冠心病病人血清MMP-9與Hcy濃度變化及臨床意義

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(1 青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院診斷學(xué)教研室,山東 青島 266021; 2 青島市海慈醫(yī)療集團(tuán)血液凈化中心; 3 青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院2011級(jí)本科生)

基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)是一種鋅離子依賴性蛋白水解酶，最早由SOPATA等[1]在人的中性粒細(xì)胞中提純。MMP-9能夠降解細(xì)胞外基質(zhì)，破壞粥樣斑塊的穩(wěn)定性，因此，其在冠心病(CHD)的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用[2-3]。同型半胱氨酸(Hcy)可參與低密度脂蛋白的氧化，促進(jìn)泡沫細(xì)胞的生成，還可激活多種細(xì)胞因子及黏附分子，發(fā)揮促炎作用，加速動(dòng)脈粥樣硬化的形成[4]。因此，Hcy被認(rèn)為是CHD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素之一。本研究檢測(cè)不同類型CHD病人血清MMP-9、Hcy濃度的變化及其相關(guān)性，探討兩者在CHD發(fā)病中的作用及臨床意義?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

1.1.1CHD組 根據(jù)WHO關(guān)于CHD的診斷標(biāo)準(zhǔn)，從我院附屬醫(yī)院2011年3—6月的住院病人中選取CHD病人60例，男32例，女28例；年齡38～85歲，平均(61.96±11.23)歲。其中急性心肌梗死(AMI)組20例，男11例，女9例，平均年齡(61.75±14.34)歲；不穩(wěn)定型心絞痛(UAP)組20例，男10例，女10例，平均年齡(62.80±13.16)歲；穩(wěn)定型心絞痛(SAP)組20例，男11例，女9例，平均年齡(59.85±8.61)歲。

1.1.2對(duì)照組 選取同期健康體檢者20例作為對(duì)照組，其中男9例，女11例，年齡為55～86歲，平均(63.45±8.01)歲；經(jīng)詢問(wèn)病史及常規(guī)體格檢查未見異常。

CHD組和對(duì)照組均排除炎癥、感染、心肌病、糖尿病、腫瘤、肝腎功能衰竭、自身免疫性疾病等疾病，無(wú)近期手術(shù)或創(chuàng)傷史。各組間年齡、性別比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 檢測(cè)指標(biāo)及方法

所有研究對(duì)象均于清晨采集空腹靜脈血4 mL，37 ℃水浴30 min后，3 000 r/min離心10 min分離血清，分裝于兩個(gè)EP管中，并于-20 ℃密封保存。MMP-9、Hcy均采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法測(cè)定，試劑盒由美國(guó)ADL公司提供。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 各組MMP-9和Hcy濃度的比較

CHD組MMP-9和Hcy濃度均高于對(duì)照組，差異有顯著性(t′=6.73、6.40，P<0.01)。AMI組MMP-9和Hcy濃度顯著高于UAP組、SAP組及對(duì)照組(F=35.91、40.75，q=4.95～14.14，P<0.01)；UAP組高于SAP組及對(duì)照組(q=5.08～7.49，P<0.01)；SAP組與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=0.39、1.48，P>0.05)。見表1。

2.2 CHD病人血清MMP-9和Hcy濃度的相關(guān)性

CHD病人血清MMP-9和Hcy濃度呈正相關(guān)(r=0.490，P<0.01)。

2.3 CHD病人血清MMP-9和Hcy濃度的受試者工作曲線(ROC)分析

AMI病人血清MMP-9和Hcy濃度的ROC曲線下面積(AUCROC)均大于0.9，分別為0.996和0.981，對(duì)AMI的診斷價(jià)值較高，同時(shí)具有較高的靈敏度和特異度。見表2。血清MMP-9和Hcy濃度對(duì)UAP也具有較高的診斷價(jià)值，其AUCROC分別為0.940和0.914。見表3。SAP組血清MMP-9和Hcy濃度的AUCROC分別為0.531和0.661，對(duì)SAP無(wú)診斷價(jià)值。

表1 CHD組與對(duì)照組血清MMP-9和Hcy濃度比較

表2 AMI病人血清MMP-9和Hcy診斷價(jià)值的比較

表3 UAP病人血清MMP-9和Hcy診斷價(jià)值的比較

3 討 論

MMP-9又稱明膠酶B，是一種高度保守的、以無(wú)活性酶原形式分泌的、依賴于鋅離子的蛋白水解酶，主要由中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等分泌。MMP-9可降解組織的Ⅳ型膠原、彈性蛋白等，從而破壞細(xì)胞外基質(zhì)的完整性，導(dǎo)致血管中層平滑肌細(xì)胞(VSMC)移行至內(nèi)膜層，并大量增殖形成斑塊。因此，MMP-9在動(dòng)脈粥樣硬化(AS)的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用。另外，MMP-9可誘發(fā)VSMC釋放TNF-α，使大量VSMC發(fā)生凋亡，導(dǎo)致斑塊肩部無(wú)法發(fā)揮支撐作用；MMP-9還可降解斑塊纖維帽的膠原及結(jié)締組織，使纖維帽變薄，斑塊抵抗應(yīng)力的能力減弱，穩(wěn)定性遭到破壞，易于破裂，繼發(fā)血栓，進(jìn)而導(dǎo)致CHD的急性發(fā)作。已有研究顯示，不穩(wěn)定斑塊中MMP-9的濃度可達(dá)穩(wěn)定斑塊的3～5倍，證實(shí)MMP-9與AS斑塊的穩(wěn)定性密切相關(guān)，是導(dǎo)致斑塊不穩(wěn)定的重要因素[5]。

