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    電化學發(fā)光法檢測抗CCP抗體在RA診斷中的性能評價

    2013-12-05 02:57:30沈玉琴許聯(lián)紅高志洪
    中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用 2013年24期
    關(guān)鍵詞:瓜氨酸風濕病特異性

    沈玉琴 許聯(lián)紅 高志洪

    類風濕關(guān)節(jié)炎(RA)是一種以慢性破壞性關(guān)節(jié)病變?yōu)樘卣鞯娜硇宰陨砻庖卟 >哂懈甙l(fā)性、高致殘性等特點, 早期診斷和治療是減少和阻止病情發(fā)展及防止致殘的關(guān)鍵。RA的發(fā)病機制仍未明確, 近年的研究表明瓜氨酸化現(xiàn)象可能與RA的發(fā)病相關(guān)[1,2]。在1987年美國風濕病協(xié)會(ARA)RA的診斷標準中, 檢測血清IgM類RF是唯一的實驗室指標,但RF在疾病早期常呈陰性, 不能預測早期患者。為實現(xiàn)對RA的早期診斷, 2009年美國風濕病學學會和歐洲抗風濕病聯(lián)盟(ACR/EULAR)共同提出了新的RA分類標準, 將抗環(huán)瓜氨酸肽抗體(anti-cyclic citrullinated peptide antibodies, anti-CCP)和RF共同作為RA的血清學評分標準[3]。本文通過全自動電化學發(fā)光法檢測抗CCP抗體, 并評價其對RA的診斷效能和臨床意義。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 RA組:選取江蘇大學附屬武進醫(yī)院2011年11~2013年6月風濕免疫科住院類風濕關(guān)節(jié)炎患者144例,男 /女 :32/112, 年齡 (24~87)歲 , 平均為 (56.3±13.5)歲 , 均符合2009年美國風濕病學學會和歐洲抗風濕病聯(lián)盟(ACR/EULAR)修訂的RA分類標準。非RA的其他風濕病組(非RA組):為本院同期風濕免疫科住院患者81例, 男/女:17/64, 年齡(22~83)歲, 平均為(55.6±15)歲。包括骨關(guān)節(jié)炎(OA)34例, 系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)11例, 干燥綜合征(SS)12例,強直性脊柱炎(AS)15例, 反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎(ReA)9例。RA組和非RA組間年齡、性別差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

    1.2 研究方法 采用電化學發(fā)光儀(Cobas E601, 德國)測定抗CCP抗體, <7 U/ml的結(jié)果記為7 U/ml, >500 U/ml的記為500 U/ml, 抗CCP抗體>17 U/ml定為陽性臨界值。特定蛋白分析儀(BNP,德國)免疫透射比濁法測定RF, RF<9.56 IU/ml的記為9.56 IU/ml, 以RF>15 IU/ml定為陽性。

    1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS17.0進行統(tǒng)計分析, 抗CCP抗體、RF血清水平測定結(jié)果用(±s)表示, 濃度比較采用秩和檢驗, 計數(shù)資料采用配對卡方檢驗。使用MedCalc軟件進行ROC曲線分析比較。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義??笴CP抗體與ESR、CRP及RF的相關(guān)性采用SPSS17.0的相關(guān)性分析。

    2 結(jié)果

    2.1 兩組間血清抗CCP 抗體和RF血清水平 RA組血清抗CCP抗體水平和陽性檢出率明顯高于非RA組(P<0.001);兩組間RF水平和陽性率差異有統(tǒng)計學意義(P<0.001), 見表1。

    2.2 血清抗CCP抗體和RF的ROC曲線分析 依據(jù)是否診斷為RA作為狀態(tài)變量, 血清RF和抗CCP抗體檢測結(jié)果繪制ROC曲線, 見圖1??笴CP抗體的AUC與RF差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)??笴CP抗體檢測敏感性為94.4%高于RF的89.6%, 但無統(tǒng)計學意義;抗CCP抗體檢測特異性為97.5%明顯高于RF的88.9%(P<0.05), 見表2。

    圖1 抗CCP 抗體和RF 的ROC 曲線比較

    表1 兩組間血清抗CCP 抗體和RF血清水平比較( ±s)

