蛋雞H5N1Re-4-5亞型初次免疫的探討

張萍 （江蘇省徐州市銅山區(qū)畜牧獸醫(yī)站 221007）

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蛋雞H5N1Re-4-5亞型初次免疫的探討

張萍 （江蘇省徐州市銅山區(qū)畜牧獸醫(yī)站 221007）

對(duì)某海蘭種雞場免疫禽流感疫苗60日齡和180日齡后的種蛋所生產(chǎn)的供應(yīng)給周邊的10個(gè)蛋雞養(yǎng)殖戶的雛雞，采用4個(gè)不同日齡免疫禽流感H5N1Re-4-5疫苗及不免疫5種方式。隨即選擇同批的9個(gè)不同日齡的雛雞各20只，進(jìn)行采血，利用血凝抑制試驗(yàn)進(jìn)行H5Re-4-5禽流感抗體水平監(jiān)測分析。結(jié)果顯示：種雞免疫60d后出孵的5家雛雞1日齡母源抗體高，雛雞首免在7~14日齡時(shí)免疫效果好；種雞免疫180d后出孵的5家雛雞1日齡母源抗體低，雛雞首免在7日齡前免疫效果好。

H5Re-4-5 母源抗體 初免日齡

禽流感(Avian Influenza，AI)是由A型流感病毒(AIV)引起的一種禽類急性傳染性疾病。禽類感染后表現(xiàn)為呼吸道癥狀、食欲減少、急性高度致死性的全身性疾病等多種癥候。禽流感不僅能引起雞、鴨、鵝等禽類發(fā)病、死亡，而且能引起哺乳動(dòng)物和人發(fā)病、死亡，嚴(yán)重地威脅人類的健康和生命，因此世界動(dòng)物衛(wèi)生組織及我國將其列為A類烈性傳染病[1,2,3]。禽流感沒有特效的藥物治療，因此疫苗免疫是控制本病最有效的方法[4,5,6]。

高致病性禽流感給我國的養(yǎng)禽業(yè)造成了巨大的壓力。目前，免疫接種是控制該病最有效的手段。本區(qū)雖廣泛地使用統(tǒng)購的高致病性禽流感計(jì)劃疫苗進(jìn)行免疫，但所用免疫程序比較混亂，特別是首免日齡不太合理。本文著重探討母源抗體消長規(guī)律及不同首免日齡的抗體變化情況，以期找到科學(xué)合理的適應(yīng)本地雞場的高致病性禽流感初免日齡。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)儀器及用品 微量血凝抑制試驗(yàn)所需的所有儀器、器材由區(qū)畜牧獸醫(yī)站實(shí)驗(yàn)室提供。禽流感H5N1Re-4抗原由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所生產(chǎn)，批號(hào)：201101。雞禽流感H5N1Re-4陽性血清，由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所生產(chǎn)，批號(hào)201101。

1.2 試驗(yàn)雛雞與分組 選取徐州市區(qū)某海蘭種雞場種雞免疫后60d和180d兩批種蛋所孵化的雛雞各5家。采用1、7、14、21日齡免疫禽流感H5N1Re-4-5疫苗及不免疫5種方式，分成10組。隨即選擇同批的1、5、10、15、20、25、30、35、40日齡的雛雞各20只，心臟采血每只雞采取1ml血液，進(jìn)行HI監(jiān)測。免疫及分組情況見表1、表2。

1.3 疫苗選擇 選取徐州市統(tǒng)購計(jì)劃苗，青島易邦生產(chǎn)的禽流感H5N1Re-4-5亞型油乳劑滅活疫苗。

1.4 監(jiān)測方法 采用國家農(nóng)業(yè)部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T-2004高致病性禽流感監(jiān)測技術(shù)規(guī)范規(guī)定的監(jiān)測方法進(jìn)行血清抗體監(jiān)測[7,8]。

表1 種雞免疫60d后免疫內(nèi)容與方法

注：H5N1Re-4-5禽流感疫苗由青島易邦提供計(jì)劃苗，免疫劑量0.3ml

表2 種雞免疫180d后免疫內(nèi)容與方法

注：H5N1Re-4-5禽流感疫苗由青島易邦提供計(jì)劃苗，免疫劑量0.3ml

2 試驗(yàn)結(jié)果

表3 種雞免疫60d后5個(gè)組HI檢測抗體的結(jié)果 (Log2)

注：本表數(shù)字是平均數(shù)

2.1 第1~5組試驗(yàn)雞抗體監(jiān)測結(jié)果 從表3可以看出，種雞免疫禽流感H5N1Re-4-5亞型油乳劑滅活疫苗60d后的種蛋孵出的5家雛雞，母源抗體整齊，較高，抗體水平達(dá)到7.75(Log2)到7.9(Log2)。1日齡免疫組雛雞到30日齡時(shí)仍接近65%的保護(hù)率，平均抗體4(Log2)；7日齡和14日齡免疫組抗體較好，在40d監(jiān)測時(shí)間內(nèi)，平均抗體最低4.45(Log2)，有較高的保護(hù)率；21日齡免疫組在20到25天，平均抗體水平低于4(Log2)，無保護(hù)力，到30日齡后才又達(dá)到4(Log2)以上；不免疫對(duì)照組到20日齡平均抗體只有3.1(Log2)無保護(hù)力。

