正交試驗(yàn)法優(yōu)選消瘤丸的提取工藝

王文驪 劉軍鋒 高錦成 陜西中醫(yī)學(xué)院附院（咸陽 712000）

消瘤丸由白花蛇舌草、半枝蓮、茵陳蒿、黃芪等十一味中藥材組成，主要用于治療婦科腫瘤［1］。白花蛇舌草、半枝蓮、茵陳蒿、黃芪、甘草五味藥材作為水提工藝的主要藥物，野黃芩苷作為半枝蓮的主要代表成分。為了有效的控制該工藝，我們通過正交工藝設(shè)計(jì)，對(duì)消瘤丸水提工藝采用高效液相色譜法測(cè)定野黃芩苷的含量，結(jié)合干膏率兩個(gè)指標(biāo)，確定最佳工藝。

1 儀器與試藥 1.1 儀器 日本島津2010液相色譜儀，class－vp數(shù)據(jù)工作站；BP211D型電子分析天平（德國(guó)塞多利斯天平有限公司）d＝0.01mg；BS210S型電子分析天平（北京塞多利斯天平有限公司）d＝0.1mg；LXJ－Ⅱ型臺(tái)式離心機(jī)（南京第一醫(yī)療器械廠）；DK－98－ⅡA型水浴鍋（天津市泰斯特儀器有限公司）。

1.2 試藥 白花蛇舌草、半枝蓮、茵陳蒿、黃芪以上藥材購(gòu)于陜西省藥材公司。野黃芩苷購(gòu)于中國(guó)藥品檢驗(yàn)鑒定中心，批號(hào)：0421－212604甲醇為色譜純；其余試劑均為分析純；水為蒸餾水。

2 試驗(yàn)方法 2.1 檢測(cè)方法的確定 2.1.1 干膏率的測(cè)定：精密量取離心濾過后的濾液100mL，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，于105℃干燥3h，置干燥器中冷卻0.5h，迅速稱重，計(jì)算干浸膏得率，結(jié)果見表2。

2.1.2 測(cè)定野黃芩苷含量［2］：供試品溶液的制備

精密量取相當(dāng)于1g半枝蓮離心過濾后的煎液，水浴蒸干，殘?jiān)?00mL甲醇轉(zhuǎn)溶至三角瓶中，稱重，超聲提取30min，稱重，補(bǔ)加減失的溶媒，精密量取25mL，置蒸發(fā)皿中蒸干，殘?jiān)?0%甲醇25mL溶解并定量至刻度，搖勻，濾過，即得。

對(duì)照品溶液的制備：精密稱取野黃芩苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1mL含84.4μg的溶液，即得。

含量測(cè)定：依據(jù)中國(guó)藥典2005年版一部附錄ⅥD法，分別精密吸取對(duì)照品溶液及供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，測(cè)定，結(jié)果見表3。

2.2 正交試驗(yàn) 2.2.1 試驗(yàn)因素和水平設(shè)定：通過多因素的正交試驗(yàn)，優(yōu)選水提取工藝的各項(xiàng)參數(shù)。以水提取干浸膏得率及野黃芩苷提取量作為考核指標(biāo)，以選擇最佳的工藝參數(shù)。影響水提取的主要因素有加水量、提取時(shí)間和提取次數(shù)，故我們選擇正交方式進(jìn)行設(shè)計(jì)研究。為了系統(tǒng)考察水提取的工藝參數(shù)，我們?cè)O(shè)計(jì)的因素與水平見表1。

表1 水煎煮工藝正交試驗(yàn)因素水平表

2.2.2 正交試驗(yàn)安排及結(jié)果具體見表2。2.2.3 將正交試驗(yàn)結(jié)果分析：結(jié)果見表3、表4。

表2 半枝蓮等水提正交試驗(yàn)表

表3 浸膏得率方差分析

表4 野黃芩苷含量方差分析

直觀分析（表2）顯示，從野黃芩苷含量提取情況看影響提取效果因素順序?yàn)榧铀浚ˋ）＞提取時(shí)間（B）＞提取次數(shù)（C）；從干膏率方面來看影響提取效果因素順序?yàn)樘崛r(shí)間（B）＞提取次數(shù)（C）＞加水量（A）。結(jié)合方差分析（表3、4）可知，提取次數(shù)、加水量、提取時(shí)間長(zhǎng)短影響不大，以A2B3C2為最佳提取組合。考慮到藥材質(zhì)地及吸水率，確定最佳工藝為水提二次，加10倍量水，煎煮2次，第1次2h，第2次煎煮1.5h。

2.2.4 驗(yàn)證試驗(yàn)：根據(jù)正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)選的最佳水提工藝，驗(yàn)證三批，結(jié)果見表5。

表5 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

由驗(yàn)證結(jié)果與正交試驗(yàn)數(shù)據(jù)基本一致，說明工藝穩(wěn)定。

3 討 論 本實(shí)驗(yàn)研究白花蛇舌草、半枝蓮、茵陳蒿、黃芪的水提工藝，因其主要有效成分為野黃芩苷，故本實(shí)驗(yàn)以干膏率及野黃芩苷為考察指標(biāo)，通過正交試驗(yàn)結(jié)合方差分析結(jié)果表明，水提影響干膏得率的主要因素是煎煮次數(shù)，加水量和煎煮時(shí)間較小。水提影響野黃芩苷得率的主因素是煎煮次數(shù)為節(jié)省工時(shí)，降低能耗，確定最佳工藝組合為為水提二次，加10倍量水，煎煮2次，第1次2h，第2次煎煮1.5h。

［1］徐華龍.消瘤丸治療乳腺疾病30例［J］.陜西中醫(yī)，1996，18（05）：202.

［2］國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典［M］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：59.