芒果葉的化學成分研究

顧承真，劉菲菲，姚元成，劉 錄，曹建新

昆明理工大學化學工程學院，昆明 650500

芒果葉為漆樹科植物芒果(Mangifera indica L.)的葉，芒果主要生長在熱帶和亞熱帶地區(qū)。芒果葉性味酸、甘、涼、平，具有平喘、止咳、去痰、行氣疏滯、免疫、抗炎、鎮(zhèn)痛、抗腫瘤、抗病毒、抗菌、抗脂質過氧化、保肝利膽［1］等作用。1973年廣西中醫(yī)學院將芒果葉開發(fā)成芒果止咳片，于1982年獲藥“準”字號批文，1998年被列為國家基本藥物［2］。上海醫(yī)藥工業(yè)研究院中藥研究室的陸仲毅［3］從芒果葉中分離得到8個酚類化合物;2009年廣東中醫(yī)院藥學部的胡彥君［4］從芒果葉中分離得到5個常規(guī)化合物。2008年昆明醫(yī)學院李玲教授研究發(fā)現(xiàn)芒果葉中芒果苷類化合物具有防治高尿酸血癥和痛風的新用途［5］，為了進一步研究將芒果葉的藥理活性基礎，我們對芒果葉的化學成分進行了進一步的研究，分離得到11個化合物，分別為芒果苷(1)、高芒果苷(2)、槲皮素(3)、沒食子酸(4)、原兒茶酸(5)、沒食子酸甲酯(6)、lingueresinol(7)、dihydrodehydrodiconiferyl alcohol(8)、1，3，6，7-tetrahy-droxyxanthone(9)、5，7，3'，4'-tetrahydroxy-2-methoxy-3，4-flavandione3-hydrate(10)、1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-2-［-4-(ω-hydroxypropyl-2-methoxy)-phenoxyl］-propane-1，3-diol(11)。其中化合物 7、8、10、11 為首次從該植物中分了得到，化合物10的波譜數(shù)據(jù)為首次報道。

1 材料與儀器

芒果葉于2009年6月3日采于元江傣族、彝族、哈尼族自治縣種植栽培基地，經云南中醫(yī)學院周志宏老師鑒定為元江三年芒芒果葉。

SHZ-D型循環(huán)水式真空泵(鞏義市英峪予華儀器廠);EYELA旋轉蒸發(fā)儀(日本東京理化器械株式會社);Bruker AM-400、DRX-500核磁共振光譜儀、DRX-600核磁共振光譜儀;VG Auto Spec-3000質譜儀;硅膠板G(青島海洋化工廠)，硅膠(200～300目);大孔吸附樹脂(MCI、D101)(日本三菱);Sephadex LH-20(Pharmacia化學公司);試劑為分析純或工業(yè)純(重蒸)。

2 提取與分離

干燥芒果葉約25 kg，粉碎，用水煮，過濾得濾液，水煮3次，合并濾液，減壓濃縮得浸膏1.2 kg。用蒸餾水將浸膏稀釋上大孔吸附樹脂柱(D101)，用甲醇/水梯度洗脫(甲醇比例從0% ～100%)，得7個組分，這7個組分經 MCI、硅膠、Sephadex LH-20柱層析及重結晶等方法得到11個化合物(圖1)，分別為化合物 1(413 mg)、2(153 mg)、3(15 mg)、4(11 mg)、5(8 mg)、6(16 mg)、7(102 mg)、8(22 mg)、9(68 mg)、10(82 mg)、11(27 mg)。

圖1 化合物1～11的化學結構Fig.1 Chemical structures of compound 1-11

3 結構鑒定

化合物1:淡黃色晶體;與芒果苷對照品用多個溶劑系統(tǒng)進行薄層鑒別，發(fā)現(xiàn)二者的薄層色譜Rf值一致;用硫酸-乙醇顯色，均顯黃色;用熒光顯色與芒果苷對照品顯色一致。確定化合物1為芒果苷。

化合物2:淡黃色針晶，分子式:C20H20O11;ESIMS m/z:437 ［M+H］+;1H NMR:(DMSO-d6，400 MHz)δ:13.66(1H，s，HO-1)，10.69(1H，s，HO-6)，9.88(1H，s，HO-7)，7.39(1H，s，H-8)，6.88(1H，s，H-5)，6.66(1H，s，H-4)，4.57(1H，d，J=9.6 Hz，H-1')，3.98(1H，m，H-3')，3.70/3.33(2H，m，H-6')，3.16(1H，m，H-5')，3.10(1H，m，H-2')，3.07(1H，m，H-4')，3.88(3H，s，CH3O-);13C NMR(DMSO-d6，100 MHz)δ:161.84(C-1)，108.9(C-2)，164.7(C-3)，90.2(C-4)，157.3(C-4a)，151.4(C-4b)，103.0(C-5)，154.7(C-6)，144.4(C-7)，108.5(C-8)，112.3(C-8a)，102.3(C-8b)，179.6(C=O)，73.1(C-1')，82.2(C-2')，70.8(C-3')，71.4(C-4')，79.6(C-5')，62.2(C-6')，56.7(CH3O)。以上數(shù)據(jù)與文獻［6］數(shù)據(jù)一致。故確定化合物2為高芒果苷。

