鈀作為基體改進(jìn)劑在石墨爐原子吸收光譜法測定尿鉛中的應(yīng)用

郭防

尿鉛是診斷職業(yè)性鉛中毒的一個重要指標(biāo)，也是職業(yè)性鉛接觸的健康監(jiān)護(hù)指標(biāo)[1]。其主要測定方法是雙硫腙分光光度法和石墨爐原子吸收光譜法[2]。雙硫腙分光光度法操作繁瑣，靈敏度低、試劑干擾大、分析周期長，不適用于鉛的生物監(jiān)測。石墨爐原子吸收光譜法直接吸入尿樣測定，雖方便快捷、靈敏度高[3]，但尿樣基體復(fù)雜，有機質(zhì)含量較高，測定干擾大。加入基體改進(jìn)劑可解決干擾問題[4]，基體改進(jìn)劑有磷酸銨鹽、鈀鹽、抗壞血酸等，本文用氯化鈀為基體改進(jìn)劑，用石墨爐原子吸收光譜法對尿鉛進(jìn)行測定研究。

1 材料與方法

1.1 材料 儀器：GFA-6500石墨爐原子化器，ASC-6500自動進(jìn)樣器，控溫電爐，鉛空心陰極燈。試劑包括1 mg/ml鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液（國家標(biāo)準(zhǔn)開發(fā)公司提供），硝酸（GR，深圳華祥化工有限公司提供，批號：7664-38-2），氯化鈀（常州亞朗化工有限公司，批號：8206-11-5），水（超純水）。

1.2 方法

1.2.1 鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液和基體改進(jìn)劑配制 鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液：用l%硝酸逐級稀釋l mg/ml的鉛標(biāo)準(zhǔn)液至1 μg/ml?；w改進(jìn)劑配制：稱取0.33 g氯化鈀粉末放入容量杯，投入10 ml硝酸（優(yōu)級純硝酸）中并加微熱，用水稀釋至500 ml，該溶液即為500 mg/L的鈀溶液，用此基本改進(jìn)劑可稀釋成鉛的標(biāo)準(zhǔn)系列。

1.2.2 儀器條件 燈電流10 mA，波長283.3 nm，狹縫0.5 nm。干燥溫度（斜坡）80～120 ℃，30 s、120～200 ℃，20 s，灰化溫度600 ℃，30 s，原子化溫度2300 ℃，5 s，消除溫度2700 ℃，7 s，載氣：氬，流速為200 ml/min。

1.2.3 樣品制備 用一次性塑料杯收集一次尿樣150 ml，取少量尿液測定比重后，棄去，按1%比例加入硝酸混勻待測。低溫保存，3 d內(nèi)測定完畢。

1.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線配制見表1。

表1 鉛的標(biāo)準(zhǔn)系列

1.2.5 非接觸尿鉛標(biāo)準(zhǔn)線繪制（尿鉛含量低于80 μg/L）將人尿樣按其比重分3個區(qū)間，標(biāo)準(zhǔn)1：尿比重≤1.016，標(biāo)準(zhǔn)2：尿比重1.016～1.028，標(biāo)準(zhǔn)3：尿比重>1.028，在每個區(qū)間內(nèi)取3份以上尿樣混勻。取混合尿樣0.4 ml，各加入標(biāo)準(zhǔn)系列溶液0.4 ml，并混勻，按表1的條件進(jìn)行測定。用測得各管的吸光度值和0管的吸光度值差值，與其鉛濃度繪制鉛標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)1，標(biāo)準(zhǔn)2，標(biāo)準(zhǔn)3三個區(qū)間分別繪制一條曲線。

1.2.6 鉛接觸尿鉛標(biāo)準(zhǔn)曲線測定（尿鉛含量高于80.00 μg/L）取0.15 ml正常人尿樣，加入0.45 ml鉛標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，1%硝酸0.3 ml，混勻后按上述的方法繪制一條曲線。