本研究結(jié)果顯示，CHD病人血清MMP-9濃度明顯高于對(duì)照組，AMI組、UAP組血清MMP-9濃度明顯高于SAP組，并隨CHD病情嚴(yán)重程度增加而呈增高趨勢(shì)。MMP-9是一種新型的炎癥遞質(zhì)，在炎癥反應(yīng)過(guò)程中，AS斑塊中浸潤(rùn)的炎性細(xì)胞可釋放大量的MMP-9，增強(qiáng)IL-1β、TNF-α等炎性遞質(zhì)的活性，并相互誘生、循環(huán)作用，使炎癥反應(yīng)進(jìn)一步擴(kuò)大，CHD病情加重。另外，在IL-6、IL-18等炎性因子的作用下，炎性細(xì)胞釋放MMP-9加強(qiáng)，導(dǎo)致CHD病人血清MMP-9濃度進(jìn)一步升高[6]。CHD病人AS斑塊中MMP-9與其他炎癥因子共同作用，導(dǎo)致斑塊的炎性狀態(tài)，最終破壞粥樣斑塊的穩(wěn)定性，引起斑塊破裂[7]。因此，血清MMP-9濃度在一定程度上可反映CHD的嚴(yán)重程度，對(duì)CHD的病變程度有一定的預(yù)測(cè)價(jià)值。

Hcy是甲硫氨酸代謝過(guò)程中產(chǎn)生的含硫氨基酸，其合成及代謝過(guò)程中酶缺乏或葉酸、維生素B12缺乏可導(dǎo)致血清Hcy濃度顯著升高，高于15 μmol/L被稱為高Hcy血癥(HHcy)。Hcy可參與血管內(nèi)皮舒張因子一氧化氮(NO)的代謝過(guò)程，導(dǎo)致舒張障礙，對(duì)血管內(nèi)皮造成損傷，進(jìn)一步引起血管痙攣及局部血栓形成[8]。Hcy合成及代謝過(guò)程中產(chǎn)生大量的氧自由基及過(guò)氧化物，可氧化低密度脂蛋白(LDL)，形成OX-LDL，而OX-LDL可促進(jìn)泡沫細(xì)胞的生成，引起血管壁增厚、血管阻力增加，導(dǎo)致AS斑塊形成[9]。

本研究結(jié)果顯示，CHD組Hcy濃度顯著高于對(duì)照組，AMI組、UAP組血清Hcy濃度明顯高于SAP組，隨CHD病情嚴(yán)重程度增加，血清Hcy濃度呈上升趨勢(shì)，提示Hcy濃度可反映CHD的病情嚴(yán)重程度。PAN等[10]研究顯示，降低血清Hcy濃度并不能減少心血管疾病的病死率和心血管事件的發(fā)生率，Hcy濃度與CHD患病風(fēng)險(xiǎn)之間并無(wú)聯(lián)系，兩者之間只是一種伴隨關(guān)系。此觀點(diǎn)存有爭(zhēng)議，BOUSHEY等[11]研究表明，血清Hcy濃度越高，罹患CHD的風(fēng)險(xiǎn)越高。因此，Hcy是動(dòng)脈粥樣硬化性疾病的危險(xiǎn)因子，可導(dǎo)致CHD的發(fā)生，而不是CHD的伴隨現(xiàn)象。SHASTRY等[12]研究表明，Hcy可上調(diào)MMP-9 mRNA的表達(dá)，增加MMP-9的合成并促進(jìn)其分泌，因此，CHD病人血清MMP-9與Hcy濃度呈正比。本文研究結(jié)果與其相符。

根據(jù)ROC曲線分析，當(dāng)AUCROC>0.9時(shí)對(duì)疾病的診斷具有較高的準(zhǔn)確度。本文的研究結(jié)果顯示，AMI和UAP病人血清MMP-9和Hcy濃度的AUCROC分別為0.996、0.981和0.940、0.914，均具有較高的靈敏度和特異度，但UAP較AMI病人低。SAP病人AUCROC分別為0.531和0.661，提示血清MMP-9和Hcy濃度對(duì)SAP無(wú)診斷價(jià)值，這可能與SAP病人的AS斑塊較穩(wěn)定有關(guān)。血清MMP-9和Hcy濃度變化對(duì)AMI、UAP具有較高的診斷價(jià)值，其升高程度可用于判斷CHD病情的嚴(yán)重程度，因此，檢測(cè)血清MMP-9和Hcy對(duì)CHD的診斷、危險(xiǎn)分層及預(yù)后預(yù)測(cè)具有重要意義。

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