化合物3:黃色晶體，分子式:C15H10O7;ESI-MS m/z:301［M-H］-;1H NMR(DMSO-d6，600 MHz)δ:12.50(1H，s，OH-5)，10.81(1H，s，OH-7)，9.62(1H，s，OH-4')，9.33(1H，s，OH-3)，9.33(1H，s，OH-3')，7.69(1H，s，H-2')，7.55(1H，d，J=8.5 Hz，H-6')6.92(1H，d，J=8.5 Hz，H-5')，6.52(1H，s，H-8)，6.20(1H，s，H-6);13C NMR(DMSO-d6，150 MHz)δ:156.8(C-2)，136.8(C-3)，176.9(C-4)，162.0(C-5)，98.9(C-6)，164.8(C-7)，94.2(C-8)，156.9(C-9)，104.2(C-10)，122.9(C-1')，115.8(C-2')，145.8(C-3')，147.6(C-4')，116.4(C-5')，120.9(C-6')。以上數(shù)據(jù)與文獻［7］報道數(shù)據(jù)一致，可確定化合物3為槲皮素。

化合物4:白色針晶，分子式:C7H6O5;EI-MS m/z:170［M］+;1H NMR(CD3OD，600 MHz)δ:6.90(2H，s，H-2/6)，8.79(1H，s，HO-4)，9.12(2H，s，HO-3/5)，12.16(1H，s，-COOH).13C NMR(CD3OD，150 MHz)δ:120.0(C-1)，108.7(C-2)，145.0(C-3)，138.4(C-4)，154.1(C-5)，108.7(C-6)，167.4(-COOH)。以上數(shù)據(jù)與文獻［8］報道數(shù)據(jù)一致，確定化合物4為沒食子酸。

化合物5:白色晶體，分子式:C7H6O4;EI-MS m/z:154［M］+;1H NMR(CD3OD，600 MHz)δ:12.19(1H，s，-COOH)，9.28(1H，s，HO-3)，9.23(1H，s，HO-4)，7.39(1H，d，J=2.3 Hz，H-2)，7.37(1H，dd，J=8.2 Hz，H-6)，6.69(1H，d，J=8.3 Hz，H-5);13C NMR(CD3OD，150 MHz)δ:122.8(C-1)，117.0(C-2)，145.9(C-3)，151.1(C-4)，115.0(C-5)，123.5(C-6)，169.8(-COOH)。以上數(shù)據(jù)與文獻［9］報到數(shù)據(jù)一致，故化合物5為原兒茶酸。

化合物6:無色晶體，分子式:C8H8O5;1H NMR(CD3OD，600 MHz)δ:9.10(2H，s，HO-3/5)，8.69(1H，s，HO-4)，6.89(2H，s，H-2/6)，3.70(3H，s，CH3-);13C NMR(CD3OD，150 MHz)δ:121.0(C-1)，109.9(C-2/6)，146.1(C-3/5)，139.2(C-4)，168.4(C=O)，48.9(CH3-)。以上數(shù)據(jù)與文獻［10］報道數(shù)據(jù)一致，確定化合物6為沒食子酸甲酯。

化合物7:白色粉末，分子式:C22H28O8;ESI-MS m/z:419［M-H］-;1H NMR(DMSO-d6，400 MHz)δ:4.24(1H，d，J=5.1 Hz，H-1)，1.85(1H，m，H-2)，1.45(1H，m，H-3)，2.59(1H，d，J=4.3 Hz，H-4)，6.55(1H，s，H-5)，6.28(2H，s，H-2'/6')，3.77(3H，s，CH3O-6)，3.63(6H，s，CH3O-3'/5')，3.46(3H，s，CH3O-4');13C NMR(DMSO-d6，100 MHz)δ:39.9(C-1)，46.7(C-2)，64.6(C-2a)，39.4(C-3)，62.2(C-3a)，32.3(C-4)，128.6(C-4a)，106.7(C-5)，146.9(C-6)，137.2(C-7)，137.8(C-8)，125.0(C-8a)，133.3(C-1')，146.4(C-4')，105.9(C-2'/6')，147.5(C-3'/5')，55.7(CH3O-6)，56.1(CH3O-3'/5')，58.9(CH3O-4')。以上數(shù)據(jù)與文獻［11］報道數(shù)據(jù)一致，故化合物7為lingueresinol。

