抗體滴度幾何平均值分析在監(jiān)測(cè)動(dòng)物群體免疫效果中的應(yīng)用

李 毅

（四川省達(dá)州市通川區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 達(dá)州 635000）

動(dòng)物群體免疫抗體水平監(jiān)測(cè)是動(dòng)物防疫工作體系中的一個(gè)重要組成部分，可以有效評(píng)價(jià)動(dòng)物群體免疫效果、提高免疫質(zhì)量、建立免疫抗體屏障、消除疫情隱患。目前很多中小規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)在開(kāi)展抗體監(jiān)測(cè)及分析時(shí)，對(duì)結(jié)果分析只停留在動(dòng)物群體合格率是否達(dá)到70%的層次上，單用免疫抗體合格率這一個(gè)指標(biāo)來(lái)考量規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)的抗體水平存在一定的片面性，無(wú)法跟上產(chǎn)業(yè)發(fā)展形勢(shì)。因此，用免疫抗體滴度平均值分析技術(shù)評(píng)價(jià)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)的免疫質(zhì)量、監(jiān)測(cè)抗體水平，更具科學(xué)性和指導(dǎo)性。

1 材料與方法

1.1 材料 為了評(píng)估本地某中型規(guī)模豬場(chǎng)豬瘟疫苗的免疫效果，我們?cè)?012年5月和10月分別采集了2批血清樣品，根據(jù)農(nóng)業(yè)部2007年印發(fā)的《豬瘟防治技術(shù)規(guī)范》，用正向間接血凝試驗(yàn)進(jìn)行抗體水平檢測(cè)，結(jié)果以1∶2、1∶4、1∶8、1∶x 滴度表示。如表 1、表 2 所示。

1.2 方法

1.2.1 抗體滴度平均值及區(qū)間估計(jì) 本文計(jì)算采用編碼滴度法。通常情況下，血清抗體滴度成偏態(tài)分布，只有在經(jīng)過(guò)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后才能按正態(tài)分布的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行檢驗(yàn)。所以計(jì)算時(shí)可以轉(zhuǎn)換為以2為底的對(duì)數(shù)值（編碼滴度），然后以此計(jì)算幾何平均值。所用公式如下：

編碼滴度算術(shù)平均數(shù)：μa=∑fx/∑f

表1 某規(guī)模場(chǎng)5月采集的血清樣品

表2 某規(guī)模場(chǎng)10月采集的血清樣品

對(duì)數(shù)幾何平均數(shù)滴度：μb=μa×log2

幾何平均滴度：[GMT（X）]=lg-1μb×C

編碼滴度方差：S2=（∑fx2-（∑fx）2/n）/（n-1）

幾何平均滴度標(biāo)準(zhǔn)誤：Sx′=lg-1（Sx×log2）

幾何平均滴度 95%可信限：（（μb-1.96×Sx）×C，（μb+1.96×Sx）×C），C 表示稀釋倍數(shù)。

1.2.2 兩批樣本群抗體滴度比較 隨機(jī)抽取的兩批血清樣本，比較抗體差別時(shí)常用t檢驗(yàn)或x2檢驗(yàn)。本文采用t檢驗(yàn)。計(jì)算公式如下：

合并標(biāo)準(zhǔn)差：Sc2=∑fx2-（∑fx）2/∑f

其中，S（μ1-μ2）表示兩個(gè)樣本平均數(shù)差異的標(biāo)準(zhǔn)誤，μ表示編碼滴度算術(shù)平均數(shù)，n表示樣本容量。

2 結(jié)果與分析

2.1 計(jì)算結(jié)果 計(jì)算結(jié)果如表3所示。

2.2 分析 經(jīng)t檢驗(yàn)計(jì)算，t值為1.125 4，自由度為162，查表得出P>0.05。表明兩批血清樣本的抗體滴度幾何平均值無(wú)顯著性差異。兩批血清樣品的編碼滴度變異系數(shù)分別為21.66%和22.22%，說(shuō)明兩批血清樣品的抗體滴度值的離散程度相近。

