(fù)查1次，直至治療后9個(gè)月。明確具有上尿路病灶以及膀胱病灶的患者定義為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS 13.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 腫瘤特征 144例患者中,52例(36.1%)診斷為復(fù)發(fā)性膀胱移行細(xì)胞癌，其中48例通過(guò)首次膀胱鏡檢查直接診斷，4例在隨訪期間膀胱鏡檢查診斷。隨訪期間診斷的4例患者中1例為CIS伴尿液細(xì)胞學(xué)檢查為陽(yáng)性，其余3例腫瘤較小且伴NMP22定量分析陽(yáng)性(其中2例患者為T(mén)1G2期，1例為T(mén)1G3期)。52例膀胱癌復(fù)發(fā)患者中，Ⅰ級(jí)16例，Ⅱ級(jí)20例，Ⅲ級(jí)16例； Ta期18例，T1期22例，CIS 3例，T2期9例；風(fēng)險(xiǎn)分層：低度風(fēng)險(xiǎn)25例，中度風(fēng)險(xiǎn)19例，高度風(fēng)險(xiǎn)8例。

2.2 NMP22定量分析及尿液細(xì)胞學(xué)檢查對(duì)膀胱癌復(fù)發(fā)的診斷價(jià)值 52例膀胱癌復(fù)發(fā)患者中，41例NMP22定量分析結(jié)果為陽(yáng)性，23例尿液細(xì)胞學(xué)檢查為陽(yáng)性。NMP22定量分析診斷膀胱癌復(fù)發(fā)的靈敏度為78.8%(41/52)，特異度為69.6%(64/92)，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為59.4%(41/69)，陰性預(yù)測(cè)值為85.3%(64/75)；尿液細(xì)胞學(xué)檢查診斷膀胱癌復(fù)發(fā)的靈敏度為44.2%(23/52)，特異度為83.7%(77/92)，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為60.5%(23/38)，陰性預(yù)測(cè)值為72.6%(77/106，見(jiàn)表1)。兩種方法診斷膀胱癌復(fù)發(fā)的靈敏度和特異度比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.58、5.40，P=0.01、0.02)；而兩種方法診斷膀胱癌復(fù)發(fā)的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.13、0.50，P=0.08、0.48)。

2.3 兩種方法對(duì)腫瘤分期及分級(jí)的靈敏度分析 52例膀胱癌患者中按不同分期，NMP22定量分析CIS 2例，Ta期11例，T1期21例，T2期7例；尿液細(xì)胞學(xué)檢查CIS 3例，Ta期2例，T1期10例，T2期8例。按不同分級(jí)，NMP22定量分析I級(jí)11例，Ⅱ級(jí)17例，Ⅲ級(jí)13例；尿液細(xì)胞學(xué)檢查I級(jí)0例，Ⅱ級(jí)8例，Ⅲ級(jí)15例。按風(fēng)險(xiǎn)分層，NMP22定量分析低度風(fēng)險(xiǎn)17例、中度風(fēng)險(xiǎn)17例、高度風(fēng)險(xiǎn)7例；尿液細(xì)胞學(xué)檢查低度風(fēng)險(xiǎn)4例、中度風(fēng)險(xiǎn)10例、高度風(fēng)險(xiǎn)9例。NMP22定量分析與尿液細(xì)胞學(xué)檢查在不同分期、分級(jí)、風(fēng)險(xiǎn)分層中的靈敏度比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見(jiàn)表2)。

表1 NMP22定量分析及尿液細(xì)胞學(xué)檢查對(duì)膀胱癌復(fù)發(fā)的診斷價(jià)值

Table1 Value of voided urine cytology and NMP22 quantitative analysis in the diagnosis of recurrent bladder TCC

金標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性 陰性合計(jì)NMP22定性分析陽(yáng)性412869陰性116475合計(jì)5292144尿液細(xì)胞學(xué)檢查陽(yáng)性231538陰性2977106合計(jì)5292144

2.4 聯(lián)合兩種檢測(cè)方法對(duì)膀胱癌復(fù)發(fā)的診斷價(jià)值 NMP22定量分析聯(lián)合尿液細(xì)胞學(xué)檢查、NMP22定量分析聯(lián)合膀胱鏡檢查、尿液細(xì)胞學(xué)檢查聯(lián)合膀胱鏡檢查診斷膀胱癌復(fù)發(fā)的靈敏度分別為88.5%(46/52)、98.1%(51/52)及94.2%(49/52)。

