咽炎顆粒藥效學(xué)的實(shí)驗(yàn)研究

凌 云，張 沂

咽炎顆粒是古方玄麥甘桔湯加減，主要由甘草、麥冬、玄參和桔梗等組成，具有清熱利咽、養(yǎng)陰解火的功效，經(jīng)系統(tǒng)臨床觀察，對(duì)急慢性咽炎具有顯著療效。因其組方合理，經(jīng)過幾十年的臨床驗(yàn)證，是治療急慢性咽炎的良藥[1]，經(jīng)過治療的患者無數(shù)，深受廣大患者的歡迎[2]。目前，咽炎顆粒已成為海軍總醫(yī)院自制制劑的一個(gè)拳頭產(chǎn)品，在院外亦很有影響。

咽炎為局部炎癥，炎癥和痰液刺激是急慢性咽炎的主要共同點(diǎn)。咽炎分為急性和慢性，大多數(shù)為慢性咽炎，但均以炎性為主，同時(shí)伴有局部痰液的刺激，因此治療本病的關(guān)鍵是祛痰和抗炎[3]。本實(shí)驗(yàn)研究通過小鼠酚紅分泌量，觀察咽炎顆粒的祛痰作用[4];用二甲苯所致小鼠耳廓腫脹和大鼠棉球肉芽腫形成[5]，對(duì)咽炎顆粒的祛痰、抗炎等藥效學(xué)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，為申報(bào)軍隊(duì)非標(biāo)準(zhǔn)制劑文號(hào)提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 藥品與試劑 咽炎顆粒為棕色顆粒劑，規(guī)格每袋10 g，海軍總醫(yī)院中藥制劑室提供，批號(hào)030916;陽性對(duì)照藥物為玄麥甘桔顆粒，北京京鐵華龍藥業(yè)有限責(zé)任公司提供，規(guī)格每袋10 g，批號(hào)030922;酚紅和二甲苯均為北京化工廠分析純。

1.1.2 動(dòng)物 昆明種小鼠，雄雌各半，一級(jí)BDW95007，體質(zhì)量 18～22 g;Wistar大鼠，雄雌各半，二級(jí)，BDW95012，體質(zhì)量180～220 g。動(dòng)物均由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào)為SCXK-(軍)2002-001。實(shí)驗(yàn)在軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心進(jìn)行，溫度25℃，12 h明暗交替，自由飲水及進(jìn)食，動(dòng)物室通風(fēng)良好。

1.2 方法

1.2.1 小鼠祛痰實(shí)驗(yàn) 小鼠隨機(jī)分養(yǎng)飼養(yǎng)盒中，稱質(zhì)量標(biāo)記后，分別給予不同劑量受試藥。咽炎顆粒分高(20 g/kg)、中(10 g/kg)、低(5 g/kg)劑量組和陽性對(duì)照藥(玄麥甘桔顆粒)組(10 g/kg)、空白對(duì)照組(蒸餾水)，共5組，每劑量組10只?？瞻讓?duì)照組每只小鼠蒸餾水10 g/kg灌胃，咽炎顆粒、玄麥甘桔顆粒用溫蒸餾水溶解后分別灌胃。給藥后30 min，各組均腹腔注射10%酚紅溶液0.2 ml/10 g;0.5 h后，處死小鼠，仰位固定，分離氣管;以注射器抽取5%NaHCO3液0.4 ml，經(jīng)氣管注入肺內(nèi)，抽洗3次，將抽洗液注入小試管。如此重復(fù)3次，將3次抽洗液合并，離心，備用。取離心后的紅色澄明抽洗液0.5 ml，加入1.5 ml 5%的NaHCO3液混勻，于UV751CW紫外可見分光光度計(jì)上，在546 nm波長處測(cè)定吸光度(A546nm)值，從酚紅標(biāo)準(zhǔn)曲線算出各A546nm值的相應(yīng)濃度。按公式計(jì)算各組呼吸道分泌液增加率(%)，呼吸道分泌液增加率(%)=[(給藥組酚紅濃度－空白組酚紅濃度)/空白組酚紅濃度]×100%。

1.2.2 小鼠二甲苯致炎實(shí)驗(yàn) 小鼠隨機(jī)分組，稱體質(zhì)量標(biāo)記后，分別給予不同劑量受試藥。咽炎顆粒分高(20 g/kg)、中(10 g/kg)、低(5 g/kg)劑量組和陽性對(duì)照藥(玄麥甘桔顆粒)組(10 g/kg)、空白對(duì)照組(蒸餾水)，共5組，每劑量組10只。咽炎顆粒、玄麥甘桔顆粒用溫蒸餾水溶解后灌胃，每天1次，連續(xù)3 d;最后1次給藥后45 min，將小鼠的右耳用二甲苯棉球接觸5 s;15 min后頸脫臼處死，用直徑6 mm打孔器取等面積左(自身對(duì)照)、右耳(二甲苯處理)稱質(zhì)量，觀察二甲苯致右耳廓腫脹程度(右耳質(zhì)量減去左耳質(zhì)量)及相應(yīng)變化百分率(%)，耳腫脹率(%)=[(右耳質(zhì)量－左耳質(zhì)量)/左耳質(zhì)量]×100%。