化合物8:無色粘稠狀物質，分子式:C20H24O6;ESI-MS m/z:359 ［M-H］-;1H NMR(CD3OD，600 MHz)δ:6.94(1H，s，H-2)，6.75(1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，6.82(1H，d，J=8.1 Hz，H-6)，5.48(1H，d，J=6.2 Hz，H-7)，3.56(1H，q，J=6.2 Hz，H-8)，3.86(2H，H-9)，6.78(1H，s，H-2')，6.76(1H，s，H-6')，2.62(2H，t，J=7.2 Hz，H-7')，3.57(2H，m，H-9')，3.83(3H，s，CH3O)，3.84(3H，s，CH3O);13C NMR(CD3OD，150 MHz)δ:134.9(C-1)，110.5(C-2)，149.2(C-3)，147.6(C-4)，116.2(C-5)，119.8(C-6)，89.1(C-7)，55.6(C-8)，65.1(C-9)，129.9(C-1')，114.0(C-2')，145.3(C-3')，147.6(C-4')，137.0(C-5')，118.0(C-6')，36.0(C-7')，33.1(C-8')，62.3(C-9')，56.8(CH3O)，56.4(CH3O)。以上數(shù)據(jù)與文獻［12］報道一致，故化合物8 為 dihydrodehydrodiconiferyl alcohol。

化合物9:灰色粉末，分子式:C13H8O6;ESI-MS m/z:261［M+H］+;1H NMR(DMSO-d6，400 MHz)δ:13.15(1H，s，HO-1)，10.64(2H，s，HO-6/7)，7.54(1H，s，H-8)，6.81(1H，s，H-5)，6.31(1H，s，H-4)，6.14(1H，s，H-2);13C NMR(DMSO-d6，100 MHz)δ:163.1(C-1)，98.1(C-2)，165.1(C-3)，94.0(C-4)，103.1(C-5)，154.5(C-6)，144.2(C-7)，108.5(C-8)，157.8(C-4a)，151.4(C-4b)，112.2(C-8a)，102.0(C-8b)，179.3(C=O)。以上數(shù)據(jù)與文獻［13］報道一致，故化合物 9 鑒定為:1，3，6，7-tetrahydroxyxanthone。

化合物10:白色粉末，分子式:C16H14O9;ESI-MS m/z:373［M+Na］+;通過對DEPT譜圖和氫譜的分析，發(fā)現(xiàn)化合物10具有16個碳，包括1個伯碳、6個季碳、9個叔碳。結合13C-NMR譜圖，通過與文獻［14］報道的化合物IV的13C NMR譜圖信號進行對比，發(fā)現(xiàn)化合物10少了一個與氧相連的仲碳(-OCH2-)的信號峰，推測可能是文獻中化合物IV的2位碳上連接的是乙氧基(-OCH2CH3)，而化合物10的2位碳上連接的是甲氧基(-OCH3)，通過對化合物10的HMBC譜圖的分析發(fā)現(xiàn)δH:2.92(3H，s，CH3O)的信號僅與δC:106.8(C-2)的信號相關，進一步證實了上面的推測，再通過HMQC、HMBC、COSY和REOSY的驗證，確定化合物10為5，7，3'，4'-tetrahydroxy-2-methoxy-3，4-flavandione 3-hydrate?；衔?0的1H NMR及13C NMR數(shù)據(jù)如下。

1H NMR(DMSO-d6，400 MHz)δ:11.35(1H，s，HO-5)，10.91(1H，s，HO-7)，8.98(1H，s，HO-4')，8.93(1H，s，HO-3')，7.01(1H，s，H-2')，6.86(1H，d，J=7.9 Hz，H-6')，6.73(1H，d，J=8.1 Hz，H-5')，6.61(1H，s，HO-3)，6.36(1H，s，HO-3)，5.97(1H，s，H-8)，5.94(1H，s，H-6)，2.92(3H，s，CH3O);13C NMR(DMSO-d6，100 MHz)δ:194.8(C=O)，166.7(C-7)，163.1(C-5)，158.4(C-9)，145.9(C-4')，144.1(C-3')，124.1(C-1')，120.3(C-6')，116.7(C-2')，114.4(C-5')，106.8(C-2)，99.7(C-10)，96.3(C-6)，95.9(C-8)，90.7(C-3)，50.1(CH3O)。

化合物11:分子式:C20H26O7;EI-MS m/z:378［M］+;1H NMR(CD3OD，600 MHz)δ:1.77 ～1.81(2H，m，H-8')，2.58-2.61(2H，t，J=13.8 Hz，H-7')，3.54(2H，m，H-9')，3.85(2H，m，H-9)，4.30(1H，m，H-8)，3.79/3.82(6H，s，CH3O-3/3')，6.65-7.00(6H，Ar-H);13C NMR(CD3OD，150 MHz)δ:134.2(C-1)，114.0(C-2)，147.0(C-3)，147.3(C-4)，115.7(C-5)，121.1(C-6)，86.7(C-7)，74.2(C-8)，62.3(C-9)，138.2(C-1')，111.8(C-2')，148.8(C-3')，151.9(C-4')，119.7(C-5')，121.9(C-6')，35.7(C-7')，32.8(C-8')，62.3(C-9')，56.4(CH3O)，56.5(CH3O)。以上數(shù)據(jù)與文獻［15］報道一致，故化合物11鑒定為1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-2-［-4-(ω-hydroxypropyl-2-methoxy)-phenox-yl］-propane-1，3-diol。

致謝:文章中化合物的MS、NMR數(shù)據(jù)由中國科學院昆明植物研究所植物化學與西部植物資源持續(xù)利用國家重點實驗室儀器組測定。

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