基于射干鮮藥材的產(chǎn)地初加工工藝研究△

何艷君，曾建國(guó)，2，3，鐘曉紅，謝紅旗，3，黃云

(1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 園藝園林學(xué)院，湖南 長(zhǎng)沙 410128；2.湖南省中藥提取工程研究中心，湖南 長(zhǎng)沙 410331；3.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 國(guó)家中藥材生產(chǎn)(湖南)技術(shù)中心，湖南 長(zhǎng)沙 410128；4.湖南食品藥品職業(yè)學(xué)院，湖南 長(zhǎng)沙 410208)

基于射干鮮藥材的產(chǎn)地初加工工藝研究△

何艷君1，曾建國(guó)1，2，3，鐘曉紅1，謝紅旗1，3，黃云4*

(1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 園藝園林學(xué)院，湖南 長(zhǎng)沙 410128；2.湖南省中藥提取工程研究中心，湖南 長(zhǎng)沙 410331；3.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 國(guó)家中藥材生產(chǎn)(湖南)技術(shù)中心，湖南 長(zhǎng)沙 410128；4.湖南食品藥品職業(yè)學(xué)院，湖南 長(zhǎng)沙 410208)

目的：研究不同干燥方式對(duì)射干有效成分含量的影響，確定最佳干燥方式，為建立射干鮮藥材的產(chǎn)地初加工工藝提供依據(jù)。方法：采用HPLC法測(cè)定射干中次野鳶尾黃素的含量，對(duì)采收期的射干鮮藥材進(jìn)行曬干、陰干、55 ℃、85 ℃、105 ℃烘干5種干燥方式處理，比較不同干燥方式對(duì)指標(biāo)成分含量的影響，確定射干最佳初加工工藝。結(jié)果：曬干、陰干樣品中有效成分含量較鮮藥材有所下降，曬干樣品含量降低了27%，陰干樣品含量降低了9%；三種烘干方式對(duì)射干中次野鳶尾黃素含量的影響較小，其中以105 ℃烘干2 h效果為最佳，85 ℃次之。結(jié)論：研究表明105 ℃烘干2 h為射干最佳干燥方式；不同干燥方式對(duì)射干中次野鳶尾黃素的含量有較大影響，為最大程度保留鮮藥材有效成分及進(jìn)一步探討藥材指標(biāo)成分在不同初加工過(guò)程中的降解規(guī)律提供參考依據(jù)。

射干；次野鳶尾黃素；產(chǎn)地初加工

射干為鳶尾科lridaceae植物射干Belamcandachinensis(L.)DC.的干燥根莖[1]，具有清熱解毒、消痰，利咽之功效[2]。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外對(duì)射干進(jìn)行了大量的研究，進(jìn)一步闡明了射干臨床療效的內(nèi)在基礎(chǔ)。射干中的主要有黃酮類、三萜類、醌類以及酚類成分[3]。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，射干具有抗炎、抗病毒、抗真菌、抗過(guò)敏和促進(jìn)唾液分泌等作用[4]。研究表明射干中所含異黃酮類化合物是射干的主要抗炎成分[5]。射干是一種常用中藥，臨床作用主要是治療呼吸系統(tǒng)疾病，常與其它中藥配伍治療支氣管哮喘、扁桃體炎及小兒咳嗽等[6]。2010年版《中國(guó)藥典》規(guī)定，射干以次野鳶尾黃素為目標(biāo)成分。

2010年版《中國(guó)藥典》在藥材來(lái)源項(xiàng)中規(guī)定，射干于初春剛發(fā)芽或秋末莖葉枯萎時(shí)采挖，除去須根和泥沙進(jìn)行干燥，但曬干、陰干、烘干均為“干燥”，《中國(guó)藥典》中沒(méi)有明確規(guī)定其最佳干燥方式，類似的實(shí)例還有紅車軸草[7]、丹參[8]、當(dāng)歸[9]等多種中藥材。研究表明，干燥藥材中目標(biāo)成分的含量除了少數(shù)會(huì)增加外大多明顯低于鮮藥材，某些傳統(tǒng)藥材產(chǎn)地前處理加工方式造成了活性成分大量降解[10]。本研究以射干為目標(biāo)藥材，通過(guò)比較不同初加工方式對(duì)射干中指標(biāo)成分含量的影響，選擇最佳的初加工工藝，從而最大程度地保留射干鮮藥材中的活性成分，將最佳使用狀態(tài)的鮮藥材轉(zhuǎn)變?yōu)楦咂焚|(zhì)、可穩(wěn)定儲(chǔ)存的干藥材，達(dá)到高效、合理、高值化利用中藥材資源的目的。

