高效液相色譜法測定舒必利片的含量及含量均勻度

李萬平，萬 莉，鐘瀟驍

(重慶市萬州藥品檢驗所，重慶 404000)

舒必利用于精神分裂癥和抑郁癥等，對淡漠、退縮、木僵、憂郁、幻覺、妄想等癥狀療效好，而無明顯鎮(zhèn)靜、抗躁狂及催眠作用。舒必利片有100 mg與10 mg兩種規(guī)格，該制劑的檢驗標(biāo)準(zhǔn)為2010年版《中國藥典》[1]，采用紫外分光光度法測定含量及含量均勻度。根據(jù)舒必利片的結(jié)構(gòu)特點，筆者選用高效液相色譜法測定舒必利的含量，現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

LC－10ATvp型高效液相色譜儀(日本島津)，包括 LC－10ATvp泵、SPD－M10Avp檢測器、CTO－10ASvp柱溫箱、SILHTA自動進(jìn)樣器，Class－VP色譜工作站;Sartorius－CP224S型電子天平(Max 210 g，d=0.1 mg);Sartorius－ME215S 型電子天平(Max 210 g;d=0.01 mg)。舒必利對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號為100203－200503，供含量測定用);舒必利片(市售品，江蘇某制藥廠，批號為1201031，1104212，1112010，規(guī)格為每片10 mg);乙腈為色譜純，水為純化水，其余試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱:Phenomenex Kromasil C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);流動相:乙晴－水(8∶92，用稀醋酸調(diào)pH至3.6);流速:1.0mL/min;檢測波長:253 nm;進(jìn)樣量:20 μL。

2.2 溶液制備

精密稱取舒必利對照品100 mg，置100 mL容量瓶中，加稀醋酸8 mL使溶解，再加水至刻度，精密量取10 mL，置25 mL容量瓶中，加水至刻度，搖勻，作為對照品溶液。取本品10片，研細(xì)，混勻，精密稱取適量(約相當(dāng)于舒必利10 mg)，置25 mL容量瓶中，加稀醋酸2 mL使溶解，加水稀釋至刻度，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。按處方比例，取除舒必利外的其他組分制得陰性樣品，按供試品溶液制備方法制成陰性對照品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

系統(tǒng)適用性試驗:分別取2.2項下3種溶液各20 μL，注入液相色譜儀，按擬訂色譜條件測定，記錄色譜圖。結(jié)果見圖1?？梢姡姹乩谋Ａ魰r間約為4 min，理論板數(shù)大于20 000。

圖1 舒必利片高效液相色譜圖

線性關(guān)系考察:精密吸取對照品溶液 5，10，15，20，25，30，35 μL，進(jìn)樣測定，記錄峰面積。以峰面積積分值 Y對舒必利進(jìn)樣量 X(μg)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程 Y=3.40×106X －3.71×104，r=0.999 8(n=7)。結(jié)果表明，舒必利進(jìn)樣量在 2 ～14 μg 范圍內(nèi)與峰面積積分值線性關(guān)系良好。

精密度試驗:精密吸取同一對照品溶液20 μL，重復(fù)進(jìn)樣6次。結(jié)果峰面積均值為3 344 568，RSD為0.35%(n=6)，表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗:取同一供試品溶液 20 μL，分別于 0，2，4，6，8，10，24 h時進(jìn)樣 1次。結(jié)果峰面積均值為 3 421 657，RSD為0.76%(n=7)，表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

重復(fù)性試驗:取同一批號樣品，依法制備6份供試品溶液，分別測定。結(jié)果舒必利平均含量(標(biāo)示百分含量)為95.6%，RSD為0.75%(n=7)，表明方法重現(xiàn)性良好。

加樣回收試驗:精密稱取已知含量的樣品6份(相當(dāng)于舒必利 4，5，6 mg)各 2 份，分別精密加入舒必利對照品溶液 4，5，6 mL，按供試品溶液制備方法制備待測溶液并依法測定，計算回收率。結(jié)果見表1。

表1 舒必利加樣回收試驗結(jié)果(n=6)

2.4 樣品含量及含量均勻度測定

取3批樣品，依法制備供試品溶液，精密量取20 μL，測定峰面積，按外標(biāo)法計算含量，同時與按2010年版《中國藥典(二部)》方法測定的結(jié)果比較。結(jié)果見表2。取本品1片，置25 mL容量瓶中，依法制備供試品溶液，精密量取20 μL，測定峰面積，按外標(biāo)法計算含量，依法測定舒必利含量均勻度。結(jié)果見表3。

3 討論

取對照品溶液，用二級管陣列檢測器在200～400 nm波長范圍內(nèi)掃描，舒必利對照品的紫外最大吸收波長為291 nm;經(jīng)紫外吸收圖譜分析，在253 nm波長處可獲得高靈敏度、良好的峰形，故選此波長進(jìn)行檢測。

表2 樣品含量測定結(jié)果(標(biāo)示量%，n=3)

表3 樣品含量均勻度測定結(jié)果

選用流動相時，參考了文獻(xiàn)[2]中的流動相，試驗中考察了以乙腈 －水(10∶90)、乙腈 － 水(20∶80，冰醋酸調(diào) pH 至 3.6)、乙腈 －水(10∶90，冰醋酸調(diào)pH至3.6)為流動相，結(jié)果顯示選用本法流動相的比例和pH可使舒必利峰形較好、保留時間適宜，同時選定253 nm波長處檢測，可以獲得較好的重現(xiàn)性和精密度。

本試驗中建立了高效液相色譜法測定舒必利片的含量，與2010年版《中國藥典(二部)》紫外分光光度法測定含量，結(jié)果基本一致，但文中方法專屬性更強(qiáng)、操作更簡單，避免了雜質(zhì)吸收帶來的誤差，能更好地控制藥品質(zhì)量。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:1 044.

[2]夏維杰.HPLC法測定舒必利注射液的含量[J].中國藥師，2010，13(3):380－381.