阿巍酸對(duì)大鼠冠狀動(dòng)脈環(huán)及血壓作用的研究

湖北省鄖縣人民醫(yī)院骨二科（十堰442000） 朱 怡 陳德森

阿巍酸是川產(chǎn)傘形科多年生草本植物川芎的干燥根莖主要有效成分的鈉鹽，有活血行氣、祛風(fēng)止痛之藥效，常以復(fù)方配伍應(yīng)用。有增強(qiáng)心肌收縮力、擴(kuò)張腦外周血管、抑制血小板聚集、改善微循環(huán)等作用［1］。多用于治療高血壓、冠心病等疾?。?］。本文對(duì)阿巍酸對(duì)正常大鼠血壓和冠狀動(dòng)脈的影響進(jìn)行了系統(tǒng)觀察和分析，為其用于冠心病、心絞痛的治療提供進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。

材料和方法

1 動(dòng) 物 SD大鼠，體重280～320g，雌雄兼用，SPF級(jí)［湖北醫(yī)藥學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，合格證：SCXK（鄂）2005-0008］。隨機(jī)分4組：①正常組：0.5%CMC-Na；②維拉帕米組：30mg／kg；③阿巍酸小劑量組（0.2g／kg）；④阿巍酸大劑量組（0.6g／kg）。

2 儀器及藥品 BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)（成都泰盟電子有限公司）；阿巍酸（SF，成都亨達(dá)藥業(yè)有限公司，批號(hào)080912）；維拉帕米（江蘇方強(qiáng)制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)：20081008）；硝苯地平（湖北華中藥業(yè)有限公司，批號(hào)20080215）；去甲腎上腺素（NE，武漢遠(yuǎn)大制藥集團(tuán)有限公司，批號(hào)080203）；KCl（廣東臺(tái)山化工廠，分析純）；Krebs-Henseleit（KH）營(yíng)養(yǎng)液，通混合氣體（95%O2+5%CO2）。

3 血壓測(cè)量方法 10%水合氯醛麻醉（0.25ml／100g），仰臥位固定于手術(shù)臺(tái)，分離右側(cè)股動(dòng)脈，插入動(dòng)脈導(dǎo)管，記錄動(dòng)脈血壓：SBP、DBP。打開大鼠腹腔，暴露十二指腸以備給藥。手術(shù)完畢，穩(wěn)定30min后，記錄血壓，經(jīng)十二指腸給藥，連續(xù)記錄給藥后0.5、1、2和4h的各項(xiàng)指標(biāo)。

4 離體大鼠冠狀動(dòng)脈環(huán)的制備 將大鼠胸腔打開，取出尚在搏動(dòng)的心臟，置95%O2和5%CO2混合氣體飽和的KH營(yíng)養(yǎng)液（4℃）中，迅速分離左冠狀動(dòng)脈前降支，去除血管周圍的結(jié)締組織，制成寬度為2～3mm的動(dòng)脈環(huán)，將其懸掛于10ml的浴槽中，一端固定在L形通氣鉤上，另一端與張力換能器相連，負(fù)荷1～1.2g，浴槽中通入95%O2+5%CO2混合氣體，37℃，每10～15min換液一次，平衡1h后開始實(shí)驗(yàn)，BL-420記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

結(jié) 果

1 SF對(duì)NE和KCl引起大鼠冠狀動(dòng)脈環(huán)收縮量效曲線的影響 實(shí)驗(yàn)中觀察到NE和KCl均可劑量依賴性地引起大鼠冠狀動(dòng)脈環(huán)收縮，加入10-4mol／L SF后，再以同樣的方式累加給予不同濃度的NE或KCl，可見NE和KCl的量效曲線均非平行右移，最大反應(yīng)壓低，說(shuō)明SF與NE或KCl均呈非競(jìng)爭(zhēng)性拮抗關(guān)系，可以使動(dòng)脈環(huán)舒張。其pD2ˊ值分別為3.63±0.21和3.59±0.12。

