芪桂消癥顆?？寡祖?zhèn)痛作用的實驗研究*

謝 萍 馮 儉 許 寧 張煜華 張夢云 孫 川 秦銀花 楊張婧 米培榕 唐佳佳

（1.成都中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院，四川 成都 610072；2.成都中醫(yī)藥大學，四川 成都 610075）

芪桂消癥顆粒具有益氣化瘀，活血消癥的功效，主治子宮肌瘤自凝刀術(shù)后神疲乏力、腰腹痛、發(fā)熱、陰道排液、或尿頻尿急等癥。本研究擬通過芪桂消癥顆粒對多種炎癥和致痛動物模型的影響，探討該方的藥理作用，為臨床療效提供實驗依據(jù)。

1 材 料

1.1 藥物 芪桂消癥顆粒，中藥原液由成都中醫(yī)藥大學試劑科提供，實驗前用蒸餾水配制。戊巴比妥鈉，上海西塘試劑公司（進口分裝），每瓶25 g，批號20080608。桂枝茯苓膠囊，江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司，批號：20080101。消炎痛，山西臨汾云鵬藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號：14020771。

1.2 動物 昆明種小鼠，雄性，體質(zhì)量18～22 g；SD 大鼠，雄性，體質(zhì)量150～180 g。由成都中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供，一級動物，合格證：SCXK（川）2009-11。

1.3 試劑與儀器 二甲苯，分析純，每瓶500 mL，上?；瘜W試劑總廠，批號0040126。T-1000 型電子天平，d=0.1 g，美國雙杰兄弟（集團）有限公司。Sartorius 電子分析平，d=0.1～0.01 mg，西德。

1.4 統(tǒng)計學處理 應(yīng)用SPSS15.0 統(tǒng)計軟件。計量資料以表示，組間差異用完全隨機設(shè)計資料的多個樣本均數(shù)比較的單因素方差分析進行、非參數(shù)檢驗，以上數(shù)據(jù)資料分析均由統(tǒng)計軟件包完成。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 方法與結(jié)果

本實驗方法參考文獻［1-2］進行。

2.1 對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響 取體質(zhì)量18～22 g 雄性昆明小鼠60 只，隨機分6 組，每組10 只，各組均灌胃給藥，給藥劑量按表1 所示，給藥容積按0.2 mL/10 g 計算，模型組給予等體積0.9%氯化鈉注射液，每日1次，連續(xù)3 d。末次給藥后30 min 在小鼠右耳廓兩面用微量進樣器均勻涂抹100%二甲苯0.02 mL/只致炎，左耳不涂為空白對照，致炎30 min 后，頸椎脫臼處死小鼠，沿耳廓基線取下兩耳，用直徑8 mm 打孔器分別在兩耳同一部位取下圓耳片，置電子天平上分別稱重，以左右耳片重量差值表示腫脹度。計算鼠耳腫脹度和耳腫脹抑制率。耳腫脹度=右耳片（致炎側(cè)）質(zhì)量-左耳片（對照側(cè)）質(zhì)量。耳腫脹抑制率=（模型組耳腫脹度―藥物組耳腫脹度）／模型組耳腫脹度×100%。結(jié)果見表1。

表1 芪桂消癥顆粒對二甲苯誘導小鼠耳腫脹的影響（±s）

表1 芪桂消癥顆粒對二甲苯誘導小鼠耳腫脹的影響（±s）

與同期模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。下同。

2.2 對蛋清致大鼠足腫脹的影響 取體質(zhì)量150～180 g 雄性SD 大鼠60 只，隨機分6 組，每組10 只，每鼠右后足跖關(guān)節(jié)處正面上端用筆作一清晰橫線標記，用排水法足容積測定裝置測量各組大鼠右足跖關(guān)節(jié)下相同位置致炎前的體積。之后各組均灌胃給藥，給藥劑量按表2 所示，給藥容積按1 mL/100 g 計算，模型組給予等體積0.9%氯化鈉注射液，每日1次，連續(xù)3 d。末次藥后30 min，無菌條件下每鼠右后足跖固定位置皮下注入0.1 mL（100%）蛋清，并分別于致炎后0.5～3 h同法測定容積，按下列公式計算足腫脹率。足腫脹增加百分率（%）=（致炎后右后足容積―致炎前右后足容積）／致炎前右后足容積×100%。結(jié)果見表2。

