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    P53、P57和Ki-67在絨毛水腫及水泡狀胎塊中的表達(dá)及意義

    2013-12-10 09:03:30李軍紅程蔚蔚
    食管疾病 2013年3期
    關(guān)鍵詞:完全性水泡絨毛

    李軍紅,程蔚蔚

    水泡狀胎塊以滋養(yǎng)葉細(xì)胞增生和胎盤絨毛過度生長為特征,可分為完全性水泡狀胎塊和部分性水泡狀胎塊。不同類型的水泡狀胎塊治療和預(yù)后不同,以往主要靠組織學(xué)進(jìn)行鑒別診斷。近年來,隨著超聲技術(shù)的發(fā)展,使得發(fā)現(xiàn)和懷疑水泡狀胎塊的時間不斷提前,但由于早期水泡狀胎塊的組織學(xué)特征并不典型,與流產(chǎn)的水腫絨毛鑒別診斷也有困難,這就要求找一些標(biāo)志物以輔助診斷[1]。近年來有一些文獻(xiàn)報道P53、P57及Ki-67在不同的胎盤絨毛水腫性病變中有鑒別診斷的價值,但結(jié)果不甚一致。本組應(yīng)用免疫組化EnVision方法檢測15例流產(chǎn)水腫絨毛、20例部分性水泡狀胎塊及23例完全性水泡狀胎塊中Ki-67、P53、P57蛋白的表達(dá)情況,以探討和總結(jié)其在臨床病理診斷中的價值。

    1 材料與方法

    1.1臨床資料收集洛陽市中心醫(yī)院病理科2002~2012年臨床及病理形態(tài)學(xué)上明確診斷為流產(chǎn)水腫絨毛、部分性水泡狀胎塊、完全性水泡狀胎塊各18、23、20例。所選標(biāo)本均經(jīng)10%中性緩沖福爾馬林固定,石蠟包埋,4 μm連續(xù)切片,用于HE和免疫組化染色。

    1.2方法應(yīng)用免疫組化EnVision方法檢測P53(克隆號SP5)、P57(克隆號57P06)、Ki-67(克隆號MIB-1)鼠抗人單克隆抗體,操作按說明步驟進(jìn)行,設(shè)陰性及陽性對照。所有抗體及其試劑盒均購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司。

    1.3免疫組化結(jié)果判定由兩位高年資病理醫(yī)師進(jìn)行交叉雙盲判定。P53陽性均定位于胞核,胞核明確的棕黃色顆粒判定為陽性,選取200個細(xì)胞滋養(yǎng)葉細(xì)胞觀察,≥5%的P53細(xì)胞核著色判為陽性,否則為陰性;P57判讀參照Kale[2]等報道的方法:P57陽性均定位于胞核,在1張切片中若絨毛間質(zhì)細(xì)胞和細(xì)胞滋養(yǎng)葉細(xì)胞著色,陽性細(xì)胞數(shù)>30%左右即判定為陽性;絨毛間質(zhì)細(xì)胞和細(xì)胞滋養(yǎng)葉細(xì)胞不著色或散在著色,陽性細(xì)胞數(shù)小于總數(shù)的30%判斷為陰性。Ki-67陽性定位于細(xì)胞核,選取200個細(xì)胞滋養(yǎng)葉細(xì)胞觀察,Ki-67PI為陽性細(xì)胞數(shù)/計數(shù)細(xì)胞總數(shù)×100%。

    1.4統(tǒng)計學(xué)處理用SPSS 11.5統(tǒng)計軟件包作統(tǒng)計學(xué)處理 ,數(shù)據(jù)采用方差分析,q檢驗和χ2檢驗,檢驗水平均定在α=0.05水平。

    2 結(jié)果

    18例流產(chǎn)水腫絨毛、23例部分性水泡狀胎塊及20例完全性水泡狀胎塊中Ki-67、P53、P57蛋白的表達(dá)結(jié)果見表1。在流產(chǎn)水腫絨毛、部分性水泡狀胎塊、完全性水泡狀胎塊的細(xì)胞滋養(yǎng)液細(xì)胞中,P53的表達(dá)分別為1/18(5.6%)、14/23(60.9%)、16/20(80.0%), 部分性水泡狀胎塊組和完全性水泡狀胎塊組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),而部分性水泡狀胎塊和完全性水泡狀胎塊組與流產(chǎn)水腫絨毛組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);P57的表達(dá)分別為18/18(100.0%)、32/23(100.0%)、0(0%),完全性水泡狀胎塊組的陽性表達(dá)率顯著低于流產(chǎn)水腫絨毛和部分性水泡狀胎塊組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05), 流產(chǎn)水腫絨毛和部分性水泡狀胎塊組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);Ki-67 PI的表達(dá)分別為(11.0±6.3)%、(57.2±10.8)%、(63.2±16.8)%,完全性水泡狀胎塊組和部分性水泡狀胎塊組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),而完全性水泡狀胎塊和部分性水泡狀胎塊組與水腫流產(chǎn)絨毛組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

    表1 Ki-67、P53、P57在流產(chǎn)水腫絨毛、部分性水泡狀胎塊及完全性水泡狀胎塊中的表達(dá) 例(%)

