新疆伽師酸梅核仁油中脂肪酸及不皂化物組成分析

白 希 劉 叢 朱慧忠 帕提姑麗 楊長(zhǎng)江 杜為軍

(新疆師范大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院，烏魯木齊 830054)

酸梅(Prunus mume Sieb.et Zucc.)系薔薇科李屬植物，是歐洲李(Prunus，demestica)的變種［1］，維吾爾語(yǔ)稱“卡拉玉呂克”，意為“黑杏子”。其未熟果實(shí)呈青綠色，陽(yáng)面具有紅暈，熟果陽(yáng)面具淡赤褐色至深紫色，味酸帶苦澀。酸梅含有豐富的蛋白質(zhì)、鈣、磷、鉀、鐵、維生素A、B、C等多種營(yíng)養(yǎng)成分;酸梅除可作為時(shí)令水果鮮食外，還可用將其加工成干、果脯、蜜餞、果醬、飲料和酒等副食品。此外，酸梅還有較高的藥用價(jià)值，其干制品“烏梅”，被我國(guó)衛(wèi)生部認(rèn)定為“藥食同源”的果品，據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)載［2－3］:烏梅具有斂肺，澀腸，生津，安蛔的功能，主治肺虛久咳，久瀉久痢，虛熱消渴，蛔蟲、厥嘔吐等癥。新疆伽師縣地處塔克拉瑪干沙漠的南緣，具有獨(dú)特的光熱等自然條件，十分有利于酸梅的生長(zhǎng)栽培，素有“中國(guó)酸梅之鄉(xiāng)”的美譽(yù)。近年來(lái)，隨著市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，當(dāng)?shù)氐乃崦贩N植面積不斷擴(kuò)大，到2011年底，酸梅種植面積達(dá)1 860公頃，總產(chǎn)量達(dá)到3.7萬(wàn)噸，居全疆之首，為當(dāng)?shù)剞r(nóng)民增收致富做出重要貢獻(xiàn)。隨著酸梅產(chǎn)量的逐年增加，其深加工產(chǎn)業(yè)規(guī)模不斷擴(kuò)大。在加工過(guò)程中，由于酸梅屬時(shí)令水果，保鮮較為困難，碰撞后極易腐爛變質(zhì)，產(chǎn)生大量果渣和果核等副產(chǎn)物，大部分堆積在露天棄去，造成極大的浪費(fèi)。目前有關(guān)酸梅核的研究，主要集中在酸梅核仁中苷類成分的研究以及其在活性炭制備等方面的應(yīng)用［4－5］，而對(duì)于其油脂成分則鮮見報(bào)道。本試驗(yàn)對(duì)新疆伽師酸梅核仁油中的脂肪酸及不皂化物進(jìn)行分離鑒定，為伽師酸梅的綜合開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

酸梅:新疆伽師縣鑫隆果業(yè)公司。

正己烷、甲醇:天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司;氫氧化鉀:天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所;無(wú)水硫酸鈉:天津市科盟化工貿(mào)易有限公司;試劑均為分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

7890A/5975C氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀:美國(guó)惠普公司;RV10數(shù)顯型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀:廣州儀科實(shí)驗(yàn)室技術(shù)有限公司;SX2－2.5－12型箱式電阻爐:濟(jì)南精密科學(xué)儀器儀表有限公司;K9860型全自動(dòng)凱氏定氮儀:濟(jì)南海能儀器有限公司;食品粉碎機(jī):飛利浦公司。

1.3 方法

1.3.1 樣品處理

將新鮮的伽師酸梅洗凈置于陰涼處自然陰干，剝除酸梅果肉，分取果核，將果核敲碎，取出核仁，于45℃烘箱中干燥至恒重，用粉碎機(jī)打成粉末備用。

1.3.2 伽師酸梅核仁基本成分分析

按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法，分別測(cè)定伽師酸梅核仁的成分含量。水分含量測(cè)定按照GB 5009.3—2010食品中水分的測(cè)定;灰分:GB 5009.4—2010食品中灰分的測(cè)定;粗蛋白:GB/T 5009.5—2003食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定;粗脂肪:GB/T 14772—2008食品中粗脂肪的測(cè)定。

