962例尿培養(yǎng)病原菌分布及耐藥性分析

吳芳芳，許 紋，楊樂(lè)園

(1.上海建工醫(yī)院檢驗(yàn)科，上海200083;2.上海市第一人民醫(yī)院寶山分院，上海200940)

尿路感染是臨床常見(jiàn)的泌尿系統(tǒng)疾病。及時(shí)了解病原菌的分布和耐藥性變遷對(duì)臨床合理使用抗菌藥物具有重要的意義[1]。我們通過(guò)對(duì)尿標(biāo)本中分離的菌株進(jìn)行分析，了解尿路感染患者致病菌分布及耐藥狀況，為臨床合理選用抗菌藥物提供依據(jù)。

材料和方法

一、標(biāo)本來(lái)源

收集2011年1月1日至2012年12月31日上海建工醫(yī)院尿標(biāo)本中的臨床分離菌株，剔除同一患者相同部位中的重復(fù)菌株，重復(fù)多次送檢取第一次陽(yáng)性結(jié)果進(jìn)行分析。

二、儀器與試劑

采用ATB細(xì)菌鑒定儀進(jìn)行菌種鑒定和藥物敏感性試驗(yàn)，菌種鑒定和藥敏試驗(yàn)的試劑條，均購(gòu)自法國(guó)生物梅里埃公司。

三、方法

1.標(biāo)本的采集和培養(yǎng) 按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》(第3版)要求進(jìn)行。

2.細(xì)菌鑒定 采用ATB細(xì)菌鑒定儀及配套細(xì)菌鑒定試劑條進(jìn)行菌種鑒定。

3.藥物敏感性試驗(yàn) 采用ATB細(xì)菌鑒定儀及配套藥敏試劑條進(jìn)行藥物敏感試驗(yàn)。判定標(biāo)準(zhǔn)按美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)2012年版的規(guī)定[2]。質(zhì)控菌株為金黃色葡萄球菌(ATCC 29213)、大腸埃希菌(ATCC25922、ATCC35218)、銅綠假單胞菌(ATCC27853)、糞腸球菌(ATCC29212)由上海市臨床檢驗(yàn)中心提供。

4.超廣譜 β內(nèi)酰胺酶(ESBLs)檢測(cè) 按CLSI推薦的紙片篩選法和酶抑制劑增強(qiáng)確證試驗(yàn)檢測(cè)大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、產(chǎn)酸克雷伯菌和奇異變形桿菌中產(chǎn)ESBLs菌株。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用WHONET 5.4軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

結(jié) 果

一、病原菌分布

尿標(biāo)本中共分離致病菌962株，其中革蘭陽(yáng)性菌 261株(27.1%)、革蘭陰性菌 701株(72.9%)。以大腸埃希菌分離數(shù)最多，為429株(44.6%)，其次為腸球菌屬 228 株(23.7%)、肺炎克雷伯菌83株(8.6%)。大腸埃希菌ESBLs陽(yáng)性率為63.2%，肺炎克雷伯菌ESBLs陽(yáng)性率為56.6%。見(jiàn)表 1。

表1 962株病原菌分離構(gòu)成比

二、大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性

未檢出對(duì)碳青霉烯類藥物耐藥的大腸埃希菌，肺炎克雷伯菌對(duì)碳青霉烯類藥物的耐藥率僅為4.8%。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)第3代和第4代頭孢菌素的耐藥率分別在60%和55%左右;大腸埃希菌對(duì)喹諾酮類藥物的耐藥率為77.9%，肺炎克雷伯菌則為47.0%。見(jiàn)表2。

三、腸球菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性

腸球菌屬共228株，其中糞腸球菌129株，占革蘭陽(yáng)性菌的49.4%;屎腸球菌76株，占革蘭陽(yáng)性菌的29.1%。耐藥情況見(jiàn)表3。

表2 大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率 (%)

表3 腸球菌屬細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率 (%)

