■李 杰 王曉翠 王盼盼 栗 敏 劉 嬌
(東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,黑龍江哈爾濱150030)
代謝有機(jī)酸是一類(lèi)機(jī)體生命代謝過(guò)程中產(chǎn)生的含羧基的物質(zhì),主要包括短鏈有機(jī)酸、短鏈酮酸,如檸檬酸、蘋(píng)果酸、氨基酸及酮酸等,在生命活動(dòng)中具有非常重要的作用。其中,短鏈有機(jī)酸通常具有1~6個(gè)碳原子,是動(dòng)物大腸內(nèi)(反芻動(dòng)物瘤胃內(nèi))細(xì)菌發(fā)酵多糖、寡糖、蛋白質(zhì)、多肽和糖蛋白而產(chǎn)生的代謝終產(chǎn)物,可被宿主利用[1];短鏈酮酸是指糖、蛋白質(zhì)代謝的中間產(chǎn)物,可為機(jī)體提供能量。在人類(lèi)醫(yī)學(xué)中有較為深入的研究,試驗(yàn)對(duì)象多以哺乳動(dòng)物為主。研究表明,短鏈有機(jī)酸可提高機(jī)體抗應(yīng)激能力及免疫能力;增加小腸消化吸收能力;α-酮戊二酸可緩解斷奶等應(yīng)激造成的腸道黏膜受損,并調(diào)節(jié)能量代謝;α-酮戊二酸可治療慢性腎衰竭,作為防止糖尿病腎病的措施之一[1-7]。而關(guān)于代謝有機(jī)酸對(duì)家禽促生長(zhǎng)作用機(jī)理不甚明了,本試驗(yàn)旨在研究日糧中添加1 000 mg/kg代謝有機(jī)酸對(duì)不同類(lèi)型雞生長(zhǎng)性能及血液生化指標(biāo)的影響,部分揭示代謝有機(jī)酸對(duì)家禽促生長(zhǎng)作用的機(jī)理。
選用初始體重?zé)o顯著性差異的28日齡AA肉仔雞、黃羽肉雞、白羽蛋雞各112只。本試驗(yàn)所用有機(jī)酸產(chǎn)品由東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究所飼料資源研究室開(kāi)發(fā)研制。乳酸菌發(fā)酵基礎(chǔ)上添加有機(jī)酸,成品代謝有機(jī)酸含量為20%,主要包括短鏈酮酸、檸檬酸和延胡索酸等。
將AA肉仔雞、黃羽肉雞、白羽蛋雞各分為兩組,對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧,試驗(yàn)組在基礎(chǔ)日糧中添加一定量代謝有機(jī)酸產(chǎn)品,使日糧代謝有機(jī)酸濃度為1 000 mg/kg,試驗(yàn)期28 d?;A(chǔ)日糧參照NY/T33—2004,結(jié)合本地實(shí)際情況配制玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧,其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。
飼養(yǎng)試驗(yàn)于2012年9月22日~2012年10月19日在東北農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗(yàn)基地進(jìn)行。試驗(yàn)雞飼養(yǎng)于三層全重疊式肉雞籠,自然光照、通風(fēng),自由飲水和采食。
表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))
1.4.1 生產(chǎn)性能
每天觀察雞生長(zhǎng)發(fā)育、發(fā)病情況,發(fā)現(xiàn)死雞立即斷料。于28日齡、56日齡08:00以重復(fù)為單位空腹稱(chēng)重,記錄各重復(fù)采食量,初始體重、末重,計(jì)算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和飼料效率(FE)。
1.4.2 血液生化指標(biāo)
