細胞因子誘導(dǎo)殺傷細胞治療中晚期食管癌的療效觀察

汪治宇 劉榮鳳 曹春曉 王麗斌 王聰敏 (河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院，河北 石家莊 0500)

過繼免疫治療對于晚期腫瘤是一種安全、可行的治療方法〔1〕。細胞因子誘導(dǎo)殺傷(CIK)細胞是一種新型的免疫活性細胞，它是將人外周血單個核細胞在體外用多種細胞因子共同培養(yǎng)一段時間后獲得的一群異質(zhì)細胞，兼具有T淋巴細胞強大的抗瘤活性和自然殺傷(NK)細胞的非主要組織相容性復(fù)合體(MHC)限制性殺瘤優(yōu)點，被認為是新一代抗腫瘤過繼細胞免疫治療的首選方案，其在臨床上被應(yīng)用于多種腫瘤治療〔2〕。本科對36例中晚期食管癌患者進行CIK細胞免疫治療后，進行臨床療效評估，并監(jiān)測患者免疫功能及生活質(zhì)量變化，同時對治療過程中的護理體會總結(jié)如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象 生物治療科2010年10月至2011年10月間行CIK細胞免疫治療的36例中晚期食管癌患者，年齡35～76(平均51.3)歲，男19例，女17例，鱗癌21例，腺癌11例，未分化癌4例，Ⅲ期20例，Ⅳ期16例。

1.2 CIK細胞制備 抽取自體外周血50 ml，分離并收集單核細胞后在無菌室進行CIK細胞的制備。首先對收集到的單核細胞在無菌條件下進行培養(yǎng)和誘導(dǎo)、增殖，使其成為成熟的CIK細胞，周期一般為10 d左右;然后將培養(yǎng)成熟的CIK細胞懸液在冷藏條件下由專人送至病房，由護士通過靜脈通路回輸給患者，同時輸注白細胞介素Ⅱ100萬單位。每次輸注細胞數(shù)約1×1010/L，1次∕隔日，共輸注3次，間隔1個月進行下一療程，共4療程。

1.3 評價指標(biāo) (1)可測量病灶療效：參照實體腫瘤的療效評價標(biāo)準(zhǔn)1.1版評定。完全緩解(CR)：所有靶病灶消失，全部病理淋巴結(jié)(包括靶結(jié)節(jié)和非靶結(jié)節(jié))短直徑必須減少至＜10 mm。部分緩解(PR)：靶病灶直徑之和比基線水平減少至少30%。疾病進展(PD)：以整個實驗研究過程中所有測量的靶病灶直徑之和的最小值為參照，直徑和相對增加至少20%;除此之外，必須滿足直徑和的絕對值增加至少5 mm(出現(xiàn)一個或多個新病灶也視為疾病進展)。疾病穩(wěn)定(SD)：靶病灶減小的程度沒達到PR，增加的程度也沒達到PD水平，介于兩者之間，研究時可以直徑之和的最小值作為參考。CR+PR統(tǒng)計客觀緩解率。(2)生活質(zhì)量的改善：采用國際通用的卡氏評分〔3〕評價。(3)免疫功能檢測：抽靜脈血3 ml進行SAP法檢測，分別計數(shù)300個細胞中CD4+、CD8+T細胞、NK細胞數(shù)目，求出百分率及計算CD4+/CD8+比值。(4)安全性及不良反應(yīng)評價：安全性按照WHO抗腫瘤藥急性及亞急性毒性反應(yīng)分級標(biāo)準(zhǔn)〔3〕。觀察患者發(fā)熱、皮疹、嘔吐、腹瀉等不良反應(yīng)發(fā)生。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件，計量資料先進行正態(tài)性檢驗，對符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)，采用兩獨立樣本t檢驗。對非正態(tài)分布的數(shù)據(jù)，采用Mann-Whitney U檢驗。

2 結(jié)果

2.1 CIK細胞治療后的療效 36例患者中PR 16例，SD13例，PD7例，客觀緩解率為44.4%，臨床獲益率為80.6%。

2.2 治療后免疫功能的變化 見表1。經(jīng)過CIK細胞免疫治療后 CD4+、CD8+、NK、CD4+/CD8+細胞比例明顯改善(P＜0.05)。

表1 CIK細胞治療前后免疫功能的變化( s ，n=36)

表1 CIK細胞治療前后免疫功能的變化( s ，n=36)

與治療前比較：1)P＜0.05

CD4+ CD8+ NK CD4+/CD8+治療前28.31±2.62 36.72±3.11 22.76±2.51 0.82±0.04治療后 37.14±4.201)19.82±1.551)38.63±3.861)1.38±0.171)

