微柱凝膠免疫分析技術(shù)檢測(cè)血小板抗體的分析

馮 宇

（長(zhǎng)春市中醫(yī)院，吉林 長(zhǎng)春 130022）

微柱凝膠免疫分析技術(shù)檢測(cè)血小板抗體的分析

馮 宇

（長(zhǎng)春市中醫(yī)院，吉林 長(zhǎng)春 130022）

目的探討為主凝膠免疫分析技術(shù)檢測(cè)血小板抗體的效果，初步建立并優(yōu)化這種檢測(cè)血小板抗體的方法。方法選取2012年5月至2013年6月我院收治的血液病患者75例，作為觀察組；另選取2012年5月至2013年6月來我院進(jìn)行健康體檢的健康體檢者75名，作為對(duì)照組。分別采用微柱凝膠免疫分析技術(shù)進(jìn)行血小板抗體檢測(cè)。結(jié)果在75例血液病患者中，共檢出血小板抗體19例；其中輸注超過30個(gè)治療量血小板的患者12例，血小板抗體陽(yáng)性者7例（58.33%）；輸注20～29個(gè)治療量的患者21例，血小板抗體陽(yáng)性者9例（42.86%）；輸注10～19個(gè)治療量的患者27例，血小板抗體陽(yáng)性者10例（37.04%）；輸注3～9個(gè)治療量的患者9例，血小板抗體陽(yáng)性者2例（22.22%）；輸注少于3個(gè)治療量血小板的患者6例，均未檢出血小板抗體。健康體檢者均未檢出血小板抗體。結(jié)論結(jié)果表明血小板抗體的產(chǎn)生與輸注血小板的頻率和量相關(guān)。微柱凝膠免疫分析技術(shù)檢測(cè)血小板抗體準(zhǔn)確可靠、簡(jiǎn)單快速，比傳統(tǒng)的定性檢測(cè)法與定量檢測(cè)法效果好，具有臨床推廣價(jià)值。

微柱凝膠免疫；分析技術(shù)；檢測(cè)；血小板抗體；分析

為了探明多次輸注血小板與血小板抗體陽(yáng)性率的關(guān)系，我院決定引入微柱凝膠免疫分析技術(shù)檢測(cè)血小板抗體，這種方法檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，簡(jiǎn)單快速，值得在臨床推廣。通過分析檢測(cè)結(jié)果，我們得出多次輸注血小板后，患者體內(nèi)的血小板陽(yáng)性檢出率升高的結(jié)論[1]?，F(xiàn)對(duì)微柱凝膠免疫分析技術(shù)檢測(cè)血小板抗體進(jìn)行分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年5月至2013年6月我院收治的血液病患者75例，作為觀察組；另選取2012年5月至2013年6月來我院進(jìn)行健康體檢的健康體檢者75名，作為對(duì)照組。分別采用微柱凝膠免疫分析技術(shù)進(jìn)行血小板抗體檢測(cè)。75例血液病患者中，特發(fā)性血小板減少性紫癜患者39例，再生障礙性貧血患者15例，白血病21例；患者與健康體檢者的年齡均在17～67歲，平均（34.2±10.3）歲；患者與健康體檢者中，男性73例，女性77例；兩組患者在年齡、性別方面的差異無(wú)顯著性，可以進(jìn)行對(duì)比。

1.2 檢查方法

①檢驗(yàn)所需材料。交聯(lián)試劑：為O型血供者多人份混合血小板，含抗人IgG抗體，但與指示細(xì)胞表面的抗人IgG 抗體為非同源。指示紅細(xì)胞：表面包被有抗人IgG 抗體。器材：6孔微柱凝膠板。②檢測(cè)步驟：a.檢測(cè)原理：指示紅細(xì)胞表面包被有抗人IgG抗體，該抗體通過其分子上的Fc段與指示紅細(xì)胞結(jié)合。若受檢者的血液樣品中存在抗血小板抗體，抗血小板抗體將與紅細(xì)胞表面的抗人IgG 抗體的Fab段結(jié)合，形成指示紅細(xì)胞（抗人IgG抗體）-（血小板抗體）-血小板復(fù)合物。在加入交聯(lián)試劑的條件下，交聯(lián)劑與復(fù)合物形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，將此加入微柱凝膠上，在一定的離心力作用下和凝膠的分子篩作用下，網(wǎng)狀復(fù)合物浮在凝膠表層，和游離指示紅細(xì)胞分離。這就出現(xiàn)了可疑（±）依次至陽(yáng)性（++++）凝集。若檢測(cè)標(biāo)本中無(wú)抗血小板抗體，則無(wú)法形成該網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，指示紅細(xì)胞經(jīng)上述處理后仍沉聚在凝膠底部，呈現(xiàn)陰性結(jié)果。b.取凝膠管一支，對(duì)其進(jìn)行標(biāo)本標(biāo)記。依次向其中加入受試者血清、指示紅細(xì)胞（0.5%～0.8%）各一滴（大約為50 μL）。置于37 ℃孵箱中孵育10 min。孵育后，滴加1滴O型血供者混合血小板（3人以上）入反應(yīng)腔，離心3 min，轉(zhuǎn)速1000 r/min。以上各步驟完成后，立即觀察結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

