用HPLC法對(duì)一清顆粒中大黃的定量測(cè)定

孫 雪

用HPLC法對(duì)一清顆粒中大黃的定量測(cè)定

孫 雪

（河北省衡水市食品藥品檢驗(yàn)所，衡水053000）

目的建立對(duì)一清顆粒中大黃的定量分析。方法用HPLC法測(cè)定一清顆粒中大黃中大黃素和大黃酚的含量。結(jié)果線性范圍分別是大黃素0.016～0.164μg（r=0.9996，n=5）；大黃酚0.032～0.328μg（r=0.9995，n=5）。平均回收率：大黃素97.1%，RSD為1.29%；大黃酚97.4%，RSD為1.37%。結(jié)論該方法準(zhǔn)確可靠，可用于一清顆粒的質(zhì)量控制。

一清顆粒；大黃素；大黃酚；中藥定量分析

一清顆粒由黃連、大黃、黃芩三味中藥制成，該藥具清熱瀉火解毒，化瘀涼血止血功效，火毒血熱所致的身熱煩燥、目赤口瘡、咽喉牙齦腫痛的治療，該藥使用廣泛、療效確切，但是該藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)［1］沒(méi)有對(duì)主要大黃進(jìn)行定量的分析，為了更好地控制產(chǎn)品的內(nèi)在質(zhì)量，使臨床治療安全有效，本實(shí)驗(yàn)采用HPLC（高效液相色譜）法對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。

1 儀器與試藥

儀器：Waters e2695高效液相色譜儀；BP110S電子分析天平；WFH-203三用紫外分析儀。

試藥：乙腈和甲醇為色譜純，水為純化水，其它試劑為分析純；大黃素（批號(hào)：110756-201211）、大黃酚（批號(hào)：110796-201210）均由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供。一清顆粒由衡水市哈勵(lì)遜國(guó)際和平醫(yī)院提供，廠家：江西紅星藥業(yè)有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字Z20064055規(guī)格：每袋裝7.5g。

2 含量測(cè)定

2.1色譜條件［2］色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱150mm×4.6μm；流動(dòng)相：乙腈-水-0.1%磷酸（60：40：1）；流速：1.0m1／min；柱溫：35℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm。

2.2對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取大黃素、大黃酚對(duì)照品各10mg，分別置100m1量瓶中，用甲醇稀釋至刻度。分別精密量取大黃素溶液2m1、大黃酚溶液4m1，置50m1量瓶中，加甲醇（稀釋成含大黃素4.224μg／ml、大黃酚8.398μg／ml的混合溶液。

2.3供試品溶液的制備取裝量差異項(xiàng)下的本品內(nèi)容物，研細(xì)，取約15g，置錐形瓶中，加甲醇100ml，稱(chēng)重，超聲30min，置水浴中加熱回流1小時(shí)，立即冷卻，用甲醇補(bǔ)足失去重量，用三氯甲烷強(qiáng)力振搖提取4次，每次15ml，合并三氯甲烷液，置水浴上蒸干，殘?jiān)眉状既芤喝芙?，?5ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.4陰性對(duì)照品溶液的制備取缺少大黃的樣品，按供試液制備方法制成陰性對(duì)照品溶液。見(jiàn)圖1。

圖1 高效液相色譜圖

2.5線性范圍試驗(yàn)精密吸取對(duì)照品溶液（大黃素4.224μg／ml、大黃酚8.398μg／ml）1、2、5、10、15μl按上述色譜條件測(cè)定。求得回歸方程分別為大黃素Y=7.81× 102X+1.018r=0.9996，大黃酚Y=1.483×103X+3.382 r=0.9995。結(jié)果表明：大黃素、大黃酚分別在0.016-0.164μg，0.032～0.328μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.6重復(fù)性試驗(yàn)取同一批號(hào)樣品照上述供試品溶液制備方法配制5份供試液，分別取10μl進(jìn)樣，結(jié)果大黃素RSD為1.07%，大黃酚RSD為1.43%。