2 SF對(duì)NE所致血管收縮兩種成份的影響 實(shí)驗(yàn)組的NE內(nèi)源性鈣收縮張力為1.43±0.35g，SF 10和5×10-4mol／L可使之分別下降至0.92±0.46g和0.61±0.28g，與正常組比較差異顯著（P＜0.05，P＜0.01）。加入10-5和5×10-5mol／L SF后，NE引起的外源性鈣收縮分別為1.17±0.44g和0.89±0.27g，與正常組（2.15±0.47g）比較有明顯差異（P＜0.01）。

3 阿巍酸對(duì)大鼠收縮壓的影響 正常組在給予0.5%CMC-Na溶劑后，SBP無(wú)明顯變化。維拉帕米組在給藥后SBP迅速降低，從給藥后0.5～4h，與正常組比較差異顯著（P＜0.01）。降幅以2h以內(nèi)較大，4h有所減小。阿巍酸小劑量在給藥后0.5～2h，SBP也有顯著降低（P＜0.05），4h時(shí)僅有降低的趨勢(shì)。阿巍酸大劑量在給藥后0.5～4h，SBP均有明顯降低，與正常組比較差異有顯著性（P＜0.01），但降幅以藥后1～2h最大，4h有所減小，SBP逐漸恢復(fù)，表明阿巍酸可劑量依賴性地降低麻醉大鼠的股動(dòng)脈SBP，見表1。

4 對(duì)大鼠舒張壓的影響 正常組大鼠在經(jīng)十二指腸給予0.5%CMC-Na溶劑后，DBP較為平穩(wěn)，無(wú)明顯波動(dòng)。維拉帕米組在藥后0.5到4h，DBP明顯降低，與正常組比較，差異有顯著性（P＜0.01），變化趨勢(shì)與SBP的變化相似，以2h內(nèi)降幅較大，4h時(shí)略有恢復(fù)。阿巍酸小劑量組在給藥后2h內(nèi)有所降低，但與對(duì)照組比較，僅在1h時(shí)有顯著性差異（P＜0.05）。阿巍酸大劑量組在給藥后DBP明顯降低（P＜0.01），尤其2h內(nèi)降低明顯，4h時(shí)有所恢復(fù)。表明阿巍酸提取物可劑量依賴性地降低大鼠的DBP，但其降低幅度小于陽(yáng)性藥維拉帕米。

表1 阿巍酸對(duì)大鼠收縮壓的影響（±s，mmHg，n＝8）

表1 阿巍酸對(duì)大鼠收縮壓的影響（±s，mmHg，n＝8）

注：與正常組比較＊P＜0.05，＊＊P＜0.01。

藥后血壓組 別 藥前血壓6 119.5±12.3維拉帕米組 125.1±14.574.6±14.5＊＊ 75.8±19.2＊＊ 89.9±18.1＊＊ 88.7±10.9＊＊阿巍酸小劑量組 129.6±23.2101.0±13.2＊ 101.0±9.4＊ 98.9±12.1＊ 95.3±8.9阿巍酸大劑量組 127.8±18.990.7±11.1＊＊ 83.6±10.6＊＊ 82.0±12.2＊＊ 91.4±9.8 0.5h 1h 2h 4h正常組 130.7±24.6124.1±10.5121.4±10.8117.5±11.＊＊

表2 阿巍酸提取物對(duì)大鼠舒張壓的影響（±s，mmHg，n＝8）

表2 阿巍酸提取物對(duì)大鼠舒張壓的影響（±s，mmHg，n＝8）

注：與正常組比較＊P＜0.05，＊＊P＜0.01。

藥后血壓組 別 藥前血壓0±13.4維拉帕米組 96.2±10.654.5±11.3＊＊ 56.0±13.1＊＊ 49.0±9.1＊＊ 53.9±12.2＊＊阿巍酸小劑量組 98.6±12.575.0±12.467.9±11.5＊ 79.8±10.588.4±9.6阿巍酸大劑量組 95.7±10.662.9±10.1＊＊ 68.0±10.9＊＊ 65.0±11.3＊＊ 79.8±12.4 0.5h 1h 2h 4h正常組 98.5±11.383.4±10.189.0±10.789.2±11.591.＊＊