3 討論

膀胱鏡檢查目前被認(rèn)為是膀胱癌診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，但其也存在侵襲性損傷以及相對(duì)昂貴的檢查費(fèi)用等不足[20-21]。尿液細(xì)胞學(xué)檢查是針對(duì)尿液中尿路脫落上皮細(xì)胞的細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查，但對(duì)于體積較小的腫瘤以及組織分化較好的患者，因自然脫落的細(xì)胞較少，因而診斷具有一定難度。正因?yàn)槿绱?，尿液?xì)胞學(xué)檢查在低度風(fēng)險(xiǎn)組的腫瘤患者中靈敏度較低，僅為15%～30%[14]。目前在臨床膀胱癌檢測(cè)中也出現(xiàn)了很多基于尿液標(biāo)記物的新檢測(cè)手段以替代尿液細(xì)胞學(xué)檢查，其中包括：BTA stat,BTA trak，NMP22，UroVysion等檢測(cè)[22-23]。NMP首先于1974年被發(fā)現(xiàn),是一種非染色質(zhì)結(jié)構(gòu),作為細(xì)胞核形態(tài)支撐組織構(gòu)建DNA,同時(shí)NMP還參與DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄,以及RNA加工過(guò)程。NMP22是核蛋白質(zhì)，其在染色體的調(diào)控、復(fù)制過(guò)程中以及細(xì)胞分離中意義重大。

目前大量研究和報(bào)道已證明NMP22檢測(cè)比尿液細(xì)胞學(xué)檢測(cè)具有更好的應(yīng)用前景[24-25]。有研究認(rèn)為，NMP22檢測(cè)在膀胱癌檢測(cè)中的靈敏度為70%～80%，而尿液細(xì)胞學(xué)檢查的靈敏度僅為10%～40%[9,26-28]，NMP22的敏感度為后者的2倍以上。本研究發(fā)現(xiàn)，NMP22定量分析診斷膀胱癌復(fù)發(fā)的靈敏度為78.8%，特異度為69.6%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為59.4%，陰性預(yù)測(cè)值為85.3%；尿液細(xì)胞學(xué)檢查診斷膀胱癌復(fù)發(fā)的靈敏度為44.2%，特異度為83.7%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為60.5%，陰性預(yù)測(cè)值為72.6%；兩種方法診斷膀胱癌復(fù)發(fā)的靈敏度和特異度有明顯差異。提示NMP22的定量分析診斷膀胱癌復(fù)發(fā)的靈敏度較高，但其特異度較尿液細(xì)胞學(xué)檢查低。本研究中尿液細(xì)胞學(xué)檢查的靈敏度較目前其他研究者報(bào)道的靈敏度較高，這可能與本研究在行尿液細(xì)胞學(xué)檢測(cè)時(shí)，使用3個(gè)血樣本進(jìn)行反復(fù)檢測(cè)，從而提高了尿液細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的靈敏度有關(guān)。

