豬圓環(huán)病毒2型引起急性肺水腫新癥狀

許瑞

（駐馬店市動物疫病預(yù)防控制中心，河南駐馬店 463000）

豬圓環(huán)病毒2型引起急性肺水腫新癥狀

許瑞

（駐馬店市動物疫病預(yù)防控制中心，河南駐馬店 463000）

豬圓環(huán)病毒（PCV）是迄今發(fā)現(xiàn)的最小動物病毒之一，現(xiàn)已知PCV有兩個血清型，即PCV-1和PCV-2。PCV-1為非致病性的病毒，PCV-2為致病性的病毒。PCV-2是斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）的主要病原，PMWS最早發(fā)現(xiàn)于加拿大。最近在美國有學(xué)者報道，豬圓環(huán)病毒出現(xiàn)一種新的表現(xiàn)癥狀，稱為急性肺水腫型(APE），它主要影響剛出生和剛斷奶的小豬，死亡率可達20%，臨床癥狀包括急性呼吸困難隨后導(dǎo)致迅速死亡，有的豬通常死亡前未見任何臨床癥狀。下面筆者就在美國發(fā)生的急性肺水腫型圓環(huán)病毒病做一下介紹，供大家參考。

一、APE豬的主要臨床癥狀和病理學(xué)變化

2009年，有學(xué)者報道，在美國中西部，免疫過圓環(huán)2型疫苗的豬出現(xiàn)了急性肺炎癥狀，主要發(fā)病豬為剛出生和剛斷奶的小豬。臨床癥狀包括急性呼吸困難、喘氣，隨后導(dǎo)致迅速死亡，皮膚也沒有變化，有的豬通常死亡前未見臨床癥狀。我們知道，一般情況下豬圓環(huán)病毒2型（PCV-2）與豬群中發(fā)生的許多疾病密切相關(guān)，主要引起斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）、豬皮炎與腎病綜合征（PDNS）、斷奶豬和育肥豬的呼吸道病綜合征（PRDC）、幼齡仔豬的先天性震顫等疾病，統(tǒng)稱為圓環(huán)病毒相關(guān)疾?。≒CVAD），同時可造成免疫抑制。而這種急性肺炎導(dǎo)致迅速死亡的現(xiàn)象很容易與其他呼吸道病相混淆，進而造成誤診。

解剖APE豬，其病理變化主要為肺部病變，顯示胸腔充滿清亮的積液，肺部潮濕和厚重， 呈現(xiàn)中度或重度的小葉性肺炎，大部分呈現(xiàn)大葉性肺炎，有的肺有片狀出血(圖1A）。肺的顯微鏡檢查顯示小葉內(nèi)膈葉彌漫性水腫膨脹，從而導(dǎo)致肺水腫的出現(xiàn)，肺間質(zhì)中有大量巨噬細胞和淋巴細胞浸潤，血管壁壞死破裂(圖1B），周圍間隙是導(dǎo)致肺水腫的原因(圖1C）。多數(shù)感染豬淋巴系統(tǒng)衰竭，個別有鼻炎癥狀。

二、為什么說APE癥狀是由PCV-2病毒引起

Cino-Ozuna等調(diào)查了堪薩斯和內(nèi)布拉斯加州相隔不少于200米的8個農(nóng)場，發(fā)現(xiàn)在其中四個農(nóng)場7周齡和14周齡的豬均出現(xiàn)了APE癥狀，其中7周齡的保育豬臨床癥狀非常明顯。用PCR和免疫組織化學(xué)診斷方法來確診圓環(huán)病毒2型感染。結(jié)果顯示在同一農(nóng)場的同一群豬中呈現(xiàn)急性肺炎的豬和無臨床癥狀豬的數(shù)量幾乎相等。所有急性肺炎豬群血清和組織中PCV-2呈陽性。不同的PCR檢測包括oligo核酸探針針對PCV2a和PCV2b的檢測發(fā)現(xiàn)PCV2b是優(yōu)勢基因型，而且肺、淋巴結(jié)和脾等各組織勻漿的PCR循環(huán)低至7個循環(huán)，說明PCV-2還在豬群中大量存在。相反，無臨床癥狀的豬群的13份血清樣本中僅2份PCV-2陽性，PCV-2病毒在急性肺炎和無臨床癥狀豬群之間有明顯的不同。PCV-2病毒大量存在于急性肺炎豬群，且在肺和淋巴結(jié)免疫組織化學(xué)反應(yīng)陽性得到進一步確診。另外在肺血管內(nèi)壁單核細胞的細胞質(zhì)中可以觀察到PCV-2抗原，且在血管內(nèi)皮細胞中也可以觀察到PCV-2抗原(圖1D）。病毒蛋白在內(nèi)皮細胞核的定位表明其可能是病毒復(fù)制的活性部位。