2.3 生活質(zhì)量的改善 36例患者中，KPS評分增加≥10分為24例(66.7%)，10例評分無變化，但食欲及睡眠均有改善。2例評分下降10分。

2.4 安全性和不良反應(yīng) 5例出現(xiàn)體溫升高(37.5～38.5℃)，發(fā)熱率為14%(5/36)。4例給予物理降溫后自行緩解。1例經(jīng)退熱栓一枚納肛后緩解。1例出現(xiàn)皮疹，涂抹派瑞松軟膏后消失。

3 討論

CIK細胞是一種新型、高效的具有廣譜殺腫瘤活性細胞。CIK細胞可通過三種途徑發(fā)揮殺瘤、溶瘤作用：①在體內(nèi)受某些淋巴因子作用后，CIK細胞大量釋放具有細胞毒性的胞質(zhì)顆粒到胞外，這些顆粒直接破壞瘤細胞;②進入體內(nèi)活化的CIK細胞可分泌多種細胞因子如干擾素、腫瘤壞死因子和白細胞介素-2等，不僅對腫瘤細胞有直接抑制作用，而且還可通過調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)間接殺傷瘤細胞;③CIK細胞表達Fas可誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡，但CIK細胞由于有抗凋亡基因表達，因此在體內(nèi)能抵抗Fas陽性腫瘤細胞對的反作用，故能對腫瘤細胞發(fā)揮持久的溶瘤作用〔4，5〕。更重要的是，CIK細胞療法對人體正常細胞、機體免疫系統(tǒng)沒有任何傷害，是一種安全可靠、副作用小的腫瘤治療方法。因此，本研究對于無法行手術(shù)、晚期和高齡晚期食管癌患者給予CIK細胞治療，觀察療效及治療前后免疫功能、生活質(zhì)量、不良反應(yīng)等的變化。本研究結(jié)果可見，CIK細胞單獨應(yīng)用對晚期食管癌有較好的療效，并且可以提高患者的生活質(zhì)量。

機體的抗腫瘤免疫以細胞免疫為主，特別是T淋巴細胞，其細胞表面不同分化抗原(CD抗原)是反應(yīng)免疫功能的重要標(biāo)志，并隨疾病轉(zhuǎn)歸而發(fā)生變化。外周血中，CD4+代表具有殺傷作用的T細胞，CD8+代表具有抑制作用的 T細胞，CD4+/CD8+反映機體免疫功能紊亂的敏感指標(biāo)，只有在正常的比例時才能發(fā)揮正常的抗腫瘤作用，比值降低，說明機體存在免疫抑制和免疫調(diào)節(jié)紊亂。本研究中CIK細胞治療后，NK細胞對腫瘤細胞有自然殺傷作用。在CIK細胞治療過程中，耐心地宣教、精心全面的護理、規(guī)范的操作對保證治療的順利進行至關(guān)重要，也有利于提高治療效果。因此醫(yī)護人員不但要加強業(yè)務(wù)知識學(xué)習(xí)，還應(yīng)加強對相關(guān)學(xué)科的學(xué)習(xí)，如預(yù)防醫(yī)學(xué)、社會學(xué)、教育學(xué)、健康心理學(xué)、健康行為學(xué)等。良好的專業(yè)素質(zhì)，豐富的相關(guān)學(xué)科知識，加之護理人員的實踐經(jīng)驗，將有效地提高整體醫(yī)療、護理水平，為患者帶來更大的獲益。

1 Weng DS，Zhou J，Zhou QM，et al.Minimally invasive treatment combined with cytokine induced killer cells therapy lower the short-term re-currence rates of hepatocellular carcinomas〔J〕.J Immunother，2008;31(1)：63-71.

2 秦 莉.CIK細胞的體外培養(yǎng)與細胞毒作用〔J〕.醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志，2007;4(1)：82-5.

3 周際昌.實用腫瘤內(nèi)科學(xué)〔M〕.北京：人民衛(wèi)生出版社，2003：28-48.

4 Hongeng S，Petvises S，Worapongpaiboon S，et al.Generation of CD3+CD56+cytokine-induced killer cells and their in vitro cytotoxicity against pediatric cancer cells〔J〕.Int J Hematol，2003;77(2)：175-9.

5 胡禮儀，張有順，周 新，等.CIK細胞的誘導(dǎo)及對肝癌細胞毒作用的體外研究〔J〕. 中國醫(yī)師雜志，2005;7(5)：604-6.