NMP22檢測(cè)方法也存在一定缺陷，如缺乏確切的定量分界點(diǎn)等[29-31]。Jamshidian等[24]研究建議將NMP22水平為10.1 U/ml作為患者的膀胱癌檢測(cè)分界點(diǎn)。本研究使用Matritech公司的NMP22試劑盒(Matritech Inc,330 Nevada St,Newton,MA)進(jìn)行檢測(cè)，并將膀胱癌定性的截?cái)嘀翟O(shè)定為10 U /ml,測(cè)試結(jié)果>10 U /ml作為陽(yáng)性結(jié)果。本研究表明,在不同分期和分級(jí)的淺表性膀胱癌復(fù)發(fā)患者中，NMP22定量分析在Ta期、T1期、I級(jí)、Ⅱ級(jí)診斷膀胱癌復(fù)發(fā)的靈敏度高于尿液細(xì)胞學(xué)檢查，但在Ⅲ級(jí)以及高度風(fēng)險(xiǎn)的患者中，兩種方法之間無(wú)明顯差異。Kumar等[25]研究發(fā)現(xiàn)NMP22在低度風(fēng)險(xiǎn)膀胱癌患者中的靈敏度能到達(dá)尿液細(xì)胞學(xué)檢查的8倍，但在中度風(fēng)險(xiǎn)以及高度風(fēng)險(xiǎn)患者中無(wú)此差異。提示檢測(cè)尿中NMP22可能對(duì)膀胱癌的早期診斷有一定價(jià)值。本研究還發(fā)現(xiàn)，NMP22定量分析聯(lián)合尿液細(xì)胞學(xué)檢查、NMP22定量分析聯(lián)合膀胱鏡檢查、尿液細(xì)胞學(xué)檢查聯(lián)合膀胱鏡檢查診斷膀胱癌復(fù)發(fā)的靈敏度分別為88.5% (46/52)、 98.1% (51/52)及94.2% (49/52)，優(yōu)于單獨(dú)使用NMP22定量分析或者尿液細(xì)胞學(xué)檢查對(duì)膀胱癌復(fù)發(fā)的診斷價(jià)值，為今后進(jìn)一步研究提供了參考依據(jù)。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)將NMP22定量分析作為一種監(jiān)測(cè)標(biāo)志物,可以早期、敏感地發(fā)現(xiàn)腫瘤的復(fù)發(fā)與進(jìn)展，且無(wú)創(chuàng)傷，不僅可以有效減少有創(chuàng)的膀胱鏡檢查次數(shù)，減少患者的痛苦，還有利于患者進(jìn)行早期治療與干預(yù)，值得臨床推廣應(yīng)用。由于本次研究的陽(yáng)性樣本數(shù)較少，以及研究手段的局限，可能會(huì)對(duì)研究結(jié)果造成一定的影響，提示今后還可增大樣本量，或者采用分子生物學(xué)研究方法對(duì)本次研究進(jìn)行驗(yàn)證。

表2 NMP22定量分析及尿液細(xì)胞學(xué)檢查在不同分期及分級(jí)膀胱癌復(fù)發(fā)中的靈敏度分析(%)

注：與NMP22定量分析比較，*P<0.05

1 Akbari ME,Hosseini SJ,Rezaee A,et al.Incidence of genitourinary cancers in the Islamic Republic of Iran:a survey in 2005[J].Asian Pac J Cancer Prev,2008,9(4):549-552.

2 Babjuk M,Oosterlinck W,Sylvester R,et al.EAU guidelines on non-muscle-invasive urothelial carcinoma of the bladder[J].European Urology,2008,54(2):303-314.

3 Jones JS,Campbell SC.Non-muscle-invasive bladder cancer(Ta,T1,and CIS)[J].Campbell-Walsh Urology,2007,9:2447-2467.

4 Mufti GR,Singh M.Value of random mucosal biopsies in the management of superficial bladder cancer[J].Eur Urol,1992,22(4):288-293.

5 Kriegmair M,Baumgartner R,Knüchel R,et al.Detection of early bladder cancer by 5-aminolevulinic acid induced porphyrin fluorescence[J].J Urol,1996,155(1):109-110.

6 徐曉亮,劉振湘,黃義,等.膀胱癌肉瘤的臨床特征[J].海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2010，16(1)：73-75.

7 Berezney R,Coffey DS.Identification of a nuclear protein matrix[J].Biochemical and Biophysical Research Communications,1974,60(4):1410-1417.

8 Cordon-Cardo C,Wartinger DD,Melamed MR,et al.Immunopathologic analysis of human urinary bladder cancer.Characterization of two new antigens associated with low-grade superficial bladder tumors[J].Am J Pathol,1992,140(2):375-385.

9 Soloway MS,Briggman V,Carpinito GA,et al.Use of a new tumor marker,urinary NMP22,in the detection of occult or rapidly recurring transitional cell carcinoma of the urinary tract following surgical treatment[J].J Urol,1996,156 (2 Pt 1):363-367.

10 Sarosdy MF,deVere White RW,Soloway MS,et al.Results of a multicenter trial using the BTA test to monitor for and diagnose recurrent bladder cancer[J].J Urol,1995,154 (2 Pt 1):383-384.