四、銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性

銅綠假單胞菌對(duì)亞胺培南的耐藥率為14.1%，對(duì)阿米卡星的耐藥率僅為3.1%。鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥情況較嚴(yán)重，對(duì)常用藥物的耐藥率均在40%以上。見(jiàn)表4。

表4 銅綠假單胞菌、鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥率 (%)

討 論

隨著抗菌藥物、免疫抑制劑、激素及介入性診療措施的增多，尿路感染發(fā)生率明顯升高。本研究結(jié)果顯示，泌尿道感染致病菌為革蘭陰性桿菌為主(72.9%)，主要致病菌為大腸埃希菌，占44.6%，與文獻(xiàn)報(bào)道[3-4]一致。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌中 ESBLs陽(yáng)性率分別為 63.2%和56.6%，與文獻(xiàn)報(bào)道[4-5]一致。

大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)第3代、第4代頭孢菌素的耐藥率在53.1% ～62.9%之間，對(duì)阿米卡星、哌拉西林-他唑巴坦的耐藥率較低(均＜10%)。提示頭孢菌素已成為嚴(yán)重耐藥的藥物，臨床治療尿路感染應(yīng)慎重使用第3代、第4代頭孢菌素[5]。本研究結(jié)果顯示，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)喹諾酮類藥物的耐藥率分別為77.9%、47.0%，而糞腸球菌、屎腸球菌的耐藥率分別為 72.9%和 93.3%，與文獻(xiàn)報(bào)道[7]一致。這可能與臨床經(jīng)驗(yàn)性治療首選喹諾酮類藥物有關(guān)。因此，將喹諾酮類藥物作為臨床治療尿路感染的一線藥物可能已不太合適。但各種藥物主要經(jīng)腎臟排泄，尿液中藥物濃度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于細(xì)菌的最低抑菌濃度，能否應(yīng)用奎諾酮類藥物治療泌尿系統(tǒng)感染仍需進(jìn)一步研究[8]。銅綠假單胞菌對(duì)亞胺培南的耐藥率為14.1%，是除黏菌素外最敏感的藥物。鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)亞胺培南的耐藥率為42.3%。

綜上所述，尿培養(yǎng)陽(yáng)性的致病菌以大腸埃希菌、腸球菌菌屬和肺炎克雷伯菌最為多見(jiàn)。致病菌對(duì)喹諾酮類藥物及第3代、第4代頭孢菌素耐藥現(xiàn)象嚴(yán)重。臨床需要密切關(guān)注細(xì)菌耐藥性變化趨勢(shì)，應(yīng)根據(jù)藥敏結(jié)果合理使用抗菌藥物，減少耐藥菌的產(chǎn)生。

[1]楊 青，陳 曉，孔海深，等.Mohnarin2011年度報(bào)告:尿標(biāo)本細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2012，22(24):5503-5507.

[2]Clinical and Laboratory Standards Institute.Performance standard for antimicrobial susceptibility testing[S].M100-S22，CLSI，2010.

[3]楊 青，陳 曉，孔海深，等.Mohnarin 2010年度報(bào)告:尿標(biāo)本細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2012，22(3):476-480.

[4]鄭齊鍶，曹小利，周愛(ài)平，等.尿路感染大腸埃希菌耐藥特點(diǎn)與種系分型和遺傳相關(guān)性分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2013，28(12):1102-1105.

[5]楊 青，陳 曉，孔海深，等.Mohnarin 2011年度報(bào)告:尿標(biāo)本細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2012，22(24):5503-5507.

[6]葉劍榮，袁利群.658例尿培養(yǎng)病原菌分布及耐藥性分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2010，5(7):805-808.

[7]鮑彩麗，范倩燕，吳 迪，等.安圖醫(yī)院尿路感染患者中段尿中分離出的糞腸球菌和屎腸球菌的耐藥性分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2014，29(1):38-41.

[8]呂 媛，李 耘，崔蘭卿.2010年度衛(wèi)生部全國(guó)細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)報(bào)告:腸桿菌科細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2011，21(24):5138-5143.