討 論

阿巍酸屬于活血化瘀藥，對(duì)心血管系統(tǒng)的作用明顯，可緩解心肌缺血、降低心肌耗氧量，用于治療冠心病、心絞痛。其主要有效成分為阿巍酸嗪和阿魏酸素［3］。由于阿巍酸及其提取物有對(duì)抗腎上腺素和氯化鉀引起家兔離體動(dòng)脈收縮的作用［4］。也能明顯增加冠脈流量，降低動(dòng)脈壓及冠脈阻力。有文獻(xiàn)報(bào)道，阿巍酸素可以減少Ca2+內(nèi)流，有Ca2+拮抗作用［5］。也有報(bào)道，阿巍酸嗪可抑制內(nèi)毒素引起的大鼠血壓下降，加重其引起的心率加快。本研究通過(guò)觀察阿巍酸對(duì)大鼠動(dòng)脈血壓和冠狀動(dòng)脈的影響，分析藥物對(duì)血管平滑肌細(xì)胞電壓依賴性鈣通道和受體操縱鈣通道介導(dǎo)的外鈣內(nèi)流和內(nèi)鈣釋放的作用。

在大鼠冠狀動(dòng)脈環(huán)為研究對(duì)象中，在分別加入中等濃度的SF前后制作NE和KCl的量效曲線，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，加入SF后，NE和KCl的量效曲線均右移，且最大效應(yīng)降低。說(shuō)明SF非競(jìng)爭(zhēng)性地拮抗NE或KCl的縮血管作用。SF對(duì)二者的pD2ˊ值接近3.63±0.21和3.59±0.12，表明SF對(duì)二者的拮抗作用相當(dāng)。但是SF的濃度為10-4mol／L，偏大，說(shuō)明其作用較弱，即SF對(duì)NE或KCl引起的外鈣內(nèi)流和或內(nèi)鈣釋放有較弱的抑制作用。加入次最大收縮濃度的NE或KCl，再加入不同濃度的SF，制作量效曲線，可以看出，SF可劑量依賴性地抑制NE或KCl引起的冠脈收縮，這說(shuō)明SF既可抑制冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞膜電壓依賴性和受體操縱性外鈣內(nèi)流，也可抑制受體操縱性細(xì)胞內(nèi)鈣庫(kù)釋放鈣。

研究發(fā)現(xiàn)阿巍酸在0.2～0.6g／kg之間可以劑量依賴性地降低麻醉大鼠的SBP，作用持續(xù)時(shí)間超過(guò)4h；也可劑量依賴性地降低大鼠的DBP，作用時(shí)間也超過(guò)4h?？傮w來(lái)看，對(duì)DBP的降幅略大于SBP。說(shuō)明其對(duì)外周血管的舒張作用可能強(qiáng)于對(duì)心臟收縮活動(dòng)的影響。由此可見，阿巍酸對(duì)麻醉的正常動(dòng)物有較強(qiáng)的降壓作用，故在臨床應(yīng)用阿巍酸及其提取物時(shí)應(yīng)注意其降壓作用。這一作用是否能作為新的適應(yīng)證來(lái)應(yīng)用，還有待于進(jìn)一步用高血壓模型動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，考察其作用機(jī)制。

［1］周建設(shè)，孔 毅，申屠建中，等.阿巍酸當(dāng)歸單煎共煎液中有效成分含量的變化［J］.中國(guó)藥學(xué)雜志，2008，43（2）：95-98.

［2］馬逢時(shí)，李家明.阿魏酸及其衍生物的合成及藥效研究進(jìn)展［J］.亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2008，4（5）：55.

［3］Qin HL，Deng AJ，Du GH，eta l.Fingerprinting analysis of rhizoma chuanxiong of commercial types using 1Hnuclear magnetic resonance spectroscopy and high performance liquid chromatography method.JI ntegr Plant Biol，2009，51（6）：537-544.

［4］Rhyu MR，Kim EY，Kim B.Nitric oxide-mediated vasorelaxation by Rhizoma Ligustici wallichii in isolated rat thoracic aorta.Phytomedicine，2004，11（1）：51-55.

［5］周 彤，曾秋棠.阿魏酸與胺碘酮對(duì)家兔心室肌細(xì)胞L型鈣通道電流的影響［J］.中國(guó)心臟起搏與心電生理雜志，2008，22（6）：534.