蒙藥伊赫哈日－12對(duì)醉酒小鼠解酒作用的研究

巴特金 吳超群 朝魯巴根 董海濤 白烏蘭 白玉亮

(內(nèi)蒙古國(guó)際蒙醫(yī)醫(yī)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010058)

飲酒過(guò)量可對(duì)人體健康和社會(huì)造成危害，逐漸成為我國(guó)乃至世界范圍內(nèi)一個(gè)嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題。酒精對(duì)機(jī)體損害大致可分為急性酒精中毒(即醉酒)和慢性酒精損害。醒酒防醉制品研發(fā)具有極其重要的實(shí)用價(jià)值。蒙醫(yī)藥在這方面積淀了豐富的理論基礎(chǔ)和治法方藥，具有較好的臨床應(yīng)用效果，但缺乏基礎(chǔ)研究進(jìn)行系統(tǒng)評(píng)價(jià)。因此，我們以傳統(tǒng)蒙藥伊赫哈日－12為目標(biāo)，系統(tǒng)觀察研究該藥對(duì)醉酒小鼠的解酒作用，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:健康昆明種小鼠，雌雄各半，體重24～28g，均為清潔動(dòng)物，檢疫合格，由內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證編號(hào)SCXK(蒙)2009－0017。置動(dòng)物于室溫20±2℃、相對(duì)濕度60%、光照周期12 h:12h條件下飼養(yǎng)。自由飲水、進(jìn)食普通飼料。

1.1.2 試劑與藥物 實(shí)驗(yàn)用白酒選用42%(V/V)牛欄山二鍋頭白酒(批號(hào)120223，北京順鑫農(nóng)業(yè)股份有限公司)。

實(shí)驗(yàn)方劑包括葛花解酲湯(元·李東恒《脾胃論》，葛花15g、白豆蔻 9g、砂仁 6g、木香 3g、神曲 9g、陳皮 6g、白術(shù) 9g、青皮6g、白茯苓9g、澤瀉9g、豬苓9g、人參9g、干姜6g)和伊赫哈日－12散(黑冰片100g、地格達(dá)30g、土木香30g、紅花30g、胡黃連 30g、川楝子 30g、訶子 30g、梔子 30g、石灰華30g、甘松30g、牛膽膏粉20g、人工牛黃5g)。實(shí)驗(yàn)方劑藥物均有國(guó)家蒙藥制劑中心提供，按處方比例制備散劑(生藥濃度為1g·ml－1)備用。根據(jù)動(dòng)物藥理實(shí)驗(yàn)用藥折算方法，根據(jù)成人常規(guī)用藥量，實(shí)驗(yàn)中統(tǒng)一按10g生藥/小鼠體重設(shè)計(jì)為給藥中劑量，其2倍為大劑量、1/2量為低劑量。實(shí)驗(yàn)前用蒸餾水按0.25ml(藥液)/10g(小鼠體重)給藥體積調(diào)整水煎劑濃度。

