楊林松,張燕寧,何偉志
(1.長江大學農學院, 湖北 荊州 434025;2.中國農業(yè)科學院植物保護研究所,北京 100094)
家蠶(Bombyx mori L.)屬鱗翅目蠶蛾科,是起源于我國的一種泌絲昆蟲。我國在五千多年前的新石器時代已開始植桑養(yǎng)蠶[1]。目前養(yǎng)蠶,仍然是許多省份的特色農業(yè),是農民經(jīng)濟收入的主要來源[2],因此,養(yǎng)蠶在我國農業(yè)生態(tài)系統(tǒng)中占有重要地位。近年來,農藥使用愈加頻繁廣泛,因農藥污染給蠶業(yè)生產帶來的災難性事故頻頻發(fā)生[3],給桑蠶養(yǎng)殖業(yè)帶來了嚴重的經(jīng)濟損失。因此有許多學者針對農藥對家蠶的毒性影響開展研究,主要集中在農藥殘留對家蠶生理變化的影響[4~8]。目前,我國及日本均要求農藥申請登記注時需要提供其對家蠶的毒性試驗資料,以此作為農藥環(huán)境風險評估的基礎數(shù)據(jù)。開展農藥對家蠶的風險評估不僅為蠶桑養(yǎng)殖區(qū)合理使用農藥提供科學依據(jù),而且對保護桑蠶產業(yè)的可持續(xù)性發(fā)展具有重要的意義。
論文采用葉片飼喂法測定了6種農藥制劑對家蠶的急性毒性,旨在了解我國常用農藥對家蠶的急性毒性情況,為農藥環(huán)境風險評估和生產上科學合理用藥提供參考。
試驗所用藥劑均為中國農業(yè)科學院植物保護研究所實驗室保存樣品,且均在有效保質期內。40%丁草胺·五氟磺草胺懸乳劑、20%蟲螨腈懸浮劑、50%氟環(huán)唑水分散粒劑、32%草銨膦·乙氧氟草醚可濕性粉劑、16000IU/mg蘇云金桿菌水分散粒劑、5.7%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽懸浮劑。
家蠶(Bombyx mori L.),從山東廣通蠶種集團有限公司引種,品種為菁松×皓月,實驗室孵化,以二齡起蠶為試驗材料,孵化率在99%以上。蟻蠶飼養(yǎng)和試驗溫度為23~27℃,相對濕度為70%~80%。
燒杯、容量瓶、恒溫培養(yǎng)箱、培養(yǎng)皿、溫濕度表、亞都加濕器、移液槍等。
準確稱取或量取適量供試藥劑,用蒸餾水配制并稀釋藥液,在預試驗的基礎上,按等比關系設置6個系列濃度和1個空白對照,每處理設置3次重復。在培養(yǎng)皿內飼養(yǎng)2齡起蠶,用不同濃度的藥液完全浸漬桑葉10秒鐘,晾干后分別置于培養(yǎng)皿內,每培養(yǎng)皿接入20頭2齡蟻蠶。然后置于26±2℃,相對濕度75%~85%,要求空白對照死亡率不超過10%。
藥劑處理后24、48、72h、96h觀察并記錄家蠶中毒癥狀及死亡數(shù)。用DPS軟件計算供試樣品對家蠶96h的毒力回歸方程y=a+bx、至死中濃度(LC50)及95%置信限區(qū)間,并參照《化學農藥環(huán)境安全評價試驗準則》的標準劃分各藥劑對家蠶的急性毒性等級。(見下表1)
在實驗室條件下,根據(jù)農藥毒性等級劃分標準,5.7%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽懸浮劑對家蠶急性半致死濃度LC50(96h)為2.56x10-3mg/L,對家蠶急性毒性等級為劇毒。16000IU/mg蘇云金桿菌水分散粒劑對家蠶急性半致死濃度LC50(96h)為2.03mg/L,對家蠶急性毒性等級為高毒。20%蟲螨腈懸浮劑對家蠶急性半致死濃LC50(96h)為6.60mg/L,對家蠶急性毒性等級為高毒。32%草銨膦·乙氧氟草醚可濕性粉劑對家蠶急性半致死濃度LC50(96h)為277mg/L,對家蠶急性毒性等級為低毒。40%丁草胺·五氟磺草胺懸乳劑對家蠶急性半致死濃度LC50(96h)為1046mg/L,對家蠶急性毒性等級為低毒。50%氟環(huán)唑水分散粒劑對家蠶急性半致死濃度LC50(96h)為1297mg/L,對家蠶急性毒性等級為低毒。
表1 6種藥劑的劑量梯度(mg/L)
表2 6種藥劑96h對家蠶急性毒性試驗結果
根據(jù)表2可知,6種藥劑對家蠶96h毒力大?。↙C50值)依次為5.7%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽懸浮劑>16000IU/mg蘇云金桿菌水分散粒劑>20%蟲螨腈懸浮劑>32%草銨膦·乙氧氟草醚可濕性粉劑>40%丁草胺·五氟磺草胺懸乳劑>50%氟環(huán)唑水分散粒劑。
