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    MMP-2、MMP-9在胃癌中表達(dá)的相關(guān)性及其與胃癌生物學(xué)行為的關(guān)系

    2013-12-20 02:15:31龔光偉李勝文鄭威強(qiáng)
    實(shí)用癌癥雜志 2013年4期
    關(guān)鍵詞:蛋白酶陽(yáng)性率胃癌

    趙 丹 龔光偉 李勝文 楊 坤 鄭威強(qiáng) 魏 俊

    胃癌是我國(guó)較常見(jiàn)惡性消化道腫瘤之一,浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移是影響胃癌患者預(yù)后的關(guān)鍵因素?;|(zhì)金屬蛋白酶 ( matrix metalloproteinases,MMPs)家族中的基質(zhì)金屬蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)和基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)與腫瘤的浸潤(rùn)與轉(zhuǎn)移的關(guān)系最為密切。本研究采用免疫組化SP法檢測(cè)胃癌組織與正常胃黏膜組織中MMP-2和MMP-9的表達(dá)情況,探討MMP-2和MMP-9的表達(dá)與胃癌生物學(xué)行為之間的關(guān)系及其兩者在胃癌組織中表達(dá)的相關(guān)性。

    1 材料與方法

    1.1 一般資料

    收集本院2009年9月-2012年9月手術(shù)切除的經(jīng)病理明確診斷為胃腺癌標(biāo)本65例,其中男性49例,女性16例,年齡35~78歲,平均年齡58.3歲。組織學(xué)分型:高分化癌7例,中分化癌11例,低/未分化癌47例;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者48例,無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者17例。TNM分期:Ⅰ期8例,Ⅱ期13例,Ⅲ期32例,Ⅳ期12例。另取胃潰瘍或十二指腸潰瘍手術(shù)切除標(biāo)本中的正常胃黏膜組織20例作對(duì)照,并經(jīng)病理明確診斷證實(shí)且排除重度不典型增生,其中男性16例,女性4例,年齡42~79歲,平均年齡57.6歲。所有患者術(shù)前均未使用非甾體抗炎藥物及無(wú)放、化療治療史,且有完整的臨床和病理資料。

    1.2 方法

    1.2.1 試劑來(lái)源 采用免疫組化(SP)染色法,即用型兔抗人MMP-2單克隆抗體和MMP-9單克隆抗體,購(gòu)自SantaCruz公司。S-P試劑盒及DAB顯色試劑盒均購(gòu)自上海生研生化試劑有限公司,并以該公司提供的標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性切片作為陽(yáng)性對(duì)照。PBS代替一抗作為陰性對(duì)照,操作步驟嚴(yán)格按照SP免疫組化試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

    1.2.2 結(jié)果判定 MMP-2和MMP-9陽(yáng)性表達(dá)主要位于細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì),為棕黃色或棕褐色顆粒狀著色。高倍鏡下(×400)隨機(jī)選擇5個(gè)視野,計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞占視野總細(xì)胞數(shù)的百分比,取平均值。MMP-2和MMP-9陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)<25%為陰性表達(dá),≥25%為陽(yáng)性表達(dá)。染色結(jié)果由2名有經(jīng)驗(yàn)的病理科醫(yī)師根據(jù)雙盲原則進(jìn)行評(píng)定。

    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    所有數(shù)據(jù)均采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。采用χ2檢驗(yàn)及Fisher精確概率法統(tǒng)計(jì)MMP-2和MMP-9與不同臨床病理特征的差異性比較和兩者表達(dá)的相關(guān)性分析,檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

    2 結(jié)果

    2.1 胃組織中MMP-2和MMP-9的表達(dá)

    胃癌組織中的MMP-2、MMP-9陽(yáng)性率分別為67.7%(44/65)、72.3%(47/65),均高于其在正常胃組織中的陽(yáng)性率15.0%(3/20)、25.0%(5/20),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=17.178、14.411,P均<0.001)。

    2.2 MMP-2和MMP-9表達(dá)與胃癌臨床病理學(xué)特征的關(guān)系

    MMP-2、MMP-9的陽(yáng)性率與患者年齡、性別、腫瘤大小無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05),而與腫瘤的浸潤(rùn)深度、組織學(xué)分化程度、胃癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期有顯著相關(guān)性(P<0.05),見(jiàn)表1。

    表1 MMP-2、MMP-9表達(dá)與胃癌臨床病理學(xué)特征的關(guān)系

    2.3 胃癌組織中MMP-2和MMP-9表達(dá)的相關(guān)性

    相關(guān)性分析表明胃癌組織中的MMP-2和MMP-9表達(dá)具有相關(guān)性,且呈正相關(guān)(P<0.001,γ=0.599),見(jiàn)表2。