1.1.3 主要儀器 PL－303型電子天平(瑞典 METTLER TOIEDO公司);GC－2010氣相色譜儀(日本島津公司)。

1.2 方法

1.2.1 白酒劑量的選擇:取實(shí)驗(yàn)小鼠30只，隨機(jī)分為3組，每組 10只，分別按體質(zhì)量 20ml/kg、22ml/kg、24ml/kg一次性灌胃實(shí)驗(yàn)用白酒，觀察1h。小鼠醉酒與否以翻正反射是否消失為標(biāo)準(zhǔn):小鼠灌酒后將其背向下輕輕放入鼠籠，若動(dòng)物背向下的姿勢(shì)保持30s以上，則認(rèn)為翻正反射消失，即為醉酒［1］。20ml/kg組7只小鼠出現(xiàn)翻正反射消失;22ml/kg組全部出現(xiàn)翻正反射消失;24ml/kg組全部出現(xiàn)翻正反射消失且有2只死亡。因此，實(shí)驗(yàn)用白酒劑量確定為22ml/kg。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)小鼠分組及給藥方法:取實(shí)驗(yàn)小鼠50只，在實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)2d，然后禁食8h，稱重標(biāo)記后隨機(jī)分組，分別為模型組(空白對(duì)照組)、葛花解酲湯組(陽(yáng)性對(duì)照組)、伊赫哈日－12低劑量組、伊赫哈日－12中劑量組、伊赫哈日－12大劑量組，每組各10只。葛花解酲湯組及伊赫哈日－12低、中、高劑量組小鼠給予灌胃給酒，模型組小鼠給予等劑量蒸餾水灌胃;10min后所有小鼠給予實(shí)驗(yàn)用白酒22ml/kg灌胃。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 醉酒時(shí)間:白酒灌胃后開(kāi)始計(jì)時(shí)，記錄小鼠翻正反射消失時(shí)間即為醉酒時(shí)間［1］。

1.3.2 睡眠持續(xù)時(shí)間:從翻正反射消失到翻正反射恢復(fù)的這段時(shí)間為睡眠持續(xù)時(shí)間［2］。

1.3.3 攀附時(shí)間 :翻正反射恢復(fù)后將小鼠放在垂直的金屬網(wǎng)上，以小鼠墜下金屬網(wǎng)為終點(diǎn)，記錄小鼠在金屬網(wǎng)上的攀附時(shí)間［3］。

1.3.4 全血乙醇含量測(cè)定 :另取實(shí)驗(yàn)小鼠50只，以1.2.2方法分組及給藥，自白酒灌胃開(kāi)始計(jì)時(shí)，于30min、60min、90min、120min、150min及180min采取眼框內(nèi)采血方法取血，內(nèi)標(biāo)法檢測(cè)全血乙醇含量。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 :數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析。多組間比較用單因素方差分析，多組間兩兩比較若方差齊用LSD法檢驗(yàn);若方差不齊，用Tamhane’s T2法檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 解酒藥物對(duì)小鼠醉酒時(shí)間、睡眠持續(xù)時(shí)間及攀附時(shí)間的影響:由表1可見(jiàn)，葛花解酲湯組及伊赫哈日－12低、中、大劑量組小鼠醒酒時(shí)間和攀附時(shí)間明顯長(zhǎng)于模型組，而睡眠持續(xù)時(shí)間明顯短于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);伊赫哈日－12中劑量組解酒效果同葛花解酲湯組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);伊赫哈日－12中劑量組解酒效果優(yōu)于低劑量及大劑量組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.05)。

表1 實(shí)驗(yàn)小鼠醉酒時(shí)間/睡眠持續(xù)時(shí)間/攀附時(shí)間觀察結(jié)果(n=10)

2.2 解酒藥物對(duì)小鼠全血乙醇含量的影響:由表2可見(jiàn)，葛花解酲湯組及伊赫哈日－12低、中、大劑量組各時(shí)間點(diǎn)全血乙醇含量均明顯低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);伊赫哈日－12中劑量組各時(shí)間點(diǎn)全血乙醇含量同葛花解酲湯組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);乙醇灌胃90min內(nèi)，伊赫哈日－12中劑量組全血乙醇含量明顯低于低劑量組及大劑量組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，90min后三組小鼠全血乙醇含量差異不明顯。

表2 五組實(shí)驗(yàn)小鼠不同時(shí)間點(diǎn)全血乙醇含量檢測(cè)結(jié)果(n=10)