浸葉法是昆蟲毒力測定中最常用的方法之一,在國內外已普遍采用,它能反映農藥對家蠶的胃毒、觸殺和熏蒸多種致毒效應,接近于田間農藥對家蠶的實際危害情況。近年來,由于農藥的不合理施用,導致環(huán)境污染嚴重,本實驗希望能為合理用藥提供依據(jù)。
農藥對家蠶的毒性大小與家蠶品系、幼蟲齡期及發(fā)育階段等因素有關[10]。2齡蠶對農藥最敏感,齡期越大,敏感性越低,因此,評價農藥對家蠶的毒性,選擇2齡幼蟲作為試蟲較為合理。另農藥的評定時間有待評價24h和48h。
發(fā)達國家在農藥環(huán)境毒性評價方面體制健全、管理嚴格,主要進行對魚、鳥、蜜蜂、藻類和蚯蚓的毒性評價,我國在制定關于這幾類非靶標生物的毒性評價準則時都與國外況進行了比較,并借鑒了其先進經(jīng)驗[11]。50%氟環(huán)唑水分散粒劑等低毒農藥,雖對家蠶的急性毒性較低,但有待研究其慢性毒性是否影響家蠶的吐絲和正常生長。
[1]Zhang Zhiyong,Wang Donglan,Chi Zhijun,Liu Xianjin and Hong Xiaoyue.Acute toxicity of organophosphorus and pyrethroid insecticides to Bombyx mori,J.Econ.Entomol.2008,101(2):360~364.
[2]K Etebari, A.R.Bizhannia, R.Sorati, L.Matindoost.Biochemical changes in haemolymph of silkworm larvae due to pyriproxyfen residue.Pestic.Biochem.Physiol.2007,88:14~19.
[3]Shigeharu Kuribayashi.Studies on the effect of pesticides on the reproduction of the Silkworm.Bombyx mori L, The Journal of Toxicological Sciences,1981,6: 169~176.
[4]M.Giovanna Leonardi,Silvia Cappellozza,Magda de Egu ileor,Annalisa Grimaldi, Luciano Cappellozza,Morena Casartelli and Barbara Giordana.Modification of the Nutritional Parameters and of Midgut Biochemical and Absorptive Functions Induced by the IGR Fenoxycarb in Bombyx mori Larvae.Arch.Insect Biochem.Physiol.1998,39:18~35.
[5]Takahiro Shiotsuki, Fumiko Yukuhiro, Makoto Kiuchi,Eiichi Kuwano.Effect of 1- (4-phenoxyphenoxyproyl)imidazole (KS-175) on larval growth in the silkworm Bombyx mori.J.Insect Physiol.1999,45:1049~1055.
[6]K.Etebari,A.R.Bizhannia, R.Sorati, L.Matindoost.Biochemical changes in haemolymph of silkworm larvae due to pyriproxyfen residue.Pestic.Biochem.Physiol.2007,88:14~19.
[7]蔡道基,楊佩芝,龔瑞忠,等.化學農藥環(huán)境安全性評價試驗準則.北京:國家環(huán)境保護局,1989,18~22.
[8]趙善歡.植物化學保護[M].北京:中國農業(yè)出版社,1999.286.
[9]葉亞平,單正軍.美國瑞典日本農藥環(huán)境管理綜述[J].農村生態(tài)環(huán)境,2000,16(4):51-53,57.
[10]浙江農業(yè)大學主編.養(yǎng)蠶學.中國農業(yè)出版社,1981,3.
[11]李保同.六種殺蟲劑對家蠶的毒性與安全評價研究[J].農藥學學報,2001,3(3);83-85.