分子病理檢查規(guī)范化探討

高鵬

分子病理檢查規(guī)范化探討

高鵬

目前, 各大醫(yī)院紛紛開展分子病理檢查, 國內(nèi)多家生物技術(shù)公司與科研機構(gòu)也加入到基因檢查行列中?？傮w來看, 分子檢查發(fā)展趨勢良好, 但是其中也存在諸多問題, 若沒有高度重視此類問題,將會對分子檢查發(fā)展、臨床診斷與靶向治療帶來不良影響。本文重點對分子檢查過程出現(xiàn)的問題進(jìn)行討論, 并對分子病理檢查規(guī)范化提出一些建議。

分子病理；分子檢查；規(guī)范化

分子檢查也稱為基因檢查, 對腫瘤的臨床診斷與預(yù)后判斷起著積極作用, 例如基因重排輔助診斷淋巴瘤、端粒酶(TERC)基因異常擴增判斷宮頸癌的進(jìn)展與預(yù)后等。此外, 分子檢查在產(chǎn)前診斷與篩查致病基因方面也發(fā)揮著重要作用。目前, 靶向治療已經(jīng)成為治療某些惡性腫瘤的有效手段。但是靶向藥物往往針對部分患者發(fā)揮作用, 有些患者應(yīng)用后會出現(xiàn)非常嚴(yán)重的副作用。所以, 給予患者靶向治療之前, 實施分子檢查, 全面分析基因多態(tài)性、基因突變與mRNA水平,進(jìn)而篩選出適合靶向治療的病例尤為重要。

1 加強病理知識培訓(xùn), 構(gòu)建分子病理檢查網(wǎng)絡(luò)

據(jù)報道, 我國90%左右的病理醫(yī)生了解當(dāng)今病理學(xué)的主要發(fā)展方向為分子病理檢查, 但是卻不清楚分子病理檢查的意義與技術(shù)操作。因此, 加強病理醫(yī)生關(guān)于分子檢查方面的知識培訓(xùn)與技術(shù)培訓(xùn)是促進(jìn)分子病理檢查事業(yè)穩(wěn)定健康發(fā)展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。治療過程中, 部分臨床醫(yī)生存在過于依賴病理診斷報告的情況, 所以病理醫(yī)生需要及時向患者與臨床醫(yī)生正確說明分子病理檢查的意義。從這一點上來看, 醫(yī)院應(yīng)在加強病理醫(yī)生關(guān)于分子檢查相關(guān)知識培訓(xùn)的同時, 重視臨床醫(yī)生的培訓(xùn), 使醫(yī)生掌握正確的病理知識, 從而為臨床提供更好的服務(wù)。此外, 建議構(gòu)建分子病理檢查的綜合性網(wǎng)絡(luò)。大型醫(yī)院可建立符合標(biāo)準(zhǔn)的實驗室作為當(dāng)?shù)鼐哂袡?quán)威性的檢測中心, 中型醫(yī)院可根據(jù)實際條件開展分子檢測項目, 小型醫(yī)院不宜獨自開展此類檢查, 可以收集標(biāo)本后送往檢測中心檢查相關(guān)項目, 然后獨立發(fā)布或者由檢測中心發(fā)布檢測報告。醫(yī)院中的病理醫(yī)生需要接受全面、系統(tǒng)、專業(yè)、先進(jìn)的分子檢查理論知識與技術(shù)培訓(xùn), 確定適應(yīng)分子檢查的對象與檢查意義, 并且能夠詳細(xì)的解釋結(jié)果。構(gòu)建一個立體化、全方位的檢查網(wǎng)絡(luò), 能夠促進(jìn)分子病理的快速發(fā)展, 有利于推動靶向治療進(jìn)程與醫(yī)院的持續(xù)發(fā)展。

2 規(guī)范化與統(tǒng)一化分子病理檢查方法

基因突變、熒光原位雜交(FISH)與mRNA是目前分子病理檢查的主要項目, 但是由于各種因素的影響, 許多醫(yī)院在設(shè)備、試劑、實驗方法等方面沒有做到規(guī)范統(tǒng)一, 致使同樣的項目多家醫(yī)院得出不同的檢測結(jié)果, 不利于醫(yī)患關(guān)系的和諧發(fā)展, 現(xiàn)就以下項目提出幾點建議。

2. 1FISH檢查 各個醫(yī)院在FISH檢查中使用的診斷試劑多數(shù)為Vysis公司(美國)或者北京金菩嘉醫(yī)療科技有限公司的產(chǎn)品。雖然Vysis公司的產(chǎn)品得到了美國食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)的認(rèn)證, 但卻尚未取得中國SFDA的認(rèn)證；金菩嘉的產(chǎn)品只是一部分得到了SFDA的認(rèn)證, 其他產(chǎn)品還在審辦過程中。因此建議醫(yī)院使用的產(chǎn)品盡量全部通過認(rèn)證。對FISH結(jié)果造成影響的因素除了試劑因素, 還有標(biāo)本固定因素。要求實施FISH檢測的標(biāo)本均需在10%的福爾馬林中進(jìn)行固定, 標(biāo)準(zhǔn)的固定液量是組織10倍以上?；顧z標(biāo)本固定時間低于24 h, 手術(shù)標(biāo)本在12～48 h之間。標(biāo)本固定規(guī)范化是確保FISH檢測準(zhǔn)確的關(guān)鍵步驟［1］。

2. 2基因突變檢查 基因突變的檢查方法有很多, 各有利弊。例如, 經(jīng)典的基因突變檢查方法為直接測序法, 此種方法結(jié)果可靠, 價格低廉, 但是相較于ARMS法, 其敏感性相對較低。因臨床醫(yī)生對于檢查結(jié)果都會有不同認(rèn)知, 因此這一點上多家醫(yī)院難以統(tǒng)一。不同的敏感性容易導(dǎo)致醫(yī)患糾紛,出現(xiàn)各種法律問題, 建議臨床中對基因突變的檢測方法予以統(tǒng)一。

2. 3mRNA檢查 目前臨床中治療腫瘤疾病通常采用個性化療法, mRNA的檢查項目隨之逐漸增加。國內(nèi)的mRNA檢查一般存在以下問題：①多樣化的檢查標(biāo)本, 主要包括新鮮組織標(biāo)本、穿刺標(biāo)本與石蠟切片組織標(biāo)本。②標(biāo)本的取材時間具有差異性。臨床中的送檢標(biāo)本有可能是幾天前甚至幾年前的組織標(biāo)本, 存放時間不同, mRNA水平自然差異明顯。③臨床中參照的mRNA標(biāo)本多為國外論文數(shù)據(jù), 無個人標(biāo)準(zhǔn)。檢測標(biāo)本不同, 相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)也會不同。建議國內(nèi)分子病理界盡快聯(lián)合, 制定出我國適用于不同組織的mRNA判定標(biāo)準(zhǔn)。

3 小結(jié)

分子病理檢查是當(dāng)代病理的主要發(fā)展趨勢, 作者建議臨床中應(yīng)避免盲目開展此類檢查, 在參照國外先進(jìn)技術(shù)、管理經(jīng)驗與質(zhì)量控制的基礎(chǔ)上, 盡快建立適用于我國的質(zhì)控體系與行業(yè)規(guī)范, 從而促進(jìn)分子病理檢查實現(xiàn)健康發(fā)展。

［1］ 付紅霞, 任國慶, 李艷麗, 等.病理診斷的新領(lǐng)域——腫瘤的分子靶向治療.臨床合理用藥雜志, 2010, 23(04):159-160.

2014-07-15］

473000 河南省南陽市中心醫(yī)院病理科