于雞只56日齡,每重復(fù)選取1只接近平均體重雞,頸靜脈采血,37℃靜置30 min,3 000 r/min離心10 min,制備血清,-20℃保存?zhèn)溆?。測(cè)谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)活性和總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿酸(UA)含量。試劑盒購(gòu)于上海豐慧生物技術(shù)有限公司,采用美國(guó)貝克曼全自動(dòng)生化分析儀DXC800測(cè)定。
1.4.3 免疫球蛋白
血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG),試劑盒購(gòu)于上海豐慧生物技術(shù)有限公司,采用美國(guó)貝克曼全自動(dòng)生化分析儀DXC800測(cè)定。
采用SPSS 17.0軟件的獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)程序?qū)υ囼?yàn)雞品種內(nèi)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,以P<0.05為差異顯著性標(biāo)準(zhǔn)。測(cè)定結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。
表2 代謝有機(jī)酸對(duì)不同類(lèi)型雞生長(zhǎng)性能的影響
由表2知,各試驗(yàn)組與對(duì)照組間采食量無(wú)顯著性變化(P>0.05)。在日增重方面,AA肉仔雞試驗(yàn)組顯著高于對(duì)照組(P<0.05);黃羽肉雞試驗(yàn)組與對(duì)照組相比,有提高趨勢(shì)(P=0.056);白羽蛋雞試驗(yàn)組與對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異(P>0.05)。飼料效率方面,AA肉雞試驗(yàn)組顯著高于對(duì)照組(P<0.05),其他兩種雞試驗(yàn)組飼料效率與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異(P>0.05)。
表3 代謝有機(jī)酸對(duì)不同類(lèi)型雞血清生化指標(biāo)的影響
與對(duì)照組相比,三種類(lèi)型雞試驗(yàn)組血清ALB含量無(wú)顯著性差異(P>0.05),試驗(yàn)組白羽蛋雞TP顯著高于對(duì)照組(P<0.05);AA肉仔雞試驗(yàn)組與對(duì)照組UA相比無(wú)顯著差異(P>0.05),黃羽肉雞試驗(yàn)組UA有降低趨勢(shì)(P=0.053),白羽蛋雞試驗(yàn)組UA含量顯著低于對(duì)照組(P<0.05);此外,各品種試驗(yàn)雞的GPT活性與對(duì)照組相比差異不顯著(P>0.05),GOT在AA肉雞、白羽蛋雞上差異不顯著,而黃羽肉雞試驗(yàn)組顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。
表4 代謝有機(jī)酸對(duì)不同類(lèi)型雞血清免疫指標(biāo)的影響(mg/dl)
由表4可知,56日齡試驗(yàn)雞各組IgA、IgG、IgM的含量均高于對(duì)照組,但對(duì)于不同類(lèi)型雞血清中的免疫球蛋白含量影響是不同的。對(duì)于AA肉仔雞而言,試驗(yàn)組的IgA、總免疫球蛋白含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05),IgG、IgM亦高于對(duì)照組(P>0.05);對(duì)于黃羽肉雞、白羽蛋雞而言,試驗(yàn)組IgA、IgG、IgM與對(duì)照組相比,都略有增加(P>0.05)。