1 儀器與材料

1.1 供試材料

二年生射干采自湖南共享現(xiàn)代農(nóng)業(yè)綜合開發(fā)有限公司的瀏陽(yáng)中藥材基地，經(jīng)湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝園林學(xué)院謝紅旗副教授鑒定為射干Belamcandachinensis(L.)DC.。

1.2 主要試劑

甲醇(色譜純、默克甲醇)；甲醇(分析純)；磷酸(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；水為Milli-Q超純水；次野鳶尾黃素對(duì)照品購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所(純度為98%)。

1.3 主要儀器

Agilent 1260 Series 高效液相色譜儀(G1311C 二元高壓梯度泵，G1329B 在線脫氣機(jī)，G1315D 二極管陣列檢測(cè)器，ChemStation化學(xué)工作站)；Xcharge C18 色譜柱(華譜新創(chuàng)科技有限公司)；AE240 型電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司)；KQ5200DE 型超聲波清洗器(昆山超聲儀器有限公司)；DHG-9246A型電熱恒溫干燥箱(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)；水浴鍋(榮華儀器制造有限公司)；FW100型高速萬(wàn)能粉碎機(jī)(天津市太斯特儀器有限公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1 檢測(cè)方法

2.1.1藥材中指標(biāo)成分的確定 射干中的主要成分有黃酮類、三萜類、醌類與酚類化合物，其中黃酮類化合物有鳶尾苷、野鳶尾苷、鳶尾苷元、野鳶尾苷元和次野鳶尾黃素，為射干中主要的5種異黃酮類化合物，目前對(duì)射干的藥效成分研究多集中于異黃酮類化合物。2005年版《中國(guó)藥典》中規(guī)定射干的目標(biāo)成分為射干苷，而2010年版《中國(guó)藥典》中其目標(biāo)成分修改為次野鳶尾黃素，綜合考慮射干中各化學(xué)成分的實(shí)用性和研究?jī)r(jià)值，本實(shí)驗(yàn)最終決定只以次野鳶尾黃素一個(gè)指標(biāo)成分作考察進(jìn)行基于射干鮮藥材的產(chǎn)地初加工工藝研究。

2.1.2藥材中指標(biāo)成分的檢測(cè) 參照2010年版《中國(guó)藥典》射干項(xiàng)[1]，色譜圖如下所示：

圖1 次野鳶尾黃素對(duì)照品(A)和射干鮮樣(B)的HPLC圖

2.2 樣品的預(yù)處理

將采挖回來(lái)的新鮮射干根莖去掉泥沙洗凈(保留部分須根)，趁鮮切片，混勻，隨機(jī)等分為6組，除鮮樣組外，其余均用不同干燥方式進(jìn)行干燥(表1)，干燥后粉碎，過(guò)65目篩；同時(shí)，將鮮樣組射干根莖和部分單獨(dú)保留的射干須根放入-80℃冰箱冷藏，備用。

表1 射干不同干燥方式及所需時(shí)間

2.3 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取次野鳶尾黃素對(duì)照品10.1 mg，置于10 mL容量瓶中，加甲醇超聲溶解稀釋并定容至刻度，配制成濃度為0.9898 mg·mL-1次野鳶尾黃素對(duì)照品溶液，即得。

2.4 供試品溶液的制備

2.4.1 鮮藥材供試品溶液的制備 取上述鮮樣組射干根莖適量于粉碎機(jī)中快速粉碎，精密稱取粉碎樣1 g于圓底燒瓶中，精密加入甲醇25 mL，稱重，加熱回流1 h，冷卻至室溫后補(bǔ)足提取中損失的溶劑量，搖勻，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液即得。

