兩種不同套材制備洗滌紅細(xì)胞的質(zhì)量比較

李玉秋 時(shí) 卉麗 孫曉紅

洗滌紅細(xì)胞是一種重要的紅細(xì)胞制劑，由于在洗滌中它去除了80%以上的白細(xì)胞和98%以上的血漿蛋白，同時(shí)去除了鉀、氨、乳酸、抗凝劑和微凝物等，故應(yīng)用本制品可顯著降低輸血不良反應(yīng)的發(fā)生率。其臨床應(yīng)用比例逐年增高，而采用多聯(lián)袋系統(tǒng)制備WRC，不用反復(fù)開(kāi)放血袋即減少了細(xì)菌污染的機(jī)會(huì)又省時(shí)省力，應(yīng)用越來(lái)越普遍，我站采用兩種不同樣式的聯(lián)袋套材(用A、B表示)各制備30袋洗滌紅細(xì)胞進(jìn)行對(duì)比實(shí)驗(yàn)，并將其質(zhì)量檢測(cè)情況進(jìn)行分析，報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 紅細(xì)胞來(lái)源 本站采集制備的3～6 d內(nèi)的400 ml全血，2 U去白懸浮紅細(xì)胞為原料紅細(xì)胞。

1.2 考察對(duì)象 洗滌套材A(型號(hào):CB－CPCM406C20，批號(hào):20101222N)為MAP五聯(lián)袋，洗滌套材B(型號(hào):ACM505B01，批號(hào):85EH23AB003)為250 ml三聯(lián)鹽水加100 ml紅細(xì)胞保存液袋。

1.3 儀器與設(shè)備 RC12BP大容量低溫離心機(jī)(美國(guó)Kendro公司)，全自動(dòng)無(wú)菌罐對(duì)接機(jī)(日本Terumo公司)，日立7180全自動(dòng)生化分析儀(日本株式會(huì)社日立高新技術(shù)公司)，AC.T 5diff AL血球計(jì)數(shù)儀(貝克曼庫(kù)爾特)，Nageotte血細(xì)胞計(jì)數(shù)盤(pán)

1.4 方法

1.4.1 應(yīng)用洗滌套材A制備:本套材自帶采血針頭，直接將全血采集到含CPD液的母袋中，離心，將血漿分至空轉(zhuǎn)移袋，并一同去除白膜，再將第三袋中的洗滌液液加入母袋中、混勻，進(jìn)行第一次洗滌;再離心，分出上清液將第四袋中的洗滌液220g－230g加入母袋中，混勻，進(jìn)行第二次洗滌;重復(fù)操作，進(jìn)行第三次洗滌;最后向洗滌三遍紅細(xì)胞洗滌袋中加入第五袋中的紅細(xì)胞保存添加劑100g，封口熱合即可。

1.4.2 應(yīng)用洗滌套材B制備:通過(guò)無(wú)菌接駁機(jī)將要制備的原料血(通常為去白懸浮紅細(xì)胞)與生理鹽水聯(lián)袋接通，在2～6℃ 2 840 r/min速度離心14 min，制成濃縮紅細(xì)胞再依次加入250 ml 0.9%氯化鈉溶液分3次對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌，在洗滌過(guò)程中盡可能移去白膜。最后在紅細(xì)胞中加入100 ml的紅細(xì)胞保存液制得。

1.4.3 檢測(cè)方法:血細(xì)胞分析儀測(cè)定紅細(xì)胞回收率，Nageotte血細(xì)胞計(jì)數(shù)盤(pán)測(cè)定白細(xì)胞清除率;雙縮脲試劑測(cè)定血漿蛋白清除率。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以±s表示，采用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種套材的異同點(diǎn)比較 見(jiàn)表1。

表1 兩種套材比較

2.2 兩種套材制備的WRC制品的質(zhì)量檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 兩種套材制備WRC制品質(zhì)量比較%，±s

