復(fù)方兒茶止瀉霜抗腹瀉藥效學(xué)研究＊

宮 婷，杜菲菲，廖素溪，高 明

（大連大學(xué)醫(yī)學(xué)院，遼寧大連 116622）

復(fù)方兒茶止瀉霜是齊齊哈爾市中醫(yī)醫(yī)院臨床應(yīng)用十余年治療腹瀉的醫(yī)院制劑，具有收斂、斂瘡、抗菌和消炎等作用。主要由兒茶、黃柏、五倍子和木香四味中藥組成。本實(shí)驗(yàn)通過建立有效的腹瀉動物模型，對其進(jìn)行小鼠抗腹瀉藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)研究，為深入研究該制劑的臨床療效提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動物 清潔級昆明種雄性小鼠140只，平均體質(zhì)量18～22g，由大連醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供（合格證號：SCXK（遼）2008－0002）。

1.2 藥物與試劑 復(fù)方兒茶止瀉霜（compound catechu antidiarrheal ointment，CCAO，批號：20110901，高劑量為含生藥量0.58g／g基質(zhì)；低劑量為含生藥量0.34g／g基質(zhì)）；空白基質(zhì)霜劑（批號：20110901）；番瀉葉煎劑（批號：20110910，含生藥量為1.00g／mL）；半固體炭末營養(yǎng)糊［1］（批號：20111015，濃度為0.15g／mL），均由大連大學(xué)中醫(yī)藥研究所提供；鹽酸小檗堿片（批號：080631，東北制藥總廠）；墨汁等。

1.3 方法

1.3.1 CCAO對番瀉葉所致小鼠腹瀉的作用［2］將50只小鼠隨機(jī)分為5組（空白對照組、陰性對照組、陽性對照組、高劑量樣品組、低劑量樣品組），每組10只。實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)性飼養(yǎng)動物1周。適應(yīng)性飼養(yǎng)第7天，對各組小鼠腹部進(jìn)行脫毛處理（先用剪刀將腹部毛進(jìn)行初步剪短，然后用脫毛膏進(jìn)行脫毛）。適應(yīng)2d后，再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)?？瞻讓φ战M不做任何處理；陰性對照組（空白基質(zhì)霜劑）、高劑量樣品組、低劑量樣品組分別于臍部涂抹4g陰性對照品、高劑量CCAO和低劑量CCAO，早晚各2g；陽性對照組灌胃1.4mL濃度為15mg·mL－1的小檗堿溶液，2次／天。涂藥后，先將其獨(dú)立于一干凈空間30min，以防藥物損失。照上述操作連續(xù)實(shí)驗(yàn)7d。給藥第7天后，禁食不禁水16h。第8天，繼續(xù)進(jìn)行上述操作進(jìn)行給藥，并分別對除空白對照組外的各組分別以每只0.5mL灌胃番瀉葉煎劑（1g·mL－1，25℃），而后連續(xù)觀察6h［3］，每1小時換一次濾紙，觀察癥狀變化、總便數(shù)、稀便數(shù)和便數(shù)級，計(jì)算腹瀉指數(shù)（DI）。記錄小鼠腹瀉情況［4］。

1.3.2 CCAO對番瀉葉所致小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動實(shí)驗(yàn)［5］按1.3.1方法另取50只小鼠分組，飼養(yǎng)1周，給藥7d。第8天，繼續(xù)進(jìn)行上述操作進(jìn)行給藥1h后，分別對除空白對照組外的每只小鼠按20mL·kg－1灌胃墨汁，20min后脫頸處死小鼠，立即解剖，分離腸系膜，剪取幽門至回盲部的腸管，測量小腸總長和墨汁前沿至幽門的長度，即記錄墨汁在小鼠小腸內(nèi)的推進(jìn)距離，并計(jì)算推進(jìn)率。墨汁推進(jìn)率（%）＝墨汁在小腸內(nèi)推進(jìn)距離（cm）／小腸全長（cm）×100%。

1.3.3 CCAO對正常小鼠胃排空的影響［6］按1.3.1方法另取40只小鼠分4組，不設(shè)空白對照組。飼養(yǎng)1周，給藥7d。第8天，繼續(xù)進(jìn)行上述操作進(jìn)行給藥1h后，分別對各組灌胃給予半固體營養(yǎng)糊每只1mL。15min后脫頸處死小鼠，剖腹取全部胃腸，自幽門切跡處取胃，用手術(shù)線于胃上下綁緊，拭干稱重，沿胃大彎剪開胃體，洗去胃內(nèi)容物后拭干，稱凈重，并計(jì)算胃內(nèi)容物殘留率。胃內(nèi)容物殘留率（%）＝（胃全重－胃凈重）／半固體炭末營養(yǎng)糊×100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件，所有計(jì)量資料用表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 CCAO對小鼠累計(jì)腹瀉指數(shù)的比較（，n＝10）

