張黎 楊艷
茶多糖就是從茶葉中提取的茶葉多糖復(fù)合物的簡(jiǎn)稱。分離純化后茶多糖紫外吸收?qǐng)D譜表明,茶多糖存在蛋白質(zhì),即茶多糖中多糖與蛋白質(zhì)呈緊密結(jié)合態(tài),因此其化學(xué)本質(zhì)是一類與蛋白質(zhì)結(jié)合在一起的酸性多糖或酸性糖蛋白。茶新梢的粗老葉中含量最高好[1]。近年來(lái)一些藥理研究表明,茶多糖具有抗氧化[2]、降血糖[3]、降血脂[4]、調(diào)節(jié)免疫和抗腫瘤[5]、降血壓[6]、抗輻射[7]、抗凝血[8]、抗疲勞[9]等作用。本文采用鏈尿菌素誘導(dǎo)高血糖小鼠模型,研究茶多糖對(duì)高血糖小鼠的降血糖降血脂的作用,初步探討其降血糖的作用機(jī)制。
1.1 材料
1.1.1 動(dòng)物 健康清潔級(jí)雄性ICR小鼠(22~24 g),由四川大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
1.1.2 藥物與試劑 鏈脲菌素(sigma);血糖試劑盒(ONETOUCH);血清總膽固醇、甘油三酯/肝糖原含量測(cè)試試劑盒(南京建成)。茶多糖自制。
1.2 方法
1.2.1 高血糖模型的制備[10]動(dòng)物自由攝食預(yù)養(yǎng)5 d,小鼠禁食不禁水12 h后,隨機(jī)抽取10只小鼠設(shè)為正常對(duì)照組,給予尾靜脈注射枸櫞酸磷酸緩沖液,其余小鼠尾靜脈注射鏈尿菌素枸櫞酸磷酸緩沖液130 mg/kg,于注射5 d后小鼠禁食不禁水12 h后尾靜脈血糖試紙測(cè)血糖,以血糖值不低于11.1 mmol/L作為造模成功的標(biāo)準(zhǔn)。
1.2.2 分組和給藥 造模成功后,除正常對(duì)照組外,其余小鼠按血糖值平均分為4組,每組10只,分別為高血糖模型組、茶多糖高、低劑量組和二甲雙胍組。正常對(duì)照組及高血糖模型組均灌胃給予等量生理鹽水,茶多糖高、低劑量組分別灌胃給予茶多糖400 mg/kg、200 mg/kg,二甲雙胍組灌胃給予150 mg/kg,所有小鼠給予均為1次/d,連續(xù)給藥4周。
1.2.3 實(shí)驗(yàn)指標(biāo)測(cè)定 給藥至14、28 d時(shí),禁食不禁水12 h,取尾部靜脈血測(cè)量空腹血糖;給藥28 d后,禁食不禁水12 h,腹腔注射10%水合氯醛400 mg/kg麻醉,心臟采血,分離血清,測(cè)定血清總膽固醇及甘油三酯;再剖腹取全肝,保存至-20℃,備用,屆時(shí)按試劑盒說(shuō)明書(shū)測(cè)定肝糖原。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,采用SPSS 18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 茶多糖對(duì)小鼠空腹血糖的影響 分別取給藥前、給藥第14 d、28 d空腹血糖值作統(tǒng)計(jì),見(jiàn)表1。與正常對(duì)照組比較,高血糖模型組、茶多糖高、低劑量組、二甲雙胍組小鼠空腹血糖無(wú)論在給藥前,還是給藥第14 d、28 d均顯著的高于正常對(duì)照組(P<0.01);與高血糖模型組比較,茶多糖低、高劑量組及二甲雙胍組在給藥第28 d時(shí)均能顯著性的降低高血糖小鼠空腹血糖(P<0.05,P<0.01);另外,在給藥第14 d,茶多糖高劑量組及二甲雙胍組的小鼠空腹血糖與高血糖模型組比較,已顯著的下降(P<0.05,見(jiàn)表1)。
2.2 茶多糖對(duì)小鼠血清膽固醇、甘油三酯含量的影響 測(cè)定給藥第28 d小鼠血清膽固醇、甘油三酯含量,做統(tǒng)計(jì),結(jié)果見(jiàn)表2。與正常對(duì)照組比較,高血糖模型組、茶多糖高、低劑量組、二甲雙胍組小鼠血清膽固醇和甘油三酯無(wú)論在給藥前,還是給藥第14 d、28 d均顯著的高于正常對(duì)照組(P<0.01);與高血糖模型組比較,茶多糖高劑量組能降低血清膽固醇、甘油三酯的含量(P<0.01,P<0.05),二甲雙胍組能顯著的降低血清總膽固醇(P<0.05,見(jiàn)表2)。