表2 兩種套材制備WRC制品質(zhì)量比較%，±s

注:與洗滌套材A比較，*P ＜0.01

洗滌紅細(xì)胞上清殘留蛋白含量洗滌套材 A 0.80 ±0.42 84.4 ±2.29 99.35 ±0.47 0.511 ±0.042套材 紅細(xì)胞回收率 白細(xì)胞清除率 血漿蛋白清除率洗滌套材 B 0.89 ±0.38* 98.5 ±1.99* 96.97 ±1.21*0.508 ±0.039

3 討論

國(guó)家對(duì)洗滌紅細(xì)胞質(zhì)量的要求是:回收率≥70%;白細(xì)胞清除率≥80%;血漿蛋白清除率≥98%［1］。按照這一標(biāo)準(zhǔn)兩種套材在紅細(xì)胞回收率和白細(xì)胞清除率上均達(dá)標(biāo)，而B(niǎo)套材的血漿蛋白清除率未達(dá)標(biāo)，我們分析原因認(rèn)為:血漿蛋白清除率在很大程度上受到原料血中蛋白含量的影響，這是因?yàn)锳套材以全血為原料血，其中含有大量血漿蛋白，而B(niǎo)套材的原料血是去白懸浮紅細(xì)胞，因?yàn)榉蛛x制備時(shí)已經(jīng)去除了大部分血漿，其蛋白含量自然就低，這樣按照計(jì)算公式［2］B套材制備的洗滌紅細(xì)胞蛋白清除率有很多都不達(dá)標(biāo)，而實(shí)際上B套材制備的洗滌紅細(xì)胞中血漿蛋白的殘留量并不多，所以血漿蛋白清除率并未能真正反映洗滌紅細(xì)胞血漿的殘留程度，我們認(rèn)為血漿蛋白殘留量更能體現(xiàn)該產(chǎn)品的質(zhì)量，這一點(diǎn)有關(guān)文獻(xiàn)也有報(bào)道［3］。另外，從檢測(cè)指標(biāo)上看A型聯(lián)袋在紅細(xì)胞回收率和白細(xì)胞清除率上都要略差于B型聯(lián)袋，分析原因應(yīng)該是由于它是集采血和洗滌制備于一體的全封閉血袋，原料血是全血，制備工藝采用的是傳統(tǒng)的手工擠白膜法，白細(xì)胞的去除是與離心效果和制備經(jīng)驗(yàn)手法密切相關(guān)，去除率可以達(dá)到80%以上;B型聯(lián)袋的原料血是已經(jīng)用去白濾器過(guò)濾了的去白懸浮紅細(xì)胞，而去白濾器就能去除90%以上的白細(xì)胞，再經(jīng)過(guò)三次洗滌后白細(xì)胞去除率可以達(dá)到99%以上;在紅細(xì)胞回收率上由于A套材為了提高白細(xì)胞清除率，手工去白膜操作會(huì)丟失大量紅細(xì)胞，而B(niǎo)套材損失的紅細(xì)胞只是濾除白細(xì)胞時(shí)殘存在濾器中損失掉的，3次洗滌很少損失，因此紅細(xì)胞回收率也比較高。這樣看來(lái)B套材由于可以自由選擇原料血故應(yīng)用更靈活方便，但A套材始終使血液處于封閉狀態(tài)減少了污染機(jī)會(huì)，其洗液為紅細(xì)胞保存液，可以使紅細(xì)胞始終處于被保護(hù)狀態(tài)，可以更好的維持紅細(xì)胞功能。綜上所述兩種套材各有優(yōu)點(diǎn)，大家可根據(jù)不同需要使用。

1 中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.GB 18469－2001全血及成份血質(zhì)量要求.北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2001.

2 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.中國(guó)輸血技術(shù)操作規(guī)程.天津:天津科學(xué)技術(shù)出版社，1997.15-16.

3 蔡雁，張穎.2種原料制備洗滌紅細(xì)胞蛋白清除率結(jié)果比較.中國(guó)輸血雜志，2009，22:1008-1009.