■陳 娜 崔樹(shù)和 同仲彬 高青山 尹云厚 嚴(yán)昌國(guó) 李香子
(1.延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院,吉林延吉 133000;2.貴州民族大學(xué),貴州貴陽(yáng) 550000)
延邊黃牛是我國(guó)五大地方良種肉牛之一。優(yōu)質(zhì)高檔牛肉生產(chǎn)對(duì)我國(guó)肉牛產(chǎn)業(yè)發(fā)展與人民生活質(zhì)量具有重要意義。共軛脂肪酸(CLA、CLnA)具有抗癌等生物學(xué)特性,提升牛肉中共軛脂肪酸含量對(duì)改善牛肉品質(zhì)具有重要作用。體外研究表明亞麻酸可顯著提高延邊黃牛瘤胃液中t11-C18∶1,CLA,t11,c15-C18∶2及CLnA等氫化中間產(chǎn)物的積累,日糧中添加亞麻籽可顯著提高牛肌內(nèi)脂肪中CLA含量以及相關(guān)不飽和脂肪酸的比例。反芻動(dòng)物血液中的脂肪酸主要是日糧中脂肪酸經(jīng)過(guò)瘤胃微生物氫化作用后排空到十二指腸吸收進(jìn)入血液的。所以,血液中的脂肪酸量與瘤胃液中的脂肪酸構(gòu)成特性相關(guān)。亞麻籽(flaxseed)又稱(chēng)胡麻籽,是一種富含α-亞麻酸(ALA)的油料籽實(shí)。長(zhǎng)期以來(lái),在飼料領(lǐng)域亞麻籽的開(kāi)發(fā)利用主要作為蛋白質(zhì)飼料集中在胡麻餅粕上。近年來(lái),國(guó)外開(kāi)展了大量對(duì)亞麻籽的應(yīng)用研究,而國(guó)內(nèi)該領(lǐng)域的研究較少,而且已有的也是以奶牛為主。本試驗(yàn)以延邊黃牛為試驗(yàn)對(duì)象,擬通過(guò)在飼糧中添加亞麻籽,以期了解其對(duì)肉牛血液生化指標(biāo)及血液脂肪酸組成的影響,為提高牛肉品質(zhì)提供理論依據(jù)。
選擇30頭健康無(wú)病、體況相近(510±5)kg的育肥后期延邊黃牛(閹公牛)。延邊黃牛由延邊大學(xué)延邊黃牛高檔牛肉生產(chǎn)科技示范基地提供。
延邊黃牛育肥牛(閹公牛)30頭,分為兩組(每組15頭),分別為對(duì)照組(CON組,基礎(chǔ)日糧)、和試驗(yàn)組(LNA組,8%DM,以胡麻籽為亞麻酸的底物)。試驗(yàn)期100 d,基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。
表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))
每天06:30和16:30分2次飼喂,自由飲水。
1.4.1 樣品采集和處理
每期試驗(yàn)最后1 d飼喂前,頸靜脈采集血液,采集2管(抗凝和非抗凝)血樣,抗凝血漿用于血液脂肪酸組成分析,非抗凝血分離制備血清用于血液生理生化代謝指標(biāo)測(cè)定。非抗凝血,靜置或置37℃環(huán)境中促其凝固,待血液凝固后,將其平衡后離心(一般為3 000 r/min,離心15 min),得到的上清液即為血清。抗凝血,離心(3 000 r/min,離心15 min)后所得的上清液即為血漿,-20℃保存,待測(cè)血液中長(zhǎng)鏈脂肪酸。
1.4.2 試驗(yàn)樣品的測(cè)定
血清中的谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、葡萄糖、總膽固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白等使用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定(HITACHI 7600-020,Tokyo,JP)。
血漿中長(zhǎng)鏈脂肪酸甲酯的制備參照Palmquist等方法。測(cè)定條件:安捷倫氣相色譜(GC7890A,Agilent,F(xiàn)ID,100m Supelco,SPTM-2560 FAME毛細(xì)管柱)柱箱溫度 140℃,5 min,4℃ /min升至240℃,40 min;進(jìn)樣口260℃,檢測(cè)器260℃;氦氣207 kPa;進(jìn)樣量1 μl,分流比20∶1。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)全部采用Excel 2007軟件進(jìn)行整理,使用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件中單因素方差分析過(guò)程進(jìn)行統(tǒng)計(jì),并用LSD法進(jìn)行均值的多重比較,顯著性水平為P<0.05。