有人利用免疫熒光法對PCV-2特異性抗體進行檢測(IFA），其中所有的豬均注射圓環(huán)病毒2型疫苗，免疫熒光法不能區(qū)分注射疫苗產(chǎn)生的抗體和野毒感染產(chǎn)生的抗體，但是，急性肺炎豬的抗體有很重要的特征，例如，9份急性肺炎豬中有5份檢測不到抗體，提示我們，急性肺炎豬任何PCV-2型抗體不管來自母源抗體或者疫苗源抗體都缺失。

圖1 APE豬的解剖學(xué)和顯微鏡組織學(xué)特征。A：急性死亡豬的胸腔內(nèi)含有大量的積液，肺部明顯水腫，淤血，出血。B：肺薄膜用蘇木精-曙紅染色。表示肺間質(zhì)有巨噬細胞、淋巴細胞、漿細胞浸潤和動脈管壁平滑肌纖維素樣壞死。C：肺水腫的肺薄片的組織蘇木精-伊紅染色。呈現(xiàn)明顯的周圍動脈擴張（箭頭）。D：肺的PCV-2抗原免疫組織化學(xué)染色。動脈管腔內(nèi)許多細胞（單核細胞）的細胞質(zhì)染色和動脈壁內(nèi)皮細胞核染色（箭頭）。

除了圓環(huán)病毒之外，作為輔助因子，Cino-Ozuna等還調(diào)查了其他幾種病毒（豬藍耳病病毒PRRSV、豬巨細胞病毒PCMV、豬輸血傳播病毒TTV、豬流感病毒SI等）。豬藍耳病病毒是一個常見的與正在感染和嚴重感染PCVAD的病例相關(guān)的病毒，盡管在Cino-Ozuna調(diào)查的其中一農(nóng)場曾經(jīng)有過藍耳病史，但藍耳病毒PCR診斷和血清學(xué)檢測顯示所有急性肺炎豬群藍耳病毒陰性，另外，四個感染APE的農(nóng)場有兩個場整體藍耳病毒陰性。豬鼻炎的存在暗示PCMV的可能性，Hamel等報道，血清和組織樣本的PCMV的PCR檢測顯示PCMV（豬巨細胞病毒）在APE豬和無臨床癥狀的豬群之間的流行情況無明顯的差別。近年來，豬輸血傳播病毒TTV病毒被認為與圓環(huán)病毒相關(guān)疾病具有協(xié)同作用。Segale，s等PCR檢測TTV-1和TTV-2顯示TTV陽性率在APE豬和無臨床癥狀的豬群中基本相同。豬流感的臨床癥狀的缺失與APE感染豬鼻腔試紙的陰性結(jié)果可以排除豬流感的可能性。其他普通病毒的結(jié)果相似，顯示與APE沒有明顯關(guān)系。

三、APE發(fā)生原因的探討

1.PCV-2基因突變。為什么免疫過圓環(huán)病毒2型的豬還會發(fā)生急性肺炎？一個可能原因是PCV-2衣殼蛋白基因突變從而逃離了抗體的保護。從同一農(nóng)場的4個急性肺炎豬的PCV-2的ORF2的肽鏈序列是從組織病料進行PCR擴增而得，這4個PCR擴增產(chǎn)物測序序列基本相同，僅有一條序列第30位氨基酸由V變成了L，其中一條急性肺炎病例的PCV-2的ORF2的肽鏈序列D71923，與在美國中西部2005-2006年暴發(fā)PCVAD時分離的11條具有代表性的堪薩斯序列相比很相似，并且與其中四條237-A，237-C，237-D，和D-28-1序列完全相同。因此，與APE相關(guān)的圓環(huán)病毒2型是在該區(qū)域一段時期內(nèi)流行的代表性病毒，也很容易啟發(fā)我們想到可能PCV-2其中某個蛋白基因的突變就有可能脫離保護或者引起新的癥狀。

2.豬圓環(huán)病毒2型疫苗的廣泛使用。PCV-2是一種在環(huán)境中普遍存在的病毒，各生長階段的豬都易感，后備母豬在6～8周齡后進行最后一次PCV-2疫苗免疫，抗體水平逐漸消退，分娩時，初乳中母源抗體的低水平就不能充分地保護新生仔豬 PCV-2感染。在PCV-2疫苗發(fā)揮作用之前，新生仔豬可以被在母豬繁殖之前一定程度的自然感染產(chǎn)生的母源抗體保護。因此，APE可能是一個意想不到的由于PCV-2疫苗的廣泛使用而導(dǎo)致的后果。