    表1 兩組間血清抗CCP 抗體和RF血清水平比較( ±s)

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    表2 血清抗CCP抗體和RF濃度檢測的AUC、敏感度和特異度比較

    2.3 抗CCP抗體濃度與ESR和CRP的相關(guān)性 抗CCP抗體濃度和RF濃度, 及與RA活動度相關(guān)的血清學指標ESR和CRP水平均無相關(guān)性(P>0.05), 見表3。

    表3 抗CCP 抗體濃度與ESR、CRP及RF的相關(guān)性

    3 討論

    RF是一種以變性IgG為靶抗原的自身抗體, 主要存在于RA患者的血清和關(guān)節(jié)液中, 是最早應(yīng)用于RF診斷的檢測指標, 但在其他結(jié)締組織疾病、慢性感染性疾病、腫瘤及正常老年人群也可出現(xiàn)RF升高, 甚至正常人中也有一定的陽性率, 故特異性較差??笴CP抗體是環(huán)狀聚絲蛋白的多肽片段, 以IgG型為主。2000年Schellekens等[4]首先報道了用ELISA法檢測抗瓜氨酸抗體, 該方法采用針對環(huán)狀瓜氨酸而非自然條件下的線狀瓜氨酸為抗原 故將檢測出的抗體稱之為抗環(huán)瓜氨酸抗體(anti-cyclic citrullinated peptide antibodies,抗CCP抗體), 近年來抗CCP抗體才被廣泛應(yīng)用[5]。

    本研究發(fā)現(xiàn)RF在RA組中陽性率為88.9%, 非RA組中陽性率為11.1%, 在系統(tǒng)性紅斑狼瘡、干燥綜合癥、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎及骨關(guān)節(jié)炎中均存在RF陽性。抗CCP抗體在RA組和非RA組中的陽性率分別為93.1%和2.5%, 僅系統(tǒng)性紅斑狼瘡中存在2例陽性。

    ROC曲線分析結(jié)果顯示, 抗CCP抗體的AUC為0.956與RF(0.930)差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。當抗CCP抗體以11.34 U/ml,RF以>13.8 IU/ml為最佳cut-off 值時, 抗CCP抗體檢測敏感性為94.4%高于RF的89.6%, 但無統(tǒng)計學意義;抗CCP抗體檢測特異性為97.5%明顯高于RF的88.9%(P<0.05)。抗CCP抗體的高特異性對于RF陰性的RA患者有非常高的診斷價值。另外, 本文未發(fā)現(xiàn)抗CCP抗體與RF血清水平存在相關(guān)性。分析抗CCP抗體與RA活動度相關(guān)的血清學指標ESR和CRP水平均無明顯相關(guān)性, 與Munevver S等報道的結(jié)果相一致。

    本實驗室采用的電化學發(fā)光法檢測抗CCP抗體具有較高的敏感性和特異性, 結(jié)果穩(wěn)定可靠, 自動化程度高, 可用于臨床常規(guī)檢測, 可提高RA早期診斷的準確性。

    [1]Klareskog L, Widhe M, Hermansson M, et al.Antibodies to citrullinated proteins in arthritis: pathology and promise.Curr Opin Rheumatol, 2008(20): 300-305.

    [2]Suzuki A, Yamada R, Yamamoto K.Citrullination by peptidylarginine deiminase in rheumatoid arthritis.Ann N Y Acad Sci, 2007(1108):323-339.

    [3]Polido PJ, Vieira SE, Fonseca JE.Rheumatoid arthritis: what is refractory disease and how to manage it .Autoimmun Rev, 2011,10(11): 707-713.

    [4]Schellekens GA, Visser H, de Jong BA, et al.The diagnostic properties of rheumatoid arthritis recognizing a cyclic citrullinated peptide.Arthritis Rheum, 2000(43): 155-163.

    [5]Cho SY, Kang SY, Lee HJ, et al.A comparative evaluation of the diagnostic value of anti- cyclic citrullinated peptide and rheumatoid factor in rheumatoid arthritis.Korean J Lab Med, 2008, 28 (1): 39-45.

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