對(duì)結(jié)果進(jìn)行卡方統(tǒng)計(jì)，采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

在75例血液病患者中，共檢出血小板抗體19例；其中輸注超過30個(gè)治療量血小板的患者12例，血小板抗體陽(yáng)性者7例（58.33%）；輸注20～29個(gè)治療量的患者21例，血小板抗體陽(yáng)性者9例（42.86%）；輸注10～19個(gè)治療量的患者27例，血小板抗體陽(yáng)性者10例（37.04%）；輸注3～9個(gè)治療量的患者9例，血小板抗體陽(yáng)性者2例（22.22%）；輸注少于3個(gè)治療量血小板的患者6例，均未檢出血小板抗體。健康體檢者均未檢出血小板抗體。

3 討 論

對(duì)于患有血液疾病的患者，常需要輸入血小板進(jìn)行治療，對(duì)于多次輸血的血小板減少患者，發(fā)生血小板輸血紫癜、血小板輸注無(wú)效的患者較多，其概率可達(dá)30%～70%。這就導(dǎo)致患者在輸注治療量血小板之后，血小板計(jì)數(shù)不升反降，這樣不僅會(huì)導(dǎo)致血小板臨床輸注無(wú)效，還可能對(duì)患者的生命安全造成威脅[2]。血小板是人體內(nèi)的重要物質(zhì)，與凝血等功能密切相關(guān)。血小板表面有很多血型抗原，如HLA抗原、血小板特異抗原、ABH抗原物質(zhì)等，它們可刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)，產(chǎn)生相應(yīng)的血小板抗體，常易引起輸注血小板的患者產(chǎn)生抗血小板抗體，導(dǎo)致發(fā)生不良反應(yīng)，或輸注血小板無(wú)效，血小板值變得更低。我院的研究表明，采用微柱凝膠免疫分析技術(shù)檢測(cè)血液中的血小板抗體，操作簡(jiǎn)便，可快速出結(jié)果，結(jié)果可靠，是一個(gè)實(shí)用的有臨床推廣意義的檢測(cè)方法[3，4]。這個(gè)方法對(duì)于需要輸注血小板進(jìn)行治療的血液病患者有重要意義，因?yàn)槠錂z測(cè)結(jié)果可用于指導(dǎo)醫(yī)護(hù)人員選擇合適性的血小板輸注，該方法并不需要大型儀器，肉眼觀察即可判斷結(jié)果，一般的檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室也可采用。

[1] 李嵐,董洪強(qiáng),張瓊麗.微柱凝膠免疫分析技術(shù)檢測(cè)血小板抗體[J].山西醫(yī)藥雜志,2010, 38(7):16-18.

[2] 徐長(zhǎng)根,賀春金,張遠(yuǎn)鵬,等.微柱凝膠法檢測(cè)血小板抗體[J].臨床檢驗(yàn)雜志,2010,20(5):272-274.

[3] 程洪波,李國(guó)良,熊麗紅,等.微柱凝膠技術(shù)檢測(cè)血小板抗體[J].現(xiàn)代診斷與治療,2010,18(2):72-74.

[4] 許德義,董國(guó)飛,張哲,等.微柱凝膠免疫分析技術(shù)在血小板抗體篩選中的應(yīng)用[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志,2010,15(4):888-890.

R446.1

B

1671-8194（2014）27-0079-01