11 Parry WL,Hemstreet GP 3rd.Cancer detection by quantitative fluorescence image analysis[J].J Urol,1988,139(2):270-274.

12 Yang CH,Snyder M.The nuclear-mitotic apparatus protein is important in the establishment and maintenance of the bipolar mitotic spindle apparatus[J].Mol Biol Cell,1992,3(11):1259-1267.

13 Keesee SK,Briggman JV,Thill G,et al.Utilization of nuclear matrix proteins for cancer diagnosis[J].Crit Rev Eukaryot Gene Expr,1996,6:189-214.

14 Talwar R,Sinha T,Karan SC,et al.Voided urinary cytology in bladder cancer:is it time to review the indications?[J].Urology,2007,70(2):267-271.

15 Hosseini J,Golshan AR,Mazloomfard MM,et al.Detection of recurrent bladder cancer:NMP22 test or urine cytology?[J].Urology Journal,2012,9(1)：367-372.

16 史時(shí)芳.淺表性膀胱癌的現(xiàn)代診斷[J].中國(guó)醫(yī)師進(jìn)修雜志,2006,29(23):1-3.

17 Henson J S,Hutter D E,O′Sullivan,et al.AJCC cancer staging manual[M].5 ed.Philadelphia:Lippincott-Raven,1997:241-243.

18 Mostofi FK,Davis CJ,Sesterhenn IA.Pathology of tumors of the urinary tract[M]//Skinner DG,Lieskovsky G.Diagnosis and management of genitourinary cancer.Philadelphia:WB Saunders,1988:83-117.

19 Solsona E,Iborra I,Ricos JV,et al.Clinical panurothelial disease in patients with superficial bladder tumors:therapeutic implications[J].J Urol,2002,167(5):2007-2011.

20 Lotan Y,Roehrborn CG.Cost-effectiveness of a modified care protocol substituting bladder tumor markers for cystoscopy for the followup of patients with transitional cell carcinoma of the bladder:a decision analytical approach[J].J Urol,2002,167(1):75-79.

21 王聲興， 張陽(yáng)德， 梁培育,等.膀胱正常組織和癌組織的顯微自體熒光差異研究[J].海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，17(2)：267-269.

22 van Rhijn BW,van der Poel HG,van der Kwast TH.Urine markers for bladder cancer surveillance:a systematic review[J].Eur Urol,2005,47(6):736-748.

23 陳智，梁培育，徐海波，等.NMP22、BTAstat和B超聯(lián)合運(yùn)用診斷膀胱腫瘤[J].海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2009，15(5)：413-416.

24 Jamshidian H,Kor K,Djalali M.Urine concentration of nuclear matrix protein 22 for diagnosis of transitional cell carcinoma of bladder[J].Urol J,2008,5(4):243-247.

25 Kumar A,Kumar R,Gupta NP.Comparison of NMP22 BladderChek test and urine cytology for the detection of recurrent bladder cancer[J].Jpn J Clin Oncol,2006,36(3):172-175.

26 Stampfer DS,Carpinito GA,Rodriquez-Villanueva J,et al.Evaluation of NMP22 in the detection of transitional cell carcinoma of the bladder[J].The Journal of Urology,1998,159(2):394-398.

27 Miyanaga N,Akaza H,Ishikawa S,et al.Clinical evaluation of nuclear matrix protein 22 (NMP22) in urine as a novel marker for urothelial cancer[J].Eur Urol,1997,31(2):163-168.

28 Landman J,Chang Y,Kavaler E,et al.Sensitivity and specificity of NMP-22,telomerase,and BTA in the detection of human bladder cancer[J].Urology,1998,52(3):398-402.

29 Grossman HB,Soloway M,Messing E,et al.Surveillance for recurrent bladder cancer using a point-of-care proteomic assay[J].JAMA,2006,295:299-305.

30 Badalament RA,Hermansen DK,Kimmel M,et al.The sensitivity of bladder wash flow cytometry,bladder wash cytology,and voided cytology in the detection of bladder carcinoma[J].Cancer,1987,60(7):1423-1427.

31 Shariat SF,Zippe C,Lüdecke G,et al.Nomograms including nuclear matrix protein 22 for prediction of disease recurrence and progression in patients with Ta,T1 or CIS transitional cell carcinoma of the bladder[J].J Urol,2005,173(5):1518-1525.