1.2.3 大鼠棉球肉芽腫實(shí)驗(yàn) 取大鼠30只，隨機(jī)分組，稱體質(zhì)量標(biāo)記后，用水合氯醛麻醉后，在無菌條件下作腹部切口，將10 mg滅菌棉球植入右側(cè)腹股溝皮下。手術(shù)當(dāng)日開始給藥，每天1次，連續(xù)7 d;第8天最后1次給藥后45 min將動(dòng)物斷頭處死，剝離取出棉球肉芽組織，置于60℃烘箱內(nèi)干燥12 h，稱質(zhì)量，減去棉花球質(zhì)量即為肉芽腫組織凈重，肉芽腫減少率(%)=[(對(duì)照組肉芽腫凈質(zhì)量－治療組肉芽腫凈質(zhì)量)/對(duì)照組肉芽腫凈質(zhì)量]×100%。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 用SAS 9.0統(tǒng)計(jì)軟件設(shè)計(jì)方差分析，組間比較采用t檢驗(yàn)進(jìn)行顯著性差異比較，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 咽炎顆粒對(duì)小鼠酚紅分泌的作用 咽炎顆粒的低劑量組雖對(duì)小鼠酚紅分泌量有一定的促進(jìn)作用，但與空白對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。咽炎顆粒中、高劑量組對(duì)小鼠酚紅分泌量有顯著的促進(jìn)分泌作用，與空白對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01);與玄麥甘桔顆粒組比較促分泌作用強(qiáng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。說明咽炎顆粒有確切的生津祛痰作用(表1)。

表1 各組對(duì)小鼠酚紅分泌量的作用(n=10)

2.2 咽炎顆粒對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的作用與空白對(duì)照組比較，咽炎顆粒對(duì)二甲苯所致小鼠右耳廓腫脹均呈劑量依賴性地減輕。5 g/kg咽炎顆粒有一定的抑制耳廓腫脹的作用，但與空白對(duì)照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);其中10 g/kg和20 g/kg咽炎顆粒組，比陽性對(duì)照藥玄麥甘桔顆粒組10 g/kg的作用相似或強(qiáng)，且與空白對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，表明咽炎顆粒對(duì)二甲苯所致的急性炎癥有顯著的抗炎作用(表2)。

2.3 咽炎顆粒對(duì)大鼠棉球肉芽腫形成的作用 7 d后咽炎顆粒對(duì)棉球肉芽腫的形成均有顯著地抑制作用，呈劑量依賴關(guān)系，肉芽腫凈質(zhì)量減少15.81%～48.15%，與陽性對(duì)照藥玄麥甘桔顆粒組有相同的作用，比玄麥甘桔顆粒作用強(qiáng)，與空白對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，表明咽炎顆粒對(duì)棉球所致的慢性炎癥有顯著的抗炎作用(表3)。

表2 各組對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹作用的影響(n=10)

表3 各組對(duì)大鼠棉球肉芽腫形成的影響

3 討論

咽炎屬于中醫(yī)的喉痹范疇，主要是指因邪毒侵襲或臟腑失調(diào)所致的咽部、肌膜病癥，包括急喉痹、慢喉痹等?！吨T病源候論·喉痛》認(rèn)為是“風(fēng)熱毒客于其間”，邪氣搏于臟氣，則生熱，熱乘其肺而搏咽喉”。因此后世對(duì)該病的治療偏重于清熱、通腑瀉熱。咽炎臨床上表現(xiàn)為咽部黏膜的急慢性炎癥，患者有咽喉干燥并有異物感。中醫(yī)辯證為虛火上炎、痰熱癥或熱毒壅阻咽喉。根據(jù)咽炎的發(fā)病機(jī)制和臨床癥狀，虛火和熱毒貫穿于本病始末。方中玄參、麥冬滋陰降火，養(yǎng)陰生津;甘草清熱解毒，消腫利咽。故筆者認(rèn)為在治療中必須以滋陰和利咽并重治療咽炎方可取得一定的療效。

咽炎顆粒對(duì)小鼠酚紅分泌量有顯著的促進(jìn)分泌作用，對(duì)二甲苯的致炎作用有顯著的對(duì)抗作用，對(duì)大鼠棉球肉芽腫形成有很好的抑制作用，說明該藥有良好的生津作用和抗炎作用。體外抑菌作用表明，玄參對(duì)金葡菌、白喉?xiàng)U菌、傷寒桿菌、乙型溶血性鏈球菌、綠膿桿菌、福氏痢疾桿菌、大腸桿菌等均有不同程度的抑制作用;桔梗所含的桔梗皂苷有非常顯著的祛痰作用，口服桔梗皂甙，可使呼吸道分泌液增加，祛痰作用可連續(xù)7 h以上;甘草中所含的甘草苷給小鼠皮下注射，能對(duì)抗巴豆油誘發(fā)的急性滲出性炎癥，對(duì)慢性肉芽組織增生的炎癥也有明顯抑制作用;麥冬多糖對(duì)恒定磁場(chǎng)輻射引起免疫力低下的小鼠白細(xì)胞下降具有較強(qiáng)的對(duì)抗作用[6]。諸藥合用，可抑制咽炎的細(xì)菌繁殖，起到生津和抗炎作用，提示該藥對(duì)急慢性咽炎有較好的治療作用。

本實(shí)驗(yàn)表明咽炎顆粒有明顯的祛痰和抗炎消腫作用，以上藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步驗(yàn)證了該藥治療急慢性咽炎的臨床療效，且顆粒制劑是有運(yùn)用靈活、攜帶方便、質(zhì)量可控不需煎煮等優(yōu)點(diǎn)，為進(jìn)一步的新藥開發(fā)提供了有力的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，從而為申報(bào)軍隊(duì)非標(biāo)準(zhǔn)制劑文號(hào)提供了依據(jù)。

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