2.4.2 干藥材供試品溶液的制備 取不同加工方式得到的干藥材快速粉碎，精密稱取0.1 g藥材粗粉，精密加入甲醇25 mL，稱重，加熱回流1 h，冷卻至室溫后補(bǔ)足提取中損失的溶劑量，搖勻，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液即得。

2.4.3 線性范圍考察 從上述標(biāo)準(zhǔn)品溶液中分別精密吸取2.0 mL、1.0 mL、0.5 mL、200 μL、100 μL、20 μL，于6個(gè)10 mL容量瓶中，分別加甲醇定容至刻度，稀釋成不同質(zhì)量濃度的對(duì)照品溶液，進(jìn)樣測(cè)定。以峰面積(Y)為縱坐標(biāo)，質(zhì)量濃度(X)為橫坐標(biāo)繪制工作曲線，得線性回歸方程。次野鳶尾黃素：Y=43962X-25.451，r=1.000 0，說(shuō)明次野鳶尾黃素在0.002 0～ 0.198 0 mg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.5 樣品的測(cè)定

2.5.1 藥材中指標(biāo)成分的測(cè)定 將經(jīng)不同干燥方式處理后的射干制備供試品溶液，參照2010年版《中國(guó)藥典》射干項(xiàng)下次野鳶尾黃素HPLC測(cè)定條件，進(jìn)行測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算藥材折干后次野鳶尾黃素含量占干物質(zhì)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。

2.5.2 藥材中水分的測(cè)定 參照2010年版《中國(guó)藥典》第一部附錄Ⅸ H 項(xiàng)下第一法(烘干法)測(cè)定供試品的含水量。干燥品粉碎成直徑不超過(guò)3 mm 的碎片，測(cè)定時(shí)取樣量不低于3 g，平鋪于干燥至恒重的鋁盒中，厚度不超過(guò) 20 mm，在100～105 ℃干燥5 h，將鋁盒迅速移置干燥器中，冷卻至室溫，精密稱定重量，再干燥1 h 后冷卻，稱定重量，至連續(xù)兩次稱量的差異不超過(guò)5 mg 為止。根據(jù)減失的重量，計(jì)算含水量。

2.6 不同初加工方式下指標(biāo)成分含量的變化

采收二年生射干進(jìn)行產(chǎn)地初加工工藝研究，鮮藥材采摘后 4 h 內(nèi)作如下處理：除去須根的根莖分五組分別進(jìn)行：曬干(薄平攤在太陽(yáng)下直曬)、陰干(室內(nèi)干燥通風(fēng)處晾干)、55 ℃、85 ℃、105 ℃烘箱烘干，得到不同的干燥樣品制備供試品溶液，進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果顯示，測(cè)得新鮮射干中次野鳶尾黃素的百分含量為0.110(2010年版《中國(guó)藥典》中規(guī)定，按干燥品計(jì)算，射干中次野鳶尾黃素的百分含量不得小于0.10)；曬干樣品中次野鳶尾黃素的百分含量為0.090；陰干樣品中次野鳶尾黃素的百分含量為0.10；55 ℃烘干樣品中次野鳶尾黃素的百分含量為0.105；85℃烘干樣品中次野鳶尾黃素的百分含量為0.110；105 ℃烘干樣品中次野鳶尾黃素的百分含量為0.115。由此可知，不同干燥方式對(duì)射干中次野鳶尾黃素含量的影響比較大，其中曬干、陰干樣品中有效成分含量較鮮藥材有所下降，曬干樣品含量降低了27%，陰干樣品含量降低了9%；三種烘干方式對(duì)射干中次野鳶尾黃素含量的影響較小，其中105 ℃烘干效果為最佳，85℃烘干次之。結(jié)果見(jiàn)圖2。