1.3.3 伽師酸梅核仁油的提取

稱取10.0 g粉碎后的酸梅核仁粉末，用濾紙包好，置于索氏提取器中，加入正己烷300 mL，回流提取8 h后的提取液，減壓蒸餾除去正己烷，得伽師酸梅核仁油［4］，產(chǎn)率為 34.81%。

1.3.4 油脂脂肪酸組成分析

1.3.4.1 脂肪酸甲酯化［7，8］

稱取所提油脂0.5 g，置于10 mL比色管中，加入正己烷 2.0 mL、甲醇1.0 mL、0.5 mol/L 氫氧化鉀 －甲醇溶液2.0 mL，搖勻，靜置10 min，加蒸餾水至刻度，待萃取分層后，取上清液進(jìn)行GC－MS分析。

1.3.4.2 色譜條件

色譜柱HP－5MS石英毛細(xì)柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm);升溫程序:170 ℃ 保持 2 min，以 5℃/min升至280℃，保持5 min;進(jìn)樣口溫度:300℃，載氣(He)流速 1 mL/min，進(jìn)樣量 1 μL;分流比:100∶1。

1.3.4.3 質(zhì)譜條件

電子轟擊(EI)離子源;電子能量70 eV;傳輸線溫度280℃;離子源溫度230℃;質(zhì)量掃描范圍m/z 30～550;采集方式:全掃描模式;質(zhì)譜庫(kù):NIST2011

1.3.5 伽師酸梅核仁油不皂化物成分分析

1.3.5.1 伽師酸梅核仁油不皂化物的制備

稱取約5 g酸梅核仁油，置于250 mL燒瓶中，加入1 mol/L的氫氧化鉀－乙醇溶液50 mL和一些沸石。連接回流冷凝管，在水浴鍋上煮沸60 min至溶液透明為止。停止加熱，從冷凝管頂部加入50 mL水并旋轉(zhuǎn)搖動(dòng)。稍冷后轉(zhuǎn)移皂化液到250 mL分液漏斗中，用50 mL正己烷反復(fù)萃取不皂化物3～4次，合并正己烷提取液，再用10%乙醇溶液反復(fù)洗滌正己烷至洗滌液呈中性，最后通過(guò)減壓蒸餾在35℃下蒸出正己烷，可得到不皂化物［8－9］。

1.3.5.2 伽師酸梅核仁油不皂化物組成的GC/MS分析［10－11］

將所提不皂化物用正己烷溶解后，用氮?dú)獯祾邼饪s至1mL以備GC/MS分析。

氣相色譜條件:色譜柱HP－5MS石英毛細(xì)柱(30 m ×0.25 mm ×0.25 μm);升溫程序:60 ℃保持1 min，以15℃/min升至200℃，保持1 min，再以5℃/min升至280℃，保持5 min;進(jìn)樣口溫度:220℃，載氣(He)流速:1 mL/min，進(jìn)樣量:1 μL，分流比:50∶1。

質(zhì)譜條件:電子轟擊(EI)離子源;電子能量70 eV;傳輸線溫度280℃;離子源溫度230℃;質(zhì)量掃描范圍m/z 30～500;采集方式:全掃描模式;質(zhì)譜庫(kù):NIST2011。

2 結(jié)果與分析

2.1 伽師酸梅核仁基本成分

由表1可知，伽師酸梅核仁富含脂肪和蛋白質(zhì)，其中含蛋白質(zhì)32.64%，含粗脂肪35.24%。可見伽師酸梅核仁是一種極具開發(fā)潛力的油料資源。