四、如何預(yù)防APE的發(fā)生

PCVAD被描述為育肥豬的慢性漸進性最終衰竭死亡的傳染性動物疾病，肺水腫是由圓環(huán)病毒2型導(dǎo)致的免疫抑制或者功能障礙從而引起典型的細菌繼發(fā)感染或者病毒感染的結(jié)果。相反，APE豬死亡率的傳播很快速，容易感染健康豬， APE更容易感染年幼豬，不與其他的傳染性疾病相關(guān)，其發(fā)病機理起初是年幼豬肺內(nèi)單核細胞和血管壁內(nèi)皮細胞內(nèi)有大量病毒增殖，導(dǎo)致機體更易感染并且有助于更高水平的病毒復(fù)制，感染常發(fā)生于接種疫苗之前的仔豬，在缺乏母源抗體保護水平的情況下，APE易感豬體內(nèi)缺乏相應(yīng)的抗體保護水平，而在免疫之前感染。所以，一種使幼豬避免APE的方法是早期免疫。另一種方法是做好繁殖動物的抗體跟蹤監(jiān)測，當PCV-2特異性抗體水平低的時候進行及時補免和補防來提高和改善。

另外就是適合本場科學(xué)合理的免疫程序，不要千篇一律，照搬照抄，否則會適得其反，達不到相應(yīng)的預(yù)防疾病的效果，浪費人力、物力和財力；還有至關(guān)重要的一點就是做好日常飼養(yǎng)管理工作，這也是一種預(yù)防的方法，不能忽視，把工作做在平時，對防制工作很重要。以下是防制中的幾個具體建議。

1.加強飼養(yǎng)管理。降低飼養(yǎng)密度，實行嚴格的全進全出制和混群制度，減少環(huán)境應(yīng)激因素，控制并發(fā)感染，保證豬群具有穩(wěn)定的免疫狀態(tài)，加強豬場內(nèi)部、外部的生物安全措施，購豬時保證豬只來自清潔的豬場是預(yù)防控制本病、降低經(jīng)濟損失的有效措施。

2.做好豬主要傳染病的預(yù)防免疫和免疫效果監(jiān)測。雖然APE與其他傳染病無明顯的聯(lián)系，但PCV-2與其相關(guān)豬病的發(fā)生還需要另外的條件或共同因素才能誘發(fā)臨床癥狀，且常見于與其他病毒病或細菌病混合感染時。所以目前世界各國控制本病的經(jīng)驗是做好適當?shù)闹鲃用庖吆捅粍用庖?，做好豬場豬瘟、豬偽狂犬病、豬細小病毒病、氣喘病和藍耳病等疫苗的免疫接種，確保胎兒和吮乳期仔豬的安全是重中之重。一般規(guī)模豬場各方面免疫做的還都比較好，有些大型豬場和種豬場免疫效果的跟蹤監(jiān)測做的也很好，主要還是一些散養(yǎng)戶和小規(guī)模的豬場做的不夠，也很容易發(fā)生疾病，這方面要引起注意。

3.人工被動免疫和自家疫苗的使用。可采取血清療法。從豬場的育肥豬采血(健康的淘汰種豬血最好），分離血清，給斷乳期的仔豬腹腔注射，最好是本場內(nèi)的豬，這種方法見效快，立竿見影。豬場一旦發(fā)生本病，可把發(fā)病豬的內(nèi)臟加工成自家疫苗，據(jù)臨床實踐，效果不錯。但要注意滅活要徹底，保證其安全性，以免散毒。

4.“感染”物質(zhì)的主動免疫?！案腥尽蔽镔|(zhì)指本豬場感染豬的糞便、死產(chǎn)胎豬、木乃伊胎等，用來喂飼母豬，尤其是初產(chǎn)母豬在配種前喂給，能起到較好的效果。如有一定抗體的母豬在懷孕80 d以后再作補充喂飼，則可產(chǎn)生較高免疫水平，并通過初乳傳遞給仔豬。這種方法，不僅對防制本病、保護胎豬和吮乳仔豬的健康有效，而且對其他腸道病毒引起的繁殖障礙也有良好的效果。但使用本法要十分慎重，如果場內(nèi)有小豬會造成人工感染。

5.藥物預(yù)防。預(yù)防性投藥和治療，對控制細菌源性的混合感染或繼發(fā)感染，是非?？扇〉?，但注意要適當投藥，不能濫用藥以免造成細菌耐藥性的產(chǎn)生。

備注：本文編譯自《Character ization of a New Disease Syndrome As sociated with Porcine Circovirus Type 2 in Previously Vaccinated Herds》A da G. Cino-y， Richard Hesse. C linical Veterinary Microbiol.[J] ，May 2011; 49: 2012 - 2016.