阿司匹林和游離水楊酸高效液相色譜檢定新方法的研究

游秋屏 馬遜娜

結(jié)合阿司匹林在醫(yī)療領(lǐng)域內(nèi)廣泛使用的現(xiàn)狀, 加強(qiáng)對(duì)該藥物和其內(nèi)部制劑的質(zhì)量檢定十分關(guān)鍵。游離水楊酸是一種帶有微弱毒性的物質(zhì), 其在阿司匹林內(nèi)的含量多少直接關(guān)系到藥品的質(zhì)量［1］。傳統(tǒng)的檢定阿司匹林內(nèi)游離水楊酸的方法是比色法, 但受到個(gè)人視力限制該方法容易導(dǎo)致誤差, 因此,本文對(duì)阿司匹林和游離水楊酸進(jìn)行新型檢定方法的探索, 相關(guān)報(bào)告整理如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器設(shè)備 紫外分光光度計(jì)型號(hào)為UV-1800, 產(chǎn)自島津公司；高效液相分析儀產(chǎn)自島津公司, 泵型號(hào)為L(zhǎng)C-10ATVP, 以Kromasil C18柱為色譜柱, 外形為250×4.6 mm,5 μm。

1.1.2 試劑 對(duì)照品均產(chǎn)自山東某公司, 標(biāo)定含量均超過99.5%。檢測(cè)用水為超純水, 色譜純?yōu)榧状? 其余均為分析純,均由天津某公司生產(chǎn)。

1.2 方法 阿司匹林及游離水楊酸的檢測(cè)步驟類似, 均包括標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制、精密度試驗(yàn)與回收率試驗(yàn)。其中標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制主要步驟為：配置不同濃度的檢測(cè)試劑, 各取20 μl注入高效液相分析儀, 進(jìn)行測(cè)試, 計(jì)算峰面積, 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；精密度試驗(yàn)的主要步驟為：取三種不同濃度溶液(阿司匹林取 64.8 μg/ml、81.0 μg/ml和 92.7 μg/ml, 游離水楊酸取 648 ng/ml、810 ng/ml、972 ng/ml), 行含量測(cè)試, 各進(jìn)樣7次。計(jì)算RSD?；厥章试囼?yàn)的主要步驟為：取同樣濃度的藥物對(duì)照溶液, 行高效液相色譜分析, 計(jì)算回收率。

2 結(jié)果

物質(zhì)回收率和試驗(yàn)精密度結(jié)果見表1。

表1 新色譜檢定方法中阿司匹林和游離水楊酸的物質(zhì)回收率和試驗(yàn)精密度

3 結(jié)論

在進(jìn)行高效液相色譜法檢定時(shí), 檢驗(yàn)人員需要從以下幾個(gè)方面著手, 確保各項(xiàng)數(shù)據(jù)和溶液量的精確, 減少人為因素導(dǎo)致的鑒定結(jié)果誤差。

①適用于新型檢定方法的色譜條件以及內(nèi)標(biāo)物 將阿司匹林、游離水楊酸以及安息香酸制成溶液, 用紫外分光光度儀對(duì)這三種溶液進(jìn)行光譜特征掃描。將安息香酸和甲基腈制成濃度為50%的溶液［2］。色譜檢定條件中Methanol與水和冰醋酸的比例、流速、色譜檢測(cè)波長(zhǎng)都需要試驗(yàn)人員根據(jù)檢定要求進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整, 其中阿司匹林的色譜檢測(cè)波長(zhǎng)和游離水楊酸的色譜檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)定需要有所差別, 前者以250 nm為宜, 后者以300 nm為宜。②阿司匹林標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算分析 在進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算前, 試驗(yàn)人員需要制出阿司匹林對(duì)照品液, 確保不同濃度的阿司匹林溶液濃度的精確性, 降低試驗(yàn)誤差［2］。阿司匹林主峰面積和內(nèi)標(biāo)液峰面積比值是計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線公式的前提, 另外, 計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線公式時(shí), 試驗(yàn)人員需要準(zhǔn)確計(jì)算出不同濃度阿司匹林進(jìn)量和峰面積的關(guān)系, 結(jié)合相關(guān)系數(shù)進(jìn)行總結(jié)。③阿司匹林試驗(yàn)精密度檢定 精密度檢定需要實(shí)驗(yàn)人員對(duì)同一濃度的阿司匹林溶液進(jìn)行重復(fù)進(jìn)樣, 提高試驗(yàn)的精確度, 減少誤差, 在試驗(yàn)結(jié)束后, 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差的計(jì)算必不可少, 這是后期分析活動(dòng)開展的依據(jù)。④水楊酸標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算分析 水楊酸標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算公式的總結(jié)也離不開水楊酸對(duì)照品液的制作, 需要選用相同濃度的溶液進(jìn)行分析, 試驗(yàn)人員對(duì)照色譜圖, 根據(jù)水楊酸溶液主峰面積和安息香酸的峰面積的比值進(jìn)行外標(biāo)和內(nèi)標(biāo)兩項(xiàng)內(nèi)容落實(shí)公式總結(jié)。

從本次研究的成果來看, 高效液相色譜檢定法是能夠較好的對(duì)阿司匹林及游離水楊酸進(jìn)行含量檢定的, 其試驗(yàn)精密度、物質(zhì)回收率等內(nèi)容都符合檢定的相關(guān)要求, 因此, 在相關(guān)藥物檢測(cè)中, 工作人員可以將此項(xiàng)方法進(jìn)行推廣, 提高藥物質(zhì)量檢驗(yàn)的科學(xué)性和準(zhǔn)確性。

［1］丁家梅, 楊圣, 陸霄雄, 等.導(dǎo)數(shù)光譜多組分標(biāo)定法對(duì)阿司匹林、撲熱息痛及水楊酸的同時(shí)測(cè)定.分析測(cè)試學(xué)報(bào), 2011(06):612-617.

［2］石增強(qiáng), 魏順尚.HPLC法測(cè)定阿司匹林腸溶片系列產(chǎn)品中游離水楊酸的含量.西北藥學(xué)雜志, 2010(08):255-256.