圖2 同初加工方式下射干指標(biāo)成分含量比較

2.7 105 ℃烘干在不同時(shí)間段對(duì)指標(biāo)成分含量的影響

通過(guò)實(shí)驗(yàn)初步得出曬干、陰干、55 ℃、85 ℃、105 ℃烘干5種干燥方式中以105 ℃快速烘干為射干的最佳干燥方式，然而在含水量達(dá)標(biāo)的情況下(2010年版《中國(guó)藥典》規(guī)定射干藥材含水量不得超過(guò)10.0%)，為了能得到快速有效的干燥方式，考察同一溫度不同烘干時(shí)間對(duì)射干中次野鳶尾黃素含量的影響，從而得到最短時(shí)間最佳效果的105 ℃烘干方式。本實(shí)驗(yàn)在這基礎(chǔ)上進(jìn)一步研究了105 ℃烘干在2 h、2.5 h、3 h、3.5 h、4 h五個(gè)時(shí)間段下射干中次野鳶尾黃素含量的變化情況。研究表明在105 ℃烘干條件下不同烘干時(shí)間對(duì)射干有效成分含量存在一定影響，其中2～3 h的烘干都很好的保留了射干中的有效成分，再繼續(xù)延長(zhǎng)烘干時(shí)間，則發(fā)現(xiàn)射干中有效成分的含量發(fā)生了細(xì)微的變化，較短時(shí)烘干下的射干有效成分含量稍有降低，推測(cè)是過(guò)度高溫加熱破壞了具有熱敏性的部分射干鮮藥材中的有效活性成分導(dǎo)致。因此可得，105 ℃快速烘干2 h效果最佳，既節(jié)省時(shí)間又能很好的保留射干中的有效成分，故為最佳烘干時(shí)間。結(jié)果見(jiàn)圖3。

圖3 同時(shí)間段下105 ℃烘干中射干指標(biāo)成分含量比較

3 討論

2010年版《中國(guó)藥典》射干項(xiàng)中規(guī)定：“本品為鳶尾科植物射干的干燥根莖，于初春剛發(fā)芽或秋末莖葉枯萎時(shí)采挖，除去須根和泥沙進(jìn)行干燥”，其中確切說(shuō)明射干根莖的須根要去掉，然而在本研究中發(fā)現(xiàn)，新鮮射干須根中次野鳶尾黃素的含量高達(dá)0.81%，而新鮮根莖中的次野鳶尾黃素含量?jī)H有0.11%，結(jié)果可見(jiàn)圖4。由此可得，射干須根也含大量的有效成分，在初加工過(guò)程中不應(yīng)去除。

圖4 新鮮根莖(A)和新鮮須根(B)中次野鳶尾黃素的HPLC圖

2010年版《中國(guó)藥典》中射干的干燥方式并不明確，這種不經(jīng)意的干燥過(guò)程將會(huì)大大影響其指標(biāo)成分的含量，從而影響產(chǎn)地藥材真實(shí)質(zhì)量的表達(dá)。研究數(shù)據(jù)顯示，不同干燥方式對(duì)射干中次野鳶尾黃素含量的影響比較大，其中曬干、陰干后射干中次野鳶尾黃素的含量較鮮藥材有所下降，曬干后含量降低了27%，陰干后含量降低了9%；三種烘干方式對(duì)射干中次野鳶尾黃素含量的影響較小，較新鮮狀態(tài)下的射干含量無(wú)明顯差異，其中以105℃烘干2 h效果為最佳，85 ℃烘干次之?；邗r藥材的研究可充分表征藥材質(zhì)量，從藥材初加工源頭降低活性成分的損失，為最大程度保留鮮藥材活性成分及進(jìn)一步探討藥材指標(biāo)成分在不同初加工過(guò)程中的降解規(guī)律提供參考依據(jù)。

此外，射干是常用中藥材之一，市場(chǎng)需求量大，在中國(guó)很多地區(qū)都有分布，但由于不同地區(qū)采收加工習(xí)慣不同，從而導(dǎo)致市場(chǎng)上的射干產(chǎn)地初加工形式多樣，嚴(yán)重制約了中藥材的發(fā)展。為適應(yīng)國(guó)際市場(chǎng)的需求，實(shí)現(xiàn)其規(guī)?；纳a(chǎn)，減少射干中藥材之間的質(zhì)量差異，對(duì)其產(chǎn)地加工工藝實(shí)行標(biāo)準(zhǔn)化很有必要。本項(xiàng)基于射干鮮藥材的產(chǎn)地初加工工藝研究實(shí)驗(yàn)，確定了射干的最佳初加工方法，最大程度地保留了射干鮮藥材中的有效成分，可發(fā)揮射干的最大應(yīng)用潛能。因此，本研究不僅在藥材產(chǎn)地初加工方面為進(jìn)一步完善《中國(guó)藥典》提供了參考依據(jù)，同時(shí)對(duì)射干藥材標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)具有重要的指導(dǎo)意義。

[1] 中華人民共和國(guó)藥典委員會(huì).中國(guó)藥典2010年版第一部[M].中國(guó)醫(yī)藥科技出版社.2010：267-268.