表1 茶多糖對(duì)空腹血糖的影響(± s,n=10)
表1 茶多糖對(duì)空腹血糖的影響(± s,n=10)
注:與正常對(duì)照組比較##P<0.01;與高血糖模型組比較*P<0.05,**P<0.01
images/BZ_84_236_306_2240_405.png4.2±1.2 4.3±1.1 4.4±1.2高血糖模型組 - 13.9±2.4## 16.4±3.1## 19.3±3.1##茶多糖高劑量組 400 13.7±2.2## 14.6±2.1##* 15.8±2.3##**茶多糖低劑量組 200 13.2±2.4## 15.6±2.6## 17.3±2.8##*二甲雙胍組 150 13.6±2.3## 13.8±2.5##* 14.1±2.1##**正常對(duì)照組-
表2 茶多糖對(duì)小鼠血清膽固醇、甘油三酯含量的影響( ± s,n=10)
表2 茶多糖對(duì)小鼠血清膽固醇、甘油三酯含量的影響( ± s,n=10)
注:與正常對(duì)照組比較##P<0.01;與高血糖模型組比較*P<0.05,**P<0.01
images/BZ_84_236_784_2240_834.png2.7±1.0 0.9±0.3高血糖模型組 - 5.1±1.7## 2.2±0.8##茶多糖高劑量組 400 3.7±1.2##** 1.7±0.7##*茶多糖低劑量組 200 4.6±1.7## 1.8±0.5##二甲雙胍組 150 3.9±1.5##* 2.0±0.5正常對(duì)照組-##
2.3 茶多糖對(duì)小鼠肝糖原含量的影響 將小鼠給藥第28 d肝糖原數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),見(jiàn)表3。與正常對(duì)照組比較,高血糖模型組、茶多糖高、低劑量組、二甲雙胍組小鼠肝糖原均低于正常組(P<0.01);與高血糖模型組比較,各組均能升高肝糖原含量,其中茶多糖高劑量組與二甲雙胍組升高肝糖原具有顯著性意義(P<0.01,見(jiàn)表3)。
表3 茶多糖對(duì)小鼠肝糖原含量的影響( ± s,n=10)
表3 茶多糖對(duì)小鼠肝糖原含量的影響( ± s,n=10)
注:與正常對(duì)照組比較##P<0.05;與高血糖模型組比較**P<0.01
images/BZ_84_236_1550_1198_1600.png32.0±5.3高血糖模型組 - 13.0±2.7##茶多糖高劑量組 400 19.2±2.2##**茶多糖低劑量組 200 14.6±2.7##二甲雙胍組 150 22.6±5.5##**正常對(duì)照組-
本文采用鏈脲菌素誘導(dǎo)造成高血糖小鼠模型研究茶多糖降血糖作用,初步探討其降血糖的作用機(jī)制。較多的文獻(xiàn)報(bào)道茶多糖降血糖作用,如陳建國(guó)等[11]報(bào)道茶多糖對(duì)糖尿病小鼠的血清胰島素、肝糖原含量顯著提高,肝HK、肝PK活力均明顯增強(qiáng),胰島細(xì)胞與肝細(xì)胞損傷得到明顯的修復(fù),使得胰島B細(xì)胞分泌胰島素增加,肝臟合成肝糖原增加,葡萄糖氧化分解加快,從而降低血糖。芮莉莉等[12]發(fā)現(xiàn)茶多糖能顯著改善小鼠葡萄糖耐量,降低血糖、血清胰島素、血清甘油三酯和果糖胺水平,升高肝糖原。本文研究結(jié)果表明茶多糖能顯著性降低給藥第14 d、28 d空腹血糖及血清總膽固醇、甘油三酯含量,提高肝糖原含量。
因此,本文研究表明茶多糖對(duì)鏈脲菌素誘導(dǎo)的高血糖小鼠具體一定的降血糖降血脂的作用,其可能的作用機(jī)制是增加肝糖原含量有一定的關(guān)系,但具體如何提高肝糖原含量還待進(jìn)一步研究。
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