表2 亞麻籽對(duì)延邊黃牛血液生化指標(biāo)的影響
由表2可知,日糧中添加亞麻籽對(duì)延邊黃牛血液中血糖、甘油三酯、血清總蛋白、谷草轉(zhuǎn)氨酶含量沒(méi)有顯著影響(P>0.05),但試驗(yàn)組牛血液膽固醇、高密度脂蛋白含量均極顯著高于對(duì)照組(P<0.01),分別較對(duì)照組提高了32.57%、32.31%。低密度脂蛋白、谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量較對(duì)照組也提高了55%、21.03%(P<0.05)。
表3 亞麻籽對(duì)延邊黃牛血液脂肪酸含量的影響(mg/l)
由表3可知,日糧中添加亞麻籽對(duì)延邊黃牛血漿中 C12∶0、C14∶1、C16∶0、C18∶1n9t、C18∶1t11、C18∶2n6c、C20∶3n6、C20∶3n3、C22∶0、沒(méi)有顯著影響,但試驗(yàn)組血漿中C17∶1、C18∶0、C18∶3n6、C9,t11CLA、PUFA均顯著高于對(duì)照組(P<0.05),試驗(yàn)組血漿中總CLNA的含量也有所提高,差異極顯著(P<0.01)。
本試驗(yàn)中,血清中的高密度脂蛋白、總膽固醇含量增加,這與Gonthier研究相一致。這可能是由于飼糧中添加油料籽實(shí)刺激了機(jī)體與脂肪酸合成和分解代謝相關(guān)的因子產(chǎn)生,但有些試驗(yàn)表明PUFA對(duì)于降低總膽固醇水平有明顯的作用,因此,亞麻籽對(duì)于血液膽固醇含量的影響仍有待于研究。結(jié)果顯示,低密度脂蛋白的濃度也增加了,與油料籽實(shí)日糧使低密度脂蛋白濃度增加相一致,低密度脂蛋白有作為膽固醇載體的功能,所以當(dāng)飼喂油籽時(shí),血液中的膽固醇增加,并且刺激低密度脂蛋白相應(yīng)地增加。
日糧亞麻酸在瘤胃微生物的氫化作用下,主要終產(chǎn)物為硬脂酸(C18∶0),在氫化過(guò)程會(huì)產(chǎn)生一系列的中間產(chǎn)物如共軛亞油酸(C9,t11CLA)、反式油酸(t11-C18∶1)等,這些中間產(chǎn)物會(huì)通過(guò)瘤胃壁被吸收或隨著食糜流到小腸被吸收入血液。
在本研究中,日糧添加亞麻籽顯著提高了血液中硬脂酸(C18∶0)、亞麻酸(C18∶3n6)、共軛亞油酸(C9,t11CLA)、總共軛亞麻酸(total CLNA)、多不飽和脂肪酸(PUFA)的含量,有研究表明血漿中的長(zhǎng)鏈脂肪酸主要來(lái)源于日糧,本試驗(yàn)日糧添加亞麻籽提高了瘤胃中亞麻酸含量,使瘤胃不飽和脂肪酸含量的增加,為氫化反應(yīng)提供了充足的底物,從而提高了瘤胃中反式油酸(t11-C18∶1)的產(chǎn)量。為血液中生成CLA提供了酶所作用的底物,進(jìn)而生成更多的共軛亞油酸(C9,t11CLA)。大量的類(lèi)似報(bào)道指出日糧添加多不飽和脂肪酸提高瘤胃液中CLA產(chǎn)量。Akraim等發(fā)現(xiàn),用未加工或壓榨的亞麻籽飼喂奶??梢蕴岣咂溲篊LA的含量,這與本試驗(yàn)結(jié)果一致。體外研究中添加亞麻酸使延邊黃牛瘤胃液中總共軛亞麻酸含量增加,本試驗(yàn)中總共軛亞麻酸的含量顯著升高,這可能是瘤胃液中的共軛亞麻酸通過(guò)瘤胃壁被吸收或隨著食糜流到小腸被吸收入血液,從而使血液中的總共軛亞麻酸含量增加。有研究表明,十二指腸灌注C18∶3游離脂肪酸40 g/(d·頭)即可使血液中C18∶3含量提高154.47%,本試驗(yàn)血液中亞麻酸含量也顯著增加了,張玉斌等研究發(fā)現(xiàn),日糧中添加富含亞麻酸的亞麻籽可以使乳脂中亞麻酸(C18∶3)含量增加,這說(shuō)明在日糧中添加富含長(zhǎng)鏈脂肪酸的油料籽實(shí)時(shí),乳腺便可從血液中吸收更多的長(zhǎng)鏈脂肪酸C18∶3,從而使乳脂中長(zhǎng)鏈脂肪酸C18∶3含量增加。本研究表明添加富含多不飽和脂肪酸的油料作物可以提高延邊黃牛血液脂肪酸中多不飽和脂肪酸的含量。
①飼糧中添加亞麻籽極顯著提高了血清中高密度脂蛋白的濃度(P<0.01)、膽固醇(P<0.01),低密度脂蛋白(P<0.05)的濃度也顯著增加。
②飼糧中添加亞麻籽顯著提高了血液中硬脂酸(C18∶0)(P<0.05)、亞麻酸(C18∶3n6)(P<0.05)、共軛亞油酸(C9,t11CLA)(P<0.05)、總共軛亞麻酸(totalCLNA)(P<0.01)、多不飽和脂肪酸(PUFA)(P<0.05)的含量。改善了血液脂肪酸的組成。
(參考文獻(xiàn)22篇,刊略,需者可函索)