    表2 胃癌組織中MMP-2和MMP-9表達(dá)的相關(guān)性

    3 討論

    近年來(lái)國(guó)內(nèi)外許多學(xué)者做了大量有關(guān)人類腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移與MMPs表達(dá)之間的關(guān)系的研究,研究證實(shí)了在神經(jīng)膠質(zhì)瘤、食管癌、胃癌、乳腺癌、宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌、喉癌等多種惡性腫瘤中均有MMP-2和MMP-9表達(dá),且與臨床分期、病理組織學(xué)分級(jí)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等有關(guān)[1-7]。

    本實(shí)驗(yàn)也證實(shí)了MMP-2和MMP-9在胃癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為67.7%(44/65)和72.3%(47/65),明顯高于在正常胃黏膜組織中的陽(yáng)性表達(dá)率15%(3/20)和25%(5/20),二者的差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=17.178,14.411;P均<0.001)。且MMP-2和MMP-9的陽(yáng)性率與患者年齡、性別、腫瘤大小無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05),而與腫瘤的浸潤(rùn)深度、組織學(xué)分化程度、胃癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期有顯著相關(guān)性(P<0.05)。隨著腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)深度,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及TNM分期的增加,兩者的表達(dá)陽(yáng)性率也明顯升高,但組織學(xué)分化程度越低,兩者陽(yáng)性表達(dá)率越高。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果都與上述學(xué)者的研究結(jié)果相符合。雖然MMP-2及MMP-9被不少實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)了與腫瘤的發(fā)生、侵襲、轉(zhuǎn)移密切相關(guān),但它們之間的具體作用機(jī)制及相互調(diào)控關(guān)系仍未完全明了,有待我們進(jìn)一步研究探討。Lekstan等研究證明在胰腺癌中MMP-2和MMP-9具有高陽(yáng)性率,且兩者表達(dá)高度一致性,共同作用使胰腺癌具有高侵襲性[8]。Hu等認(rèn)為MMP-2和MMP-9的協(xié)同作用增加了肺癌轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)[9]。本次實(shí)驗(yàn)也證實(shí)了MMP-2和MMP-9 在胃癌組織中的表達(dá)具有正相關(guān)性,這與上述學(xué)者的報(bào)道結(jié)果相符。

    這些結(jié)果提示在胃癌浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移的過(guò)程中MMP-2和MMP-9兩者可能存在著協(xié)同作用,共同影響著胃癌相關(guān)的生物學(xué)行為及胃癌患者的預(yù)后。 綜上所述,在胃癌組織中MMP-2 和MMP-9的陽(yáng)性率顯著增高,且兩者表達(dá)呈正相關(guān),推斷其可能在胃癌的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中起重要作用。臨床上對(duì)MMP-2 和MMP-9的檢測(cè)具有預(yù)后價(jià)值。

    [1] Liu L,Zhang M,Wang Y,et al.The relationship between the expression of tumor matrix-metalloproteinase and the characteristics of magnetic resonance imaging of human gliomas〔J〕.J Biomed Res,2010,24(2):124.

    [2] 張軍祥,劉章鎖,王建軍.ANGPTL3和MMP-2、MMP-9在食管鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義〔J〕.腫瘤防治研究,2011,38(9):1028.

    [3] 崔若凡,張寶剛,姬 靜,等.ARK5、MMP-2和MMP-9在胃癌中的表達(dá)及與侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系〔J〕.實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2012,28(7):1073.

    [4] 劉玲莉,朱德茂.乳腺癌組織中MMP-2、MMP-9表達(dá)與其預(yù)后的相關(guān)性〔J〕.實(shí)用癌癥雜志,2010,25(3):300.

    [5] 王 玲,韓麗英,王 強(qiáng),等.RECK基因在宮頸癌中的表達(dá)及與MMP-2、MMP-9和MVD 的關(guān)系〔J〕.中國(guó)婦產(chǎn)科臨床雜志,2010,11(5):361.

    [6] Puljiz M,Puljiz Z,Vucemilo T,et al.Prognostic significance of matrix metalloproteinases 2 and 9 in endometrial cancer〔J〕.Coll Antropol,2012,36(4):1367.

    [7] 湯夏冰,沈曉輝,錢(qián)曉云,等.高遷移率族蛋白B1和基質(zhì)金屬蛋白酶-2、9在喉癌組織中的表達(dá)及其與預(yù)后的關(guān)系〔J〕.臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志,2013,27(4):181.

    [8] Lekstan A,Lampe P,Lewin-Kowalik J,et al.Concentrations and activities of metalloproteinases 2 and 9 and their inhibitors (TIMPS) in chronic pancreatitis and pancreatic adenocarcinoma〔J〕.J Physiol Pharmacol,2012,63(6):589.

    [9] Hu C,Wang J,Xu Y,et al.Current evidence on the relationship between five polymorphisms in the matrix metalloproteinases (MMP) gene and lung cancer risk: a meta-analysis〔J〕.Gene,2013,517(1):65.

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