2.7精密度試驗(yàn)取對(duì)照溶液各10μl，分別連續(xù)進(jìn)樣5次，記錄各自的峰面積，大黃素RSD為0.47%，大黃酚RSD為0.52%。

2.8穩(wěn)定性試驗(yàn)精密吸取同一批供試品溶液各10μl，分別在0、2、4、6、8h、12h測(cè)定峰面積，結(jié)果表明大黃素RSD為1.05%，大黃酚RSD為RSD為1.13%。

2.9加樣回收率試驗(yàn)精密量取已知含量的一清顆粒6份每份7.5g，分別精密加入對(duì)照品大黃素（1μg／ml） 1.0ml和大黃酚（2μg／ml）1.0ml，照3.3制備待測(cè)溶液，按3.1測(cè)定，結(jié)果平均回收率及RSD分別為98.4%、1.98%和97.7%、1.33%。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果

3 討論

3.1大黃在處方中為主藥所以本文以大黃素、大黃酚為指標(biāo)，進(jìn)行含量測(cè)定方法的研究，采用HPLC法對(duì)大黃素、大黃酚的含量進(jìn)行測(cè)定，將測(cè)定波長(zhǎng)選定在254nm波長(zhǎng)處，此波長(zhǎng)對(duì)紫外吸收靈敏。

3.2選了四組流動(dòng)相分別為甲醇-0.1%磷酸（85∶15），甲醇-0.1%磷酸（80：20），甲醇-0.1%磷酸-乙腈（85∶13∶2），乙腈-水-0.1%磷酸（60∶40∶1），結(jié)果表明乙腈-水-0.1%磷酸（60：40：1）為流動(dòng)相，分離度好，峰型好。

［1］中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（一部）［M］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005.

［2］巫濤，顧明君.HPLC測(cè)定黃連上清膠囊中大黃素、大黃酚含量［J］.中成藥，2005，27（4）：472-473.

不能空腹吃柿子

柿子是人們喜食的水果之一，不僅富含維生素C，而且所含糖分也很高。因其甜美可口，并有潤(rùn)肺、清腸、止咳等作用，所以深受群眾喜愛(ài)?？擅糠晔磷由鲜袝r(shí)，總有人因一次過(guò)量食入，在胃中聚合成團(tuán)塊，大者如拳，疼痛劇烈，嚴(yán)重者不得不進(jìn)行手術(shù)將腫物取出，這就是醫(yī)生們說(shuō)的胃柿石癥。

“胃柿石”的形成原因是多方面的。柿子中含有柿膠酚，遇到胃內(nèi)的酸液后，可產(chǎn)生凝固而沉淀；柿子中還含有一種可溶性收斂劑紅鞣質(zhì)（未成熟的柿子中含量高），紅鞣質(zhì)在胃酸作用下與蛋白質(zhì)結(jié)合，會(huì)凝成一種不溶于水的鞣酸蛋白而沉淀在胃內(nèi)，并逐漸凝聚成大塊；再加上柿子本身所含的樹(shù)膠和果膠，遇酸凝集，沉淀黏合，并與食物殘?jiān)鄯e，愈積愈大，便成了巨大團(tuán)塊——胃柿石。

——中國(guó)中醫(yī)藥報(bào)

The Determination of Rhubarb in Yiqing Particles by HPLC Method

Sun Xue
（Hengshui city food and drug inspection，Hebei provice，053000，China）

ObjectiveTo establish the quantitative analysis of rhubarb in Yiqing Particles.Methodsusing HPLC to determination the content of emodin and rhubarb phenol in the Yiqing Particles.Resultsemodin linear range were0.016～0.164 mu of g（r=0.9996，n=5）.Rhubarb phenol 0.032～0.328 mu g（r=0.9995，n=5）.The average recovery：emodin 97.1%，RSD was 1.29%；Rhubarb pheno1 97.4%，RSD was 1.37%.Conclusionthe method is accurate and reliable and can be used for quality control of a clear grain.

Yiqing Particles；Emodin；Rhubarb phenol

10.3969／j.issn.1672-2779.2014.04.092

：1672-2779（2014）-04-0146-02

蘇 玲 本文校對(duì)：耿紅梅

2013-11-07）