[2] 孟軍華，劉合剛.射干的研究進(jìn)展[J].湖北中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2004，6(3)：49-50.

[3] 邱鷹昆，高玉白，徐碧霞，等.射干的化學(xué)成分研究[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，2006，41(15)：1133-1135.

[4] 吉文亮，秦民堅(jiān)，王崢濤，等.中藥射干的化學(xué)和藥理研究發(fā)展[J].國(guó)外醫(yī)藥·植物藥分冊(cè)，2000，15(2)：57-60.

[5] 鐘鳴關(guān)，旭俊，黃炳生，等.中藥射干現(xiàn)代研究發(fā)展[J].中藥材，2001，24(2)：904-907.

[6] Yan C，Chong MW，etal.Combination of HPLC chromatogram and hypoglycemic effect Identifies isoflavones as the principal active fraction of Belamcanda chinensis leaf extract in diabetes treatment[J].Journal of Chromatography B，2011，879：371-378.

[7] 劉晗，羅琪，歐陽(yáng)勇，等.紅車軸草的最佳采收期和前處理加工方法研究[J].中草藥，2007，38(12)：1821-1823.

[8] 鄧寒霜，高寶云，王新軍，等.干燥方法對(duì)中藥材丹參有效成分含量的影響[J].商洛學(xué)院學(xué)報(bào)，2007，21(2)：54-56.

[9] 呂潔麗，陳紅麗，段金廒，等.不同加工方法對(duì)當(dāng)歸多糖的影響[J].中國(guó)中藥雜志，2011，36(2)：846-849.

[10] 曾建國(guó).基于鮮藥材的中藥現(xiàn)代炮制技術(shù)[J].中草藥，2009，40(1)：1-5.

StudyonthePreliminaryProcessingTechnologiesBasedonFreshBelamcandaeRhizoma

HE Yan-jun1，ZENG Jian-guo1，2，3，ZHONG Xiao-hong1，XIE Hong-qi1，3，HUANG Yun4*

(1.Horticulture&LandscapeCollege，HunanAgriculturalUniversity，Changsha410128，China；2.HunanEngineeringResearchCenterofBotanicalExtraction，Changsha410331，China；3.NationalTechnicalCenter(Hunan)ofBotanicalProduction，HunanAgriculturalUniversity，Changsha410128，China；4.HunanFoodandDrugVocationalCollege，Changsha410128，China)

Objective：To study on the impact of different drying methods on the content of effective components fromBelamcandachinensis(L.)DC.，to determine the best drying methods，and proving a basis for establishing the preliminary processing technologies based on fresh Belamcandae rhizoma as well.Methods：HPLC was used to detect the content of irisflorentin fromBelamcandachinensis，and the processing methods including dried in the sun，dried in the shade，dried at 55 ℃，dried at 85 ℃，dried at 105 ℃，were used to determine the best preliminary processing technology，by comparing the content of mark components under different drying methods.Results：Different drying methods have different impacts on the content of irisflorentin.The contents of mark components from the samples that are dried in the sun and dried in the shade have decreased while compared with the fresh herbs，the sample dried in the sun has decreased by 27% and the sample dried in the shade 9% separately.Three stoving methods have less impact on irisflorentin，of which 105 ℃ is the best，85 ℃ followed.Conclusion：This study showed that the best drying method is drying two hours under 105 ℃.Different drying methods have different impacts to content of irisflorentin.The study provided a basis for retaining the effective components in fresh herbs at the maximum extent，and discussing degradation rule of the mark components in herbs under different preliminary processing.

Belamcandachinensis；Irisflorentin；Preliminary processing method

2013-08-16)

國(guó)家科技支撐計(jì)劃(No.2012BA129B04，No.SQ2010BAJY1411)

*

黃云，副研究員,研究方向:天然藥物研究與開發(fā),E-mail：HUyu5151@163.com