2.2 第6~10組試驗(yàn)雞抗體監(jiān)測結(jié)果 從表4可以看出，種雞免疫禽流感H5N1Re-4-5亞型油乳劑滅活疫苗180天后的種蛋孵出的5家雛雞，母源抗體整齊，但較低，抗體水平只有4.6(Log2)到4.7(Log2)。1日齡免疫組雛雞到15日齡時(shí)有80%的保護(hù)率，平均抗體4.2(Log2)，到20日齡只有55%保護(hù)率，平均抗體3.5(Log2)；7日齡免疫組免疫抗體較好，在35d監(jiān)測時(shí)間內(nèi)，平均抗體最低4.3(Log2)，有較高的保護(hù)率，到40日齡平均抗體降到4.1(Log2)，14日齡免疫組到15d時(shí)，平均抗體水平低于4(Log2)，無保護(hù)力，到25日齡后才又達(dá)到4(Log2)以上；21日齡免疫組在15d平均抗體水平低于4(Log2)，無保護(hù)力，到35d后才上升到4(Log2)以上；不免疫對(duì)照組到15日齡平均抗體只有3.4(Log2)無保護(hù)力。

表4 種雞免疫180d后5個(gè)組HI檢測抗體的結(jié)果 (Log2)

注：本表數(shù)字是平均數(shù)

2.3 第1~5組試驗(yàn)雞抗體監(jiān)測變化規(guī)律(如圖1) 從圖1中可以看出第2、第3組曲線始終在4以上，第1組在30日齡降到4，第4、第5組在17日齡時(shí)降到4，第4組在30日齡時(shí)又升到4以上。

圖1 種雞免疫60d后的種蛋出雛的5組試驗(yàn)雞抗體變化

2.4 第6~10組試驗(yàn)雞抗體監(jiān)測變化規(guī)律(如圖2) 從圖中可以看出只有第7組曲線始終在4以上，第6組在16日齡降到4，第8組、第9組、第10組在12日齡時(shí)降到4，第8組在21日齡時(shí)升到4以上，第9組在32日齡時(shí)才升到4以上。

圖2 種雞免疫180d后的種蛋出雛的5組試驗(yàn)雞抗體變化

3 討論

（1）本次試驗(yàn)選擇的雛雞是一家種雞場孵化的不同養(yǎng)殖戶飼養(yǎng)的，養(yǎng)殖條件與管理水平接近，但飼喂的飼料不同。（2）從高致病性禽流感母源抗體消長規(guī)律看，母源抗體在5日齡達(dá)到高峰，以后開始下降，母源抗體高的，在17日齡不具保護(hù)力，母源抗體低的，在12日齡就失去保護(hù)力。（3）種雞免疫高致病性禽流感疫苗60d后的種蛋孵出雛雞母源抗體水平高，免疫180d后的種蛋孵出的雛雞母源抗體水平較低。（4）高致病性禽流感母源抗體高的，達(dá)到6Log2以上的，首免在7~14日齡之間效果好；高致病性禽流感母源抗體低的，在6Log2以下的，首免可以在7日齡左右，母源抗體越低，首免日齡越早。1日齡免疫，免疫抗體增長的不是太高，維持時(shí)間不長，可能與日齡太小，免疫功能不健全，疫苗吸收不理想有關(guān)。（4）本次試驗(yàn)結(jié)果基本符合首免日齡的計(jì)算公式，D=4×(X-4)(注：D為首免日齡，X為抗體滴度)[9]。

[1] 劉耀興, 陳昌海主編. 禽流感血清學(xué)診斷與監(jiān)測試驗(yàn)[M]. 江蘇省重大動(dòng)物疫病診斷與監(jiān)測技術(shù)及實(shí)驗(yàn)室管理培訓(xùn)班講義. 2004.

[2] 陳繼明主編. 禽流感. 重大動(dòng)物疾病監(jiān)測指南[M]. 北京: 中國農(nóng)業(yè)科技出版社. 2009.

[3] 丁永龍等主編. 禽流感. 新編禽病診療手冊[M].北京: 中國農(nóng)業(yè)科技出版社. 2003.

[4] 付鳳生等. 羅曼蛋雞H5N1亞型禽流感母源抗體監(jiān)測試驗(yàn)觀察[J]. 當(dāng)代畜牧, 2004, 8:7.

[5] 廖明等. 家禽免疫學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)[J]. 中國獸醫(yī)雜志, 1996, 10:50.

[6] 傅先強(qiáng), 劉占君等主編. 禽流感監(jiān)測技術(shù). 養(yǎng)禽場禽病檢驗(yàn)手冊[M]. 北京: 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社. 2005.

[7] 周錦萍, 劉佩紅第. 重組禽流感病毒滅活疫苗(H5N1亞型，Re-1株)免疫雞抗體消長規(guī)律及免疫程序的初步研究[J]. 中國獸藥雜志, 2007, 03:5-7.

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[9] 臧協(xié)峰, 金明蘭等. 雛雞禽流感母源抗體的消長規(guī)律監(jiān)測[J]. 吉林畜牧獸醫(yī), 2008,12:18-19.

（2012–11–22）

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