表1 CCAO對小鼠累計(jì)腹瀉指數(shù)的比較（，n＝10）

a：P＜0.05，b：P＜0.01，與陰性對照組比較；c：P＜0.05，d：P＜0.01，與陽性對照組比較。

組別 劑量（g）腹瀉指數(shù)1h 2h 3h 4h 5h 6h陰性對照組 4.000 1.15±0.20d 2.69±1.38d 3.02±1.01d 3.00±1.14d 3.15±0.97 3.39±0.73陽性對照組 0.042 0b 0.08±0.18b 0.40±0.97b 1.66±0.95b 2.41±1.06 3.04±0.75低劑量樣品組 4.000 0.63±0.79b 1.15±0.31b 1.36±0.66bc 2.25±0.92 2.86±0.98 3.29±0.72高劑量樣品組 4.000 0b 0.12±0.25b 0.75±1.10b 1.93±1.05a 2.66±1.09 3.17±0.67

2 結(jié) 果

2.1 CCAO對番瀉葉所致小鼠腹瀉的影響 與陰性對照組比較，低劑量樣品組在1h起對番瀉葉引起的小鼠腹瀉即產(chǎn)生一定的抑制作用，并在4h時高劑量樣品組抗腹瀉作用仍持續(xù)明顯，說明應(yīng)用CCAO在不同時間與小鼠的腹瀉指數(shù)具有一定的量效關(guān)系。見表1。

2.2 CCAO對番瀉葉所致小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動的影響 與陰性對照組比較：高、低劑量樣品組及陽性對照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），說明CCAO能顯著抑制小腸推進(jìn)作用；其中高劑量樣品組與陽性對照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），低劑量樣品組與陽性對照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。見表2。

2.3 CCAO對正常小鼠胃排空的作用 與陰性對照組比較：高、低劑量樣品組以及陽性對照組，均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），說明CCAO能顯著抑制小鼠胃排空；而高劑量樣品組與陽性對照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；陰性對照組、低劑量樣品組與陽性對照組比較均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），說明高劑量CCAO與鹽酸小檗堿的抗腹瀉作用接近。見表2。

表2 CCAO對番瀉葉所致小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動的影響（，n＝10）

表2 CCAO對番瀉葉所致小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動的影響（，n＝10）

a：P＜0.01，與陰性對照組比較；b：P＞0.05，c：P＜0.01，與陽性對照組比較。

組別 劑量（g） 小腸推進(jìn)率（%） 胃內(nèi)容物殘留率（%）4.000 91.03±2.47 25.56±5.27c陽性對照組 0.042 41.21±8.90a 82.00±15.31a高劑量樣品組 4.000 45.41±3.96ab 76.50±8.84a低劑量樣品組 4.000 66.20±8.06ac 49.00±16.96陰性對照組ac

3 討 論

腹瀉是消化系統(tǒng)疾病中的一種常見癥狀，中醫(yī)理論認(rèn)為［7］：“泄瀉之本無不由于脾胃?！毙篂a的病理變化主要在于脾胃的失調(diào)，脾主運(yùn)化，脾健則水濕自去。脾與胃相表里，脾主升清，胃主降濁，若脾胃功能失調(diào)，則水濕內(nèi)停、清濁不分，而致泄瀉。

復(fù)方兒茶止瀉霜是由兒茶、黃柏、五倍子、木香四味中藥組成。君藥兒茶［8］，性涼，味苦、澀，具有活血療傷，生肌止血，收濕斂瘡和止瀉止痛之功，在方藥中起主導(dǎo)作用。臣藥五倍子，斂肺降火，澀腸止瀉和收斂止血，佐以黃柏，清熱燥濕、瀉火解毒，使以木香，具有行氣止痛和健脾消食之功，四藥合用，共奏清熱燥濕、澀腸止瀉、止吐止痛的作用。現(xiàn)代藥理研究表明，兒茶中含有兒茶素、表兒茶素、沒食子酸等成分［9］，具有抑制炎性浸潤、滲出和組織增生、減輕腸黏膜損害、抑制腸道平滑肌運(yùn)動的作用；黃柏中的小檗堿也有消炎抗菌的作用［10］；五倍子、木香中分別含有鞣質(zhì)、揮發(fā)油成分，也具有抗菌抗病毒、抗炎抗腫瘤的作用［11－12］?？梢?，復(fù)方兒茶止瀉霜不僅可以殺菌抗炎，還可通過抑制胃腸運(yùn)動來明顯增強(qiáng)其止瀉效果，可用于臨床各種相關(guān)的急慢性腹瀉。

綜上所述，復(fù)方兒茶止瀉霜可通過抗炎、保護(hù)胃腸黏膜及抑制胃腸蠕動過程等起到抗腹瀉作用。

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