表2 芪桂消癥顆粒對蛋清致大鼠足爪腫脹的影響（±s）

表2 芪桂消癥顆粒對蛋清致大鼠足爪腫脹的影響（±s）

2.3 對塑料環(huán)誘導大鼠肉芽組織增生的影響 取體質(zhì)量150～180 g，雄性SD 大鼠60 只，隨機分6 組，每組10 只，腹腔注射2%戊巴比妥鈉30 mg/kg 淺麻醉，無菌操作將已稱重的塑料環(huán)（75%酒精浸泡24 h 消毒干燥）植入大鼠左右前肢腋部皮下。次日灌胃給藥，給藥劑量按表3 所示，給藥容積按1 mL/100 g 計算，模型組給予同等體積0.9%氯化鈉注射液，連續(xù)7 d。第8日頸椎脫臼致死，仔細剝離包有肉芽組織的塑料環(huán)，置于電子天平上稱重，減去原塑料環(huán)質(zhì)量，即為肉芽腫凈重，肉芽腫凈重用mg/100 g 體質(zhì)量表示，進行組間比較，并計算肉芽腫抑制率。肉芽腫抑制率=（模型組肉芽腫凈重―藥物組肉芽腫凈重）／模型組肉芽腫凈重×100%。結(jié)果見表3。

2.4 對熱板致痛的影響 選擇體質(zhì)量18～22 g 雌性昆明小鼠一批，按照文獻方法首先測定給藥前的基礎(chǔ)痛覺反應(yīng)潛伏期，將小鼠放在（55±0.5）℃熱板上，記錄自放入熱板至舔后足的時間，共測2次，每次間隔5 min，取其均值作為該鼠的基礎(chǔ)痛覺反應(yīng)潛伏期（若小鼠置熱板上60 s 仍未出現(xiàn)舔后足反應(yīng)，迅速取出，痛覺反應(yīng)的潛伏期按60 s 計算）。篩選痛覺反應(yīng)潛伏期在5～30 s的60 只，隨機分為6 組，每組10 只。各組均灌胃給藥，給藥劑量按表4 所示，給藥容積按0.2 mL/10 g計算，模型對照組給予同等體積0.9%氯化鈉注射液連續(xù)3 d。末次給藥后0.5、1、1.5、2 h 測定各組小鼠痛覺反應(yīng)潛伏期，并計算各組小鼠痛閾提高率。結(jié)果見表4。

表3 芪桂消癥顆粒對塑料環(huán)誘導大鼠肉芽組織增生的影響（±s）

表3 芪桂消癥顆粒對塑料環(huán)誘導大鼠肉芽組織增生的影響（±s）

表4 芪桂消癥顆粒對蛋清致大鼠足爪腫脹的影響（±s）

表4 芪桂消癥顆粒對蛋清致大鼠足爪腫脹的影響（±s）

痛閾提高率=（給藥后痛覺反應(yīng)潛伏期―基礎(chǔ)痛覺反應(yīng)潛伏期）／基礎(chǔ)痛覺反應(yīng)潛伏期×100%

2.5 扭體法 選擇18～22 g 昆明種小鼠60 只，隨機分為6 組，每組10 只，各組均灌胃給藥，給藥劑量按表5所示，給藥容積按0.2 mL/10g 計算，模型對照組給予同等體積0.9%氯化鈉注射液連續(xù)3 d。末次給藥后30 min腹腔注射新鮮配制的0.7%醋酸溶液0.1 mL/10 g，觀察并記錄小鼠的扭體潛伏期和20 min 內(nèi)扭體反應(yīng)（腹部內(nèi)凹，后肢伸展，臀部抬高）的次數(shù)，并計算各組的扭體抑制率。結(jié)果見表5。扭體抑制率=（模型組扭體次數(shù)―藥物組扭體次數(shù)）／模型組扭體次數(shù)×100%

表5 芪桂消癥顆粒對醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響（±s）

表5 芪桂消癥顆粒對醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響（±s）

3 討論

手術(shù)為侵入性治療，耗傷正氣，損傷胞宮血絡(luò)，致瘀血內(nèi)停而為病，因此氣虛血瘀為子宮肌瘤自凝刀術(shù)后諸多并發(fā)癥主要病機?；谶@一病機，根據(jù)補消結(jié)合的原則，采用益氣扶正，祛瘀散結(jié)的方法，精選良方芪桂消癥顆粒。方中黃芪益氣扶正；血竭、水蛭活血化瘀；“血非溫不行”，桂枝溫經(jīng)通脈，利脈道助血行。諸藥合用攻補兼施，切合病機。

從動物實驗結(jié)果可見，芪桂消癥顆粒對二甲苯所致的小鼠耳腫脹、對蛋清所致的大鼠足腫脹均有明顯的抑制作用，說明對炎癥早期水腫滲出有明顯的抑制作用；而抑制塑料環(huán)所致的大鼠肉芽增生，說明對炎癥晚期的纖維結(jié)締組織增生也有抑制作用。對熱板刺激和醋酸引起的疼痛有良好的抑制作用。這些研究為芪桂消癥顆粒治療子宮肌瘤自凝刀術(shù)后諸多并發(fā)癥提供了相關(guān)的藥效學依據(jù)，但其作用機制還有待進一步研究。

［1］徐叔云，卞如濂，陳修.藥理實驗方法學［M］.3 版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2001：911.

［2］陳奇，鄧文龍，張世瑋，等.中藥藥理研究方法學［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，1993：363.