試驗(yàn)結(jié)果表明,代謝有機(jī)酸對(duì)雞有促長(zhǎng)作用,這與Adil等[8]研究結(jié)果相類(lèi)似:肉仔雞日糧中補(bǔ)充代謝有機(jī)酸,可顯著提高飼料轉(zhuǎn)化率。Owens等[9]研究也顯示肉仔雞采食代謝有機(jī)酸可提高日增重。王盼盼等[10]的研究結(jié)果亦證實(shí):1 000 mg/kg代謝有機(jī)酸可提高黃羽肉雞日增重,降低料肉比。飼料效率提高的原因可能是因代謝有機(jī)酸可幫助禽類(lèi)消化飼料中的營(yíng)養(yǎng)成分與調(diào)控代謝路徑的共同作用結(jié)果。本試驗(yàn)結(jié)果表明雞飼料中添加1 000 mg/kg代謝有機(jī)酸可提高平均日增重及飼料效率,但對(duì)于不同品種雞而言,這種促生長(zhǎng)效果是不同的。本試驗(yàn)結(jié)果可以看出:相對(duì)于各類(lèi)型雞的對(duì)照組而言,AA肉仔雞試驗(yàn)組的平均日增重提高的幅度最大,黃羽肉雞試驗(yàn)組次之,白羽蛋雞試驗(yàn)組的平均日增重幾乎與對(duì)照組是持平的;AA肉仔雞試驗(yàn)組的飼料效率顯著高于對(duì)照組。而AA肉仔雞的生長(zhǎng)速度是最快的,黃羽肉雞其次,白羽蛋雞則是生長(zhǎng)最慢的。這說(shuō)明試驗(yàn)所使用的有機(jī)酸對(duì)于雞的促生長(zhǎng)作用,與雞的品種有關(guān),也就是說(shuō)雞生長(zhǎng)越快,代謝有機(jī)酸對(duì)其的促生長(zhǎng)效果也就越顯著。但其中的具體機(jī)理還需要進(jìn)一步的深入研究。
3.2.1 對(duì)血清蛋白代謝的影響
血清總蛋白(TP)由白蛋白(ALB)和球蛋白(GLOB)兩部分組成。ALB由肝臟合成,具有維持正常血漿滲透壓、傳遞小分子物質(zhì)、保護(hù)球蛋白的功能[11]。同時(shí),ALB含量也反映肝臟合成功能。本試驗(yàn)結(jié)果顯示:添加1 000 mg/kg代謝有機(jī)酸對(duì)三種類(lèi)型雞血清中的ALB含量無(wú)顯著影響(P>0.05),且在正常范圍之內(nèi)??赡苡捎诖x有機(jī)酸存在一些替代肝臟ALB合成的機(jī)制,亦或是對(duì)肝臟的合成功能有一些影響而導(dǎo)致血清中的ALB值下降(白羽蛋雞除外)。UA是禽類(lèi)機(jī)體蛋白質(zhì)及非蛋白氮代謝分解的主要終產(chǎn)物及排泄形式。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)分解代謝增強(qiáng)時(shí),UA含量便會(huì)升高。因此UA含量高低可很大程度上反映機(jī)體內(nèi)蛋白質(zhì)利用狀況,UA含量越低表明機(jī)體氮的利用效率越高,體內(nèi)蛋白質(zhì)的沉積量越大。有研究顯示:α-酮戊二酸可促進(jìn)黃羽肉雞蛋白質(zhì)沉積[12]。陳娟[13]的研究顯示,日糧中添加5%丙酮酸肌酸,能夠在不影響肉雞生長(zhǎng)性能的前提下,增加肌蛋白合成,利于肌肉ATP貯存及蛋白質(zhì)沉積。而臨床上主要用復(fù)方酮酸片預(yù)防和治療慢性腎功能不全時(shí)引起的蛋白質(zhì)代謝紊亂[14],改善機(jī)體氨基酸組成比例,調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)代謝及合成。本研究結(jié)果表明:處于28~56日齡生長(zhǎng)階段的不同類(lèi)型雞種而言,與對(duì)照組相比,添加1 000 mg/kg代謝有機(jī)酸對(duì)于AA肉仔雞試驗(yàn)組UA無(wú)顯著影響(P>0.05),黃羽肉雞試驗(yàn)組UA有降低趨勢(shì)(P=0.053),白羽蛋雞試驗(yàn)組UA含量顯著低于對(duì)照組(P<0.05);試驗(yàn)組與對(duì)照組UA含量降低程度顯示,AA肉仔雞<黃羽肉雞<白羽蛋雞。說(shuō)明本試驗(yàn)添加劑量下的有機(jī)酸可提高機(jī)體氮的利用效率,增加體內(nèi)蛋白質(zhì)沉積量,但對(duì)于不同品種的雞,提高機(jī)體氮利用效率的幅度是不同的,其具體原因需進(jìn)一步研究。