表1 伽師酸梅核仁基本成分

2.2 伽師酸梅核仁油脂肪酸組成分析

采用1.3.3.1法對(duì)伽師酸梅及核仁油中的脂肪酸進(jìn)行甲酯化處理，經(jīng)過(guò)GC－MS分析得到的總離子流圖如圖1所示。

圖1 伽師酸梅核仁油脂肪酸甲酯的總離子流圖

經(jīng)NIST2011質(zhì)譜庫(kù)檢索結(jié)合人工譜圖識(shí)別，與標(biāo)準(zhǔn)譜圖對(duì)照、比較，對(duì)所得色譜峰進(jìn)行定性鑒別，并按峰面積歸一化法計(jì)算各峰面積的相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)，結(jié)果見表2

表2 伽師酸梅核仁油脂肪酸組成及相對(duì)含量

由表2可知，伽師酸梅核仁油中共鑒定出7種脂肪酸，分別是9－十六碳烯酸、軟脂酸、亞油酸、油酸、硬脂酸、11－二十碳烯酸、花生酸，其中含量最高的是油酸(65.87%)，其次是亞油酸(24.33%)，其中不飽和脂肪酸占脂肪酸總量的91.09%;這說(shuō)明伽師酸梅核仁油屬于油酸與亞油酸類油脂［12］;伽師酸梅核仁油中的脂肪酸成分與吳群中［13］所報(bào)道的福建地產(chǎn)青梅核仁油脂肪酸成分有較大的差異，原因可能是酸梅的品種、產(chǎn)地及生長(zhǎng)的氣候條件不同所致。油酸能夠參與磷脂的合成并以磷脂的形式作為線粒體和細(xì)胞膜的重要成分，促進(jìn)膽固醇和類脂質(zhì)的代謝，合成前列腺素的前體［14－16］，在預(yù)防動(dòng)脈血管硬化等疾病方面有良好作用，具有很高的保健價(jià)值，因此伽師酸梅核仁油可作為潛在的保健油源加以開發(fā)。

2.3 伽師酸梅核仁油不皂化物組成分析

伽師酸梅核仁油中的不皂化物質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.69%，低于3%，達(dá)到了制皂工業(yè)的要求［17］。將所得不皂化物用正己烷溶解后，通過(guò)GC/MS分析，采用NIST2011譜庫(kù)對(duì)不同物質(zhì)的質(zhì)譜圖進(jìn)行檢索，共鑒定出12種物質(zhì)，用峰面積歸一化法得出各物質(zhì)的相對(duì)含量。不皂化物的GC/MS總離子流圖如圖2所示，鑒定出的不皂化物列于表3。

圖2 伽師酸梅核仁油不皂化物的總離子流圖

表3 伽師酸梅核仁油不皂化物組成及相對(duì)含量

由表3可以看出，在伽師酸梅核仁油中共檢測(cè)出12種不皂化物，主要為植物甾醇、生育酚和烴類化合物，其中5α－豆甾－3(7)－烯－3β－醇的相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高，達(dá)到68.06%，而3β－膽甾－3(5)－烯－24－亞丙基 －醇、γ－谷甾醇、豆甾烷醇、角鯊烯、γ－生育酚、植醇、反式香葉醇的含量也較高。植物甾醇能夠有效地降低膽固醇、抑制腫瘤、防治前列腺疾病、調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)，同時(shí)具有抗氧化作用［18－19］等。由此，可以預(yù)見伽師酸梅核仁油不皂化物應(yīng)具有良好的生物活性。

3 結(jié)論

伽師酸梅核仁富含脂肪和蛋白質(zhì)，其中蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)32.64%，粗脂肪質(zhì)量分?jǐn)?shù)為達(dá)35.24%;新疆伽師酸梅核仁油中不飽和脂肪酸含量較高，其中油酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高，達(dá)到65.87%。新疆伽師酸梅核仁油不皂化物中主要成分為植物甾醇、生育酚和烴類化合物，其中以5α－豆甾－3(7)－烯－3β－醇的質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高，達(dá)到68.06%。伽師酸梅核仁油中不飽和脂肪酸含量較高，可作為藥食兩用的保健油源加以開發(fā)利用。

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