1.2.7 尿樣分析 非接觸組取0.4 ml基體改進(jìn)劑于小塑料進(jìn)樣管內(nèi)，在取0.4 ml尿樣放入混勻。同時制備空白管，改進(jìn)劑0.4 ml，加入1%的硝酸0.4 ml，混勻，按照標(biāo)準(zhǔn)曲線條件，測定尿樣吸光度。尿樣吸光度與空白吸光度差值，查各自比重區(qū)間的標(biāo)準(zhǔn)曲線，所得濃度即為尿樣中鉛的濃度。接觸組取尿樣0.15 ml，加入基體改進(jìn)劑0.45 ml和1%硝酸0.3 ml，混勻。同時制備空白管，加入基體改進(jìn)劑0.45 ml，1%硝酸0.45 ml，混勻，按非接觸組計算方法求得尿樣中鉛的濃度。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 17.0軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)錄入與統(tǒng)計分析，等級資料采用秩和檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 線性范圍和檢出限 按上述實驗方法，對標(biāo)準(zhǔn)1，標(biāo)準(zhǔn)2，標(biāo)準(zhǔn)3 三個區(qū)間的標(biāo)樣進(jìn)行測定，以光密度X對各標(biāo)準(zhǔn)系列濃度Y（μg/L）求回歸方程，三個區(qū)間標(biāo)準(zhǔn)曲線分別為：標(biāo)準(zhǔn)1區(qū)間：Y=0.746X+0.04816（r=0.9999），得出鉛的最低檢出濃度2.0 μg/L。標(biāo)準(zhǔn)2區(qū)間：Y=0.988X-0.03418（r=0.9999）得出鉛的最低檢出濃度2.0 μg/L。標(biāo)準(zhǔn)3區(qū)間：Y=0.948X+0.05346（r=0.9999），得出鉛的最低檢出濃度2.0 μg/L。

2.2 精密度實驗 取尿樣1、尿樣2連續(xù)檢測10次，計算精密度，尿樣1的10次測定結(jié)果分別為25.65，27.49，28.53，27.82，25.94，27.26，25.57，27.88，25.18，26.13 μg/L，平均尿鉛濃度為（26.75±1.19）μg/L，RSD為5.27%，尿樣2的10次測定結(jié)果分別為 71.26，72.45，73.46，75.05，73.21，74.41，72.07，74.62，74.17，71.66 μg/L，平均尿鉛濃度為（73.24±1.33）μg/L，RSD為 3.47%， 本 法 的 RSD為3.47%～5.27%。結(jié)果顯示此檢測方法精密度較好。

2.3 準(zhǔn)確度實驗分析結(jié)果見表2。

表2 準(zhǔn)確度試驗分析

取尿鉛標(biāo)樣ZK103-1，ZK103-2（中國疾控中心職業(yè)衛(wèi)生與中毒控制所提供），連續(xù)檢測3次，尿鉛標(biāo)樣ZK103-1給定值為82.00 μg/L，實際測得值為80.60 μg/L，相對誤差為1.70%，尿鉛標(biāo)樣ZK103-2給定值為221.00 μg/L，實際測得值為217.76 μg/L，相對誤差為1.41%。

2.4 應(yīng)用 用本法測得縣內(nèi)某蓄電池廠95名工人和95名正常人群尿鉛，見表3。

表3 不同人群尿鉛濃度頻數(shù)分布 例

表3結(jié)果說明，該檢測方法適用于不同人群尿鉛含量。

3 討論

通過精密度和準(zhǔn)確度比較實驗，本法本法的RSD為3.47%～5.27%，回收率97.63%～102.27%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于2.0%，最低檢出濃度為2 μg/L，說明該法操作簡便、分析速度快、靈敏度高、準(zhǔn)確度好?；w改進(jìn)劑可用磷酸銨鹽類或氯化鈀，兩者均可改變待測元素對溫度的穩(wěn)定性，提高其揮發(fā)溫度，促使基體成分揮發(fā)，達(dá)到消除尿樣本身基體干擾的作用。磷酸銨鹽類在灰化溫度提高到500 ℃左右時，就不能克服基體的干擾，而氯化鈀可與鉛形成穩(wěn)定的絡(luò)合物，即使灰化溫度提高到1200 ℃，鉛也不易損失。而尿樣中大部分干擾物質(zhì)在這個溫度下已被清除[5]。因此使用氯化鈀作基體改進(jìn)劑靈敏度更高，同時測定結(jié)果準(zhǔn)確度也更高。

[1] 孫華，任韌.尿中鉛測定的氫化物發(fā)生原子熒光光譜法[J].中國勞動衛(wèi)生職業(yè)病雜志，2004，22（4）：302-303.

[2] 丁慶明，王輝，張相林.石墨爐原子吸收光譜法測定尿鉛[J].中日友好醫(yī)院學(xué)報，2007，21（1）：57-58.

[3] 蘇冬梅，崔明煊.關(guān)于尿鉛和血鉛測定中幾個問題的討論[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2004，14（2）：250.

[4] 李擁軍，孫建云.石墨爐原子吸收光譜法測定尿樣中鉛[J].理化檢驗：化學(xué)分冊，2008，44（4）：357-358.

[5] GB/T5009.12-2003食品中銅的測定[S].2003：35.