根據(jù)《豬瘟防治技術(shù)規(guī)范》，豬瘟抗體正向間接血凝試驗(yàn)效價(jià)大于或等于1∶32時(shí)判定為合格，該豬場(chǎng)兩批血清的抗體合格率分別為80.3%和74.7%。從百分率上看10月份有所下降，但結(jié)合抗體滴度幾何平均值分析，在抽樣設(shè)計(jì)科學(xué)合理的前提下，二者并無(wú)顯著性差異。

表3 兩批血清樣品的計(jì)算結(jié)果

3 討論

3.1 目前規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)對(duì)豬瘟、O型口蹄疫、高致病性禽流感等重大動(dòng)物疫病疫苗免疫抗體效果的監(jiān)測(cè)，主要是以農(nóng)業(yè)部2007年頒布的相關(guān)防治技術(shù)規(guī)范為依據(jù)，正向間接血凝試驗(yàn)和血凝抑制試驗(yàn)的檢測(cè)結(jié)果均是以1∶x的抗體滴度表示。監(jiān)測(cè)指標(biāo)主要是免疫抗體合格率，以其是否達(dá)到70%為評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)。在此基礎(chǔ)上，本文計(jì)算了規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)動(dòng)物群體免疫抗體滴度的幾何平均值，并進(jìn)行了95%置信度區(qū)間估計(jì)及兩獨(dú)立樣本群的t檢驗(yàn)，多方面分析了該場(chǎng)的群體抗體水平。

3.2 通過(guò)抗體滴度幾何平均值計(jì)算及比較，能幫助分析抗體水平隨時(shí)間、空間變化的消長(zhǎng)趨勢(shì)，評(píng)價(jià)免疫程序科學(xué)性，規(guī)范免疫操作，研究飼養(yǎng)管理等外部條件對(duì)免疫效果的影響等。通過(guò)對(duì)某一動(dòng)物群體不同時(shí)刻或不同群體同一時(shí)刻的血清抗體水平進(jìn)行比較，能夠減少單一評(píng)判指標(biāo)對(duì)分析結(jié)果的不利影響，有利于開(kāi)展疫苗免疫查漏補(bǔ)缺工作，制訂出更加科學(xué)合理的免疫程序。

3.3 如果對(duì)規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)動(dòng)物群體長(zhǎng)期開(kāi)展血清抗體監(jiān)測(cè)，記錄其抗體滴度幾何平均值，一段時(shí)間以后，就可以確定一個(gè)規(guī)模場(chǎng)或地區(qū)的“正?！被蝾A(yù)期抗體水平，從而初步確立一條抗體水平監(jiān)測(cè)基線。長(zhǎng)期有規(guī)律地監(jiān)測(cè)并分析檢測(cè)數(shù)據(jù)的變化趨勢(shì)，有助于提高規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)的管理水平和生物安全水平，不斷改進(jìn)防疫工作措施。

3.4 當(dāng)然，免疫監(jiān)測(cè)工作的高質(zhì)量與科學(xué)合理的抽樣設(shè)計(jì)是分不開(kāi)的，抗體滴度幾何平均值能夠真實(shí)反映動(dòng)物群體抗體水平的前提是樣品具有真實(shí)性、代表性。因此，確保抽樣設(shè)計(jì)的科學(xué)合理是統(tǒng)計(jì)分析成功的先決條件。綜上所述，規(guī)模場(chǎng)開(kāi)展動(dòng)物群體抗體滴度幾何平均值分析，對(duì)于動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)和流行病學(xué)調(diào)查，提高規(guī)模場(chǎng)管理水平等具有積極的意義。

[1]黃保續(xù).獸醫(yī)流行病學(xué)[M].1版.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2010：249-252.

[2]范書(shū)才，李 虹，史大慶，等.鴨瘟滅活疫苗效力試驗(yàn)和安全試驗(yàn)[J].中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2009，31（7）：553-556.