3.2.2 對(duì)血清GPT、GOT活性的影響
轉(zhuǎn)氨酶在機(jī)體蛋白質(zhì)代謝過(guò)程中有重要作用,GPT和GOT催化血中氨基與碳骨架相結(jié)合生成氨基酸。機(jī)體處于健康狀態(tài)時(shí),體內(nèi)各種轉(zhuǎn)氨酶主要存在于相應(yīng)的組織細(xì)胞內(nèi)。因此,血清中GOT、GPT活性增高,說(shuō)明肝臟功能受到影響或肝臟細(xì)胞線粒體遭受損傷且細(xì)胞膜通透性增強(qiáng)所致。本試驗(yàn)中,三種類(lèi)型雞試驗(yàn)組的GPT、GOT與對(duì)照組相比,AA肉雞、白羽蛋雞上差異不顯著(P>0.05),而黃羽肉雞GOT試驗(yàn)組顯著低于對(duì)照組,說(shuō)明日糧中添加1 000 mg/kg代謝有機(jī)酸對(duì)于三種類(lèi)型雞的肝臟和心肌都沒(méi)有損害作用,此添加水平對(duì)于AA肉仔雞、黃羽肉雞及白羽蛋雞而言,都是安全無(wú)害的。
血清免疫球蛋白的種類(lèi)、比例和含量變化是免疫器官體液免疫發(fā)育、發(fā)達(dá)程度及其功能變化的外周血液表現(xiàn),并與動(dòng)物的健康狀態(tài)和免疫機(jī)能密切相關(guān)。其中IgG是在血清中含量最高、維持時(shí)間最長(zhǎng),是機(jī)體抗感染免疫的主要力量,可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,對(duì)細(xì)胞性抗原可產(chǎn)生抗體依賴性的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒(AD-CC)作用及調(diào)理作用[15]。IgM主要由淋巴組織和脾臟中的B細(xì)胞產(chǎn)生,是分子量最大的免疫球蛋白,在機(jī)體感染早期起到先鋒免疫作用[16]。IgA主要由漿細(xì)胞產(chǎn)生,血清中IgA具有抗菌、抗毒素、抗病毒等抗體活性。當(dāng)機(jī)體處于應(yīng)激狀態(tài)或緊急情況下,檸檬酸、延胡索酸等三羧酸循環(huán)的中間產(chǎn)物,可直接用于生成ATP,以供能的方式減少機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)[17]。許多研究者研究證實(shí):有機(jī)酸可增強(qiáng)機(jī)體免疫、減少應(yīng)激[18-20]。本試驗(yàn)結(jié)果表明:有機(jī)酸對(duì)于不同類(lèi)型雞的作用效果還是有差別的,主要表現(xiàn)在AA肉仔雞試驗(yàn)組IgA及總免疫球蛋白含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05);而黃羽肉雞及白羽蛋雞試驗(yàn)組的免疫球蛋白則與各自對(duì)照組之間無(wú)顯著性差異。說(shuō)明1 000 mg/kg代謝有機(jī)酸有提高肉雞機(jī)體免疫力的效果,但對(duì)于生長(zhǎng)速度越快的雞種,有機(jī)酸增強(qiáng)免疫力的效果也是越明顯的。
① 對(duì)于28~56日齡雞而言,1 000 mg/kg代謝有機(jī)酸對(duì)AA肉仔雞促生長(zhǎng)效果最為明顯,其次是黃羽肉雞,對(duì)于白羽蛋雞則未表現(xiàn)出促生長(zhǎng)效果。
②1 000 mg/kg代謝有機(jī)酸對(duì)三種類(lèi)型雞的肝臟無(wú)損傷,可提高機(jī)體氮的利用效率,增加體內(nèi)蛋白質(zhì)沉積量。
③1 000 mg/kg代謝有機(jī)酸提高機(jī)體免疫力的效果與雞的生長(zhǎng)速度呈正相關(guān)。