FLT3-ITD基因突變與急性白血病的臨床研究

徐玉秀 張勇剛 許春玲

人FLT3作為Ⅲ型酪氨酸激酶受體家族成員中的原癌基因，存在于細(xì)胞膜上，正常情況下，F(xiàn)LT3表達(dá)僅限于CD34+干/祖細(xì)胞［1］。有報(bào)道稱，急性白血病的發(fā)生、發(fā)展，與FLT3基因異常表達(dá)有關(guān)［2］。人Fms樣酪氨酸激酶3內(nèi)部串聯(lián)重復(fù)基因突變(Fms-like tyrosine kinase 3 intenal tandem duplication，F(xiàn)LT3-ITD)是FLT3近膜區(qū)的突變形式［3］。本研究中，通過聚合酶鏈反應(yīng)-變性高效液相色譜法，檢測駐馬店市中心醫(yī)院35例急性白血病患者和35例健康體檢者骨髓FLT3-ITD基因突變情況，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院治療的35例急性白血病患者為觀察組和35例同期健康體檢者為對照組，35例對照組中，男18例，女17例，年齡19.0～74.0歲;35例觀察組中，男19例，女16例，年齡18.0～73.0歲。在年齡、性別方面，兩組沒有明顯差異，具有可比性。

1.2 檢測方法 通過聚合酶鏈反應(yīng)-變性高效液相色譜法，檢測骨髓FLT3-ITD基因突變情況。取骨髓液大約2 ml，采用promega公司DNA提取試劑盒，提取總DNA，應(yīng)用primer express V2.0軟件，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，分析PCR產(chǎn)物的異常圖譜形態(tài)，純化后進(jìn)行測序，分析FLT3-ITD序列。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，進(jìn)行分析和處理，計(jì)量資料以(±s)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料率的比較，采用卡方檢驗(yàn)，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組FLT3/ITD基因突變檢測情況 與對照組相比，觀察組陽性率明顯升高，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，詳細(xì)結(jié)果見表1。

表1 兩組FLT3/ITD基因突變檢測情況(例，%)

2.2 急性白血病患者FLT3-ITD突變陽性患者的臨床特征35例急性白血病患者中，7例FLT3-IDT基因突變陽性，其中4例女性，3例男性，在性別方面，沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;7例FLT3-IDT基因突變陽性患者中，老年患者6例，非老年患者1例，在年齡方面，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(卡方值為4.56，P＜0.05)。

2.3 急性白血病患者FLT3-ITD突變陽性與陰性患者外周血和骨髓檢查結(jié)果比較 與陰性患者相比，觀察FLT3-ITD突變陽性患者外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞比例均明顯升高，P＜0.05，詳細(xì)結(jié)果見表2。

表2 急性白血病患者外周血和骨髓檢查結(jié)果比較(±s)

表2 急性白血病患者外周血和骨髓檢查結(jié)果比較(±s)

組別 例數(shù) 外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)(×109/L)骨髓白血病細(xì)胞比例(%)突變陽性7＜0.05 ＜0.05 24.5±1.5 73.7±17.2突變陰性 28 13.3±0.9 59.3±16.6 T值 2.18 2.34 P值

2.4 急性白血病患者FLT3-ITD突變陽性與陰性患者治療效果比較 與陰性患者相比，觀察組FLT3-ITD突變陽性患者完全緩解率顯著降低，P＜0.05，詳細(xì)結(jié)果見表3。

表3 急性白血病患者治療效果比較(例，%)

3 討論

正常情況下，機(jī)體維持正常的酪氨酸激酶磷酸化平衡，但在急性白血病患者體內(nèi)，酪氨酸激酶持續(xù)活化，繼而導(dǎo)致FLT3-ITD突變［4］。據(jù)報(bào)道，19.3% ～33.0%急性白血病患者存在FLT3-ITD突變［5］。本研究中，與對照組相比，觀察組陽性率明顯升高，P＜0.05，說明FLT3-ITD基因突變與急性白血病的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。

本研究中，F(xiàn)LT3-IDT基因突變與性別無關(guān)，與年齡有關(guān)，隨著年齡增高，其突變率越高，說明FLT3-IDT基因突變可能與急性白血病的預(yù)后有關(guān)。并且，與陰性患者相比，觀察FLT3-ITD突變陽性患者外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞比例均明顯升高，完全緩解率顯著降低，P＜0.05，結(jié)果充分說明FLT3-ITD基因突變陽性患者對化療藥物的敏感性不高，存在耐藥性，其預(yù)后相對較差。綜上所述，F(xiàn)LT3-ITD基因突變可作為急性白血病診斷和治療的參考指標(biāo)，值得臨床推廣。

［1］ 徐兵．老年人急性髓系白血病FLT3/ITD基因突變的檢測及臨床意義．實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2009，19(12):1310-1311．

［2］ 王云貴．FLT3基因表達(dá)水平及內(nèi)部串聯(lián)重復(fù)突變與急性髓系白血病的關(guān)系及臨床意義．中華血液學(xué)雜志，2010，29(11):741-745．

［3］ 黃晶．PCR-SSCP檢測急性髓系白血病患者FLT3基因及FLT3/ITD基因突變．中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2009，13(8):1090-1092．

［4］ 劉寧．急性白血病FLT/ITD、C-Kit基因突變預(yù)后相關(guān)性的研究．中外醫(yī)學(xué)研究，2011，15(9):28-30．

［5］ 王莉紅．FLT3基因內(nèi)部串聯(lián)重復(fù)突變與急性白血病的關(guān)系及臨床意義．中華血液學(xué)雜志，2008，25(7):393-396．