3 討論

伊赫哈日－12，又名大黑劑，出自蒙醫(yī)著作《觀者之喜》。本方性涼，方中以清“希拉”、助消化藥黑冰片為主藥，以地格達(dá)、訶子等清“希拉”藥和紅花、牛黃等清血熱、解毒、殺黏藥物為輔佐藥，對(duì)胃、肝、膽諸熱癥均有良效。通過(guò)以往臨床觀察發(fā)現(xiàn)，伊赫哈日－12對(duì)緩解醉酒有著良好的效果。蔡芳等［4］研究顯示，黑冰片具有抑制家兔腸道平滑肌收縮作用。此外，黑冰片還具有治療酒后寒性胃病的作用［5］。張海龍等［6］研究顯示，訶子具有抗氧化及緩解平滑肌痙攣?zhàn)饔茫瑢?duì)飲酒后加快酒精代謝及緩解為胃部不適癥狀有明確的功效。蒙醫(yī)學(xué)認(rèn)為，土木香味甘、苦、辛，性平，具有清巴達(dá)干熱，解赫依血相訌，溫中消食，開(kāi)胃、止刺痛的作用，可以治療飲酒后嘔吐泛酸，頭痛惡寒等癥狀［7］。

醉酒過(guò)程大致可分為3個(gè)階段，即興奮期、共濟(jì)失調(diào)期、昏睡期?，F(xiàn)代解酒方藥研究多從協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)、醒神、控制血乙醇等含量方面入手，實(shí)驗(yàn)方法最常見(jiàn)的有翻正實(shí)驗(yàn)、醉酒睡眠實(shí)驗(yàn)、攀附實(shí)驗(yàn)和全血乙醇含量檢測(cè)等。本文應(yīng)用解酒效果公認(rèn)的中醫(yī)傳統(tǒng)名方“葛花解酲湯”作為陽(yáng)性對(duì)照，比較了不同劑量伊赫哈日－12對(duì)醉酒小鼠的解酒作用。本研究結(jié)果顯示，伊赫哈日－12在改善醉酒小鼠的醉酒時(shí)間、睡眠持續(xù)時(shí)間、攀附時(shí)間及降低全血乙醇含量方面可以取得與葛花解酲湯相同的效果，這也為臨床療效提供了可靠的基礎(chǔ)研究支持。同時(shí)本研究也發(fā)現(xiàn)，中劑量伊赫哈日－12的解酒效果好于低劑量及大劑量，這也為今后指導(dǎo)臨床用藥提供了理論基礎(chǔ)。

總之，內(nèi)蒙古蒙醫(yī)藥資源豐富，蒙藥制劑以其毒副作用小、作用奇特、價(jià)格便宜等特點(diǎn)，廣泛地受到人們的青睞。我們應(yīng)當(dāng)以此為契機(jī)，對(duì)蒙藥解酒作用進(jìn)行更加深入的基礎(chǔ)及臨床研究，相信蒙藥解酒會(huì)有更加廣闊的發(fā)展前景。

［1］高景莘，余濤.復(fù)方葛根散對(duì)急性酒精中毒小鼠的解酒作用研究［J］.成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，33(2):74－76.

［2］哈斯，巴根那.蒙藥毛勒日達(dá)布斯－9湯散的解酒作用實(shí)驗(yàn)研究［J］.內(nèi)蒙古民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2010，25(3):319 －320.

［3］楊柱，田維毅，王文佳，等.5首解酒方對(duì)小鼠醉酒模型解酒效應(yīng)的比較研究［J］.中成藥，2010，32(11):1969－1972.

［4］蔡芳，陳廣榮，白音夫.黑冰片對(duì)動(dòng)物腸道平滑肌功能的影響［J］.中國(guó)民族醫(yī)藥雜志，2008，3(3):59－60.

［5］烏云斯欽.黑冰片－10味散治療寒性胃病臨床體會(huì)［J］.中國(guó)民族民間醫(yī)藥，2011，1(1):2.

［6］張海龍，裴月湖，華會(huì)明.訶子化學(xué)成分及藥理活性的研究進(jìn)展［J］.沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2001，18(6):452－455.

［7］國(guó)家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì).中華本草－蒙藥卷［M］.上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2004:71－72.