幾種HBsAg檢測方法的比較與分析

李小毓

幾種HBsAg檢測方法的比較與分析

李小毓

目的分析電化學(xué)發(fā)光法(ECLIA)、酶聯(lián)免疫法(ELISA)和膠體金免疫層析法(GICA)在不同水平乙肝病毒表面抗原(HBsAg)檢測中的結(jié)果差異，并進(jìn)行定量分析與評(píng)價(jià)。方法選取138例HBsAg低濃度(介于0.5～1.0ng/ml)和214例高濃度(>1.0ng/ml)臨床樣本，分別用ECLIA、ELISA、GICA進(jìn)行檢測，并與162例非乙肝患者正常血清檢測結(jié)果對(duì)照，對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果低濃度樣本中，ECLIA、ELISA、GICA檢測HBsAg為陽性的分別為125、133、121例；高濃度樣本中，三種方法靈敏度分別為99.1%、99.5%、98.6%，差異不明顯。結(jié)論ELISA和GICA的敏感度和特異度均低于ECLIA。在HBsAg低濃度情況下，ECLIA與ELISA及GICA的靈敏度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在HBsAg值高濃度情況下，ECLIA與ELISA的靈敏度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，ECLIA與GICA的靈敏度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

乙肝病毒表面抗原；電化學(xué)發(fā)光法；酶聯(lián)免疫法；膠體金免疫層析法

乙型肝炎是我國目前流行最廣泛、危害最嚴(yán)重的病毒性肝炎之一。HBsAg檢測是臨床診斷和治療乙肝病毒感染者病程和傳染性的重要指標(biāo)[1]。許多高靈敏度的檢測方法先后應(yīng)用于臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)[2]，為定量分析和比較這些方法的差異，我們分別從高水平和低水平HBsAg樣本進(jìn)行幾種方法的比較，結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1樣本來源 收集我院2008年～2011年臨床新鮮血清樣品，分別取HBsAg低水平樣本138例，高濃度樣本214例，并取162例非乙肝患者正常血清樣本作為對(duì)照。

1.2試劑和儀器 ECLIA法采用POCHEE601型全自動(dòng)免疫分析儀及配套試劑(德國羅氏)；ELISA試劑采用北京萬泰生物藥業(yè)有限公司產(chǎn)品；GICA法采用美國雅培藥業(yè)有限公司提供全自動(dòng)發(fā)光免疫儀器。

1.3方法 在嚴(yán)格按試劑盒說明書及儀器操作規(guī)程進(jìn)行操作基礎(chǔ)上，首先對(duì)352例乙肝病毒感染者樣本采用時(shí)間分辨免疫熒光(TRFIA)檢測確定其HBsAg濃度，確定低濃度和高濃度兩個(gè)分組。再分別用ECLIA、ELISA和GICA法對(duì)兩個(gè)分組及健康對(duì)照組進(jìn)行檢測，確定各組樣本的陽性或陰性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 檢測結(jié)果采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行分析處理，結(jié)果差異比較采用成對(duì)檢驗(yàn)，為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1檢測結(jié)果 三種方法檢測低水平組、高水平組和對(duì)照組的血清HBsAg結(jié)果如表1所示。

表1 三種方法檢測514血清樣本HBsAg結(jié)果(例)

2.2結(jié)果比較與評(píng)價(jià) 對(duì)三種檢測方法的檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。對(duì)于低水平組，三種方法檢測出的陽性樣本分別為125例、133例和121例；對(duì)于高水平組，三種方法分別檢測出212例、213例和211例陽性樣本。根據(jù)表1數(shù)據(jù)計(jì)算，可以得到三種方法血清HBsAg檢測的靈敏度與特異度，具體如表2所示。

2.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 將ECLIA法檢測結(jié)果分別與ELISA法和GICA法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，通過數(shù)據(jù)資料的檢驗(yàn)和差異性分析，得到檢驗(yàn)結(jié)果如表3所示。

表2 HBsAg三種檢測方法的靈敏度與特異度 (%)

表3 ECLIA與ELISA和GICA的結(jié)果比較

3 分析與討論

乙肝是我國最常見的感染性疾病之一，HBsAg是乙肝病毒感染后最早出現(xiàn)的血清標(biāo)志物之一，因此應(yīng)用免疫技術(shù)和方法測定HBsAg是診斷肝炎病毒感染的重要手段[3,4]。隨著免疫學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，對(duì)HBsAg檢測靈敏度要求越來越高。比較現(xiàn)有幾類常見的HBsAg檢測方法在不同HBsAg濃度水平的檢測靈敏度與特異度，對(duì)于臨床掌握乙肝病毒感染發(fā)生、發(fā)展及治療效果等具有重要的意義。

經(jīng)過檢測結(jié)果比較與統(tǒng)計(jì)分析可知，ELISA和GICA的敏感度和特異度均低于ECLIA。在HBsAg值低水平情況下，ECLIA與ELISA及GICA的靈敏度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在HBsAg值高水平情況下，ECLIA與ELISA的靈敏度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，ECLIA與GICA的靈敏度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。ECLIA與ELISA的特異度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，ECLIA與GICA的特異度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。ELISA法和GICA發(fā)操作簡便，成本較低，尤其是在HBsAg高濃度情況下的檢測靈敏度也較高，適宜于普通患者的乙肝病毒感染情況篩查及確診乙肝患者的臨床檢查。ECLIA法雖然試劑和儀器成本較高，但是在低水平HBsAg情況下，其靈敏度和特異度較高。因此，在實(shí)際工作中，應(yīng)根據(jù)不同的環(huán)境或需求，選用最優(yōu)的檢測方法。

[1] 陸再英，鐘南山.內(nèi)科學(xué).北京：人民衛(wèi)生出版社，2008:253-254.

[2] 張敏.HBsAg三種檢測方法的實(shí)驗(yàn)室評(píng)價(jià).實(shí)用醫(yī)技雜志，2006,13(18)：3204-3205.

[3] 王利杰，許東亞.電化學(xué)發(fā)光法和酶聯(lián)免疫法檢測低水平HBsAg.中國輸血雜志，2011,24(9)：767-768.

[4] 刑福軍，楊巧林，田衛(wèi)花.酶聯(lián)免疫法與電化學(xué)發(fā)光法檢測AFP腫瘤標(biāo)志物結(jié)果的對(duì)比分析.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011,32(17)：1997-1998.

473000 南陽市張仲景醫(yī)院檢驗(yàn)科