老年宮頸癌患者Bmi-1蛋白檢測(cè)的臨床意義

桂 影 黃志紅 王麗娟 (河南大學(xué)護(hù)理學(xué)院，河南 開封 475004)

宮頸癌是老年女性常見的一種惡性腫瘤，發(fā)生率僅次于乳腺癌〔1，2〕。腫瘤的發(fā)病機(jī)制極其復(fù)雜，目前仍不清楚，探明其發(fā)生、發(fā)展的機(jī)制可以為防治提供準(zhǔn)確的治療靶點(diǎn)〔3〕。多梳基因-1(Bmi-1)為多梳基因家族成員，研究顯示Bmi-1蛋白在多種實(shí)體腫瘤中高表達(dá)，參與了腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程，是一個(gè)新近發(fā)現(xiàn)的癌基因〔4，5〕，本研究觀察老年宮頸癌患者標(biāo)本中Bmi-1蛋白的表達(dá)及其相關(guān)的臨床意義。

1 材料與方法

1.1 臨床病例資料 2008年9月至2011年12月我院婦產(chǎn)科治療的老年宮頸癌患者宮頸組織標(biāo)本90例，均經(jīng)病理診斷證實(shí)，年齡60～79〔平均(71.4±5.9)〕歲。按照TNM分期分為Ⅰ(n=18)、Ⅱ(n=26)、Ⅲ(n=24)、Ⅳ(n=22)四期。另取30例我院因子宮良性病變切除的宮頸組織作為正常對(duì)照。

1.2 主要試劑 Bmi-1蛋白抗體購(gòu)自美國(guó)Cell Signalling公司，即用型SP免疫組化超敏試劑盒及DAB顯色試劑盒購(gòu)自深圳達(dá)科為生物科技有限公司。

1.3 Bmi-1蛋白的免疫組化染色 石蠟切片常規(guī)脫蠟，3%過(guò)氧化氫甲醇溶液室溫浸泡切片10～15 min，高壓修復(fù)抗原，1%小牛蛋白室溫孵育切片10～15 min封閉非特異性結(jié)合，1∶100稀釋Bmi-1蛋白抗體，4℃濕盒孵育過(guò)夜，二抗室溫孵育30 min，DAB試劑盒顯色，常規(guī)蘇木精復(fù)染，封片，鏡下觀察。染色陽(yáng)性判斷參照孟秀香等〔6〕的方法，簡(jiǎn)述如下:陽(yáng)性細(xì)胞于細(xì)胞核呈黃色或棕黃色，高倍鏡下隨機(jī)選擇5個(gè)視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，陽(yáng)性細(xì)胞≥10%為陽(yáng)性表達(dá)，＜10%則判定為陰性表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 Bmi-1蛋白在宮頸癌組織中的表達(dá) Bmi-1蛋白陽(yáng)性染色主要定位于細(xì)胞核，宮頸癌及正常組織中均可檢測(cè)到Bmi-1蛋白的表達(dá)，Bmi-1蛋白在宮頸癌組織中的陽(yáng)性率〔62例(68.9%)〕，明顯高于正常對(duì)照組〔7例(23.3%)〕(P＜0.01)。

2.2 宮頸癌組織中Bmi-1蛋白表達(dá)與臨床病理指標(biāo)的關(guān)系Bmi-1蛋白的表達(dá)與患者的年齡無(wú)相關(guān)性(P＞0.05)，而與腫瘤的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床TNM分期之間存在顯著相關(guān)性(P＜0.05)。見表1。

表1 宮頸癌患者不同臨床病理指標(biāo)中Bmi-1蛋白率的比較〔n(%)〕

3 討論

研究宮頸癌的發(fā)病機(jī)制，明確相關(guān)致病基因，有利于宮頸癌的早期診斷和預(yù)后判斷〔7〕。腫瘤的發(fā)生、發(fā)展是一個(gè)逐步的多階段的過(guò)程，與癌基因的激活與抑癌基因的失活密切相關(guān)，Bmi-1基因是幾年來(lái)在協(xié)同c-myc原癌基因轉(zhuǎn)化細(xì)胞導(dǎo)致腫瘤形成過(guò)程中發(fā)現(xiàn)的一個(gè)新的癌基因，進(jìn)一步的研究顯示其與人類的多種腫瘤密切相關(guān)，例如胃癌、肺癌、乳腺癌等，并且在一些腫瘤中可以預(yù)示患者的預(yù)后〔8〕，本研究提示Bmi-1蛋白可能參與宮頸癌的致病過(guò)程。Bmi-1蛋白調(diào)控細(xì)胞增殖的機(jī)制主要是下調(diào)抑癌基因p16和p14，使細(xì)胞G1-S期檢測(cè)點(diǎn)的功能喪失，從而導(dǎo)致細(xì)胞惡性克隆性增生。張愛榮等〔9〕在胃癌中的研究顯示Bmi-1蛋白參與了胃癌的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程，并且在胃癌的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移及預(yù)后等方面發(fā)揮著重要的影響。本研究提示Bmi-1蛋白在宮頸癌的惡性程度判定上是一個(gè)敏感指標(biāo)，且可以作為評(píng)估患者預(yù)后的一個(gè)檢測(cè)指標(biāo)。Zhang等〔10〕使用基因檢測(cè)Bmi-1 mRNA在宮頸癌中的表達(dá)變化，也發(fā)現(xiàn)了Bmi-1對(duì)宮頸癌的診斷和預(yù)后具有一定的參考價(jià)值，具體Bmi-1蛋白在宮頸癌中表達(dá)上調(diào)的機(jī)制以及其所影響的下游靶基因都還有待進(jìn)一步的研究。

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