    3 討論

    P53基因產(chǎn)物是一種核蛋白,它被認(rèn)為能參與細(xì)胞周期、凋亡和維持基因組穩(wěn)定性的調(diào)控。其突變性P53蛋白不但失去了對細(xì)胞增殖和分化的負(fù)調(diào)節(jié)作用,還能正向激活某些促生長基因的表達(dá),促進(jìn)細(xì)胞增殖,導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。本組結(jié)果顯示,P53蛋白在流產(chǎn)性絨毛中弱表達(dá)(5.6%),在部分性水泡狀胎塊和完全性水泡狀胎塊中的表達(dá)率分別為60.9%和80.0%。提示P53在水腫絨毛組織與水泡狀胎塊中的表達(dá)有顯著差異,與文獻(xiàn)[3]報道的結(jié)果一致。由此提示水泡狀胎塊中可能存在P53抑癌基因的突變,結(jié)果同時表明P53蛋白的檢測有助于鑒別診斷水腫流產(chǎn)的絨毛和水泡狀胎塊。

    P57蛋白是細(xì)胞周期負(fù)性調(diào)控因子,屬于CIP/KIP家族,參與細(xì)胞周期調(diào)控、促進(jìn)凋亡、誘導(dǎo)分化。目前在多種腫瘤中發(fā)現(xiàn)P57印記缺失或印記錯誤,導(dǎo)致基因表達(dá)下降[4],表明P57的表達(dá)缺失可能促進(jìn)了腫瘤的增殖。本組研究顯示P57在流產(chǎn)水腫絨毛組和部分性水泡狀胎塊組中的表達(dá)率為100.0%,在完全性水泡狀胎塊組中的無表達(dá)。提示P57在流產(chǎn)水腫絨毛組和部分性水泡狀胎塊組與完全性水泡狀胎塊組中的表達(dá)有顯著差異,支持一些學(xué)者的觀點(diǎn)[5]∶P57標(biāo)記可以被應(yīng)用于形態(tài)上難以客觀區(qū)別的部分性水泡狀胎塊和完全性水泡狀胎塊的鑒別。

    Ki-67表達(dá)在所有活動的細(xì)胞周期(G1、S、G2和有絲分裂期)中,而在G0期不表達(dá)。Ki-67 PI高低與許多腫瘤的分化程度、浸潤轉(zhuǎn)移以及預(yù)后密切相關(guān)。本組研究顯示Ki-67 PI在水泡狀胎塊組和流產(chǎn)水腫絨毛組間表達(dá)有顯著差異,結(jié)果表明Ki-67 PI可較為準(zhǔn)確地反映水泡狀胎細(xì)胞滋養(yǎng)液細(xì)胞的增生活性,可作為評估病變是水泡狀胎塊或是流產(chǎn)水腫絨毛的重要參考指標(biāo)[6]。值得注意的是Ki-67只計數(shù)圍繞腫脹絨毛的細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞的Ki-67陽性細(xì)胞,然后計算出Ki-67 PI,不應(yīng)包括絨毛外細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞以及合體滋養(yǎng)細(xì)胞,與盧先軍等[7]報道的方法一致,提示其在應(yīng)用中評估的方法也很關(guān)鍵。

    總之,在完全性水泡狀胎塊、部分性水泡狀胎塊和流產(chǎn)水腫絨毛從形態(tài)上不易鑒別時,P53、P57、Ki-67免疫組化指標(biāo)可作為進(jìn)一步診斷的依據(jù),具有較高的靈敏性和特異性。

    參考文獻(xiàn):

    [1]劉從容,惠培.葡萄胎的分子診斷[J].中華病理學(xué)雜志,2011,40(1):6-10.

    [2]Kale A,S?ylemez F,Ensari A.Expressions of proliferation markers (Ki-67,proliferating cell nucler antigen,and silverstaining nucleolar organizer regions)and of P53 tumor protein in gestational trophoblastic disease[J].Am J Obstet Gynecol,2001,184(4):567-574.

    [3]Chen Y,Shen D,Gu Y,et al.The diagnostic value of Ki-67,P53 and P63 in distinguishing partial Hydatidiform mole from hydropic abortion [J].Wien Klin Wochenschr,2012,124(5-6):184-187.

    [4]Popiolek D A,Yee H,Mittal K,et al.Multiplex shorttandem repeat DNA analysis confirms the accuracy of P57 immunostaining in the diagnosis of complete hydatidiform model[J].Hum Pathol,2006,37(11):1426-1434.

    [5]Landolsi H,Missaoui N,Brahem S,et al.The usefulness of P57(KIP2)immunohistochemical staining and genotyping test in the diagnosis of the hydatidiform mole[J].Pathol Res Pract,2011,207(80):498-504.

    [6]柯儒斌,徐潮,黃炎,等. Ki-67、P53和P57在水泡狀胎塊中的表達(dá)及意義[J].實用醫(yī)學(xué)雜志,2012,28(21):3584-3586.

    [7]盧先軍,姜冰,栗占三. Ki-67和P53在水泡狀胎塊中的表達(dá)及意義[J].醫(yī)學(xué)臨床研究,2010,27(10):1886-1888.

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