復(fù)方降脂膠囊對(duì)實(shí)驗(yàn)血栓形成的影響

馬雪興，徐桂冬，姚金良，李 淵

為了探究復(fù)方降脂膠囊對(duì)血栓形成的影響，特采用小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)并對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 一般材料 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物包括SD大鼠80只，體質(zhì)量為210～260g，平均 (234.19±11.7)g;ICR小鼠80只，體質(zhì)量19～23g，平均 (20.4±0.7)g。以上實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均由蘇州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)為SCXK(蘇)2007-0001。

1.2 實(shí)驗(yàn)試劑 本實(shí)驗(yàn)采用的復(fù)方降脂膠囊為南京中醫(yī)藥大學(xué)所提供，含生藥8.9g，藥品為棕褐色粉末狀。實(shí)驗(yàn)用ADP由美國(guó)sigma公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號(hào):YY112-4B056W;曲克蘆丁由上海繁盛藥業(yè)有限公司提供;鹽酸腎上腺素注射液由南京未來(lái)氨基酸有限公司提供。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器 實(shí)驗(yàn)體血栓形成測(cè)定儀由包頭醫(yī)學(xué)院心血管研究室提供，型號(hào)為BT8723;FIRERA超純水機(jī)由南京斯特邦電子儀器設(shè)備有限公司提供，型號(hào)為FT72H19;電子天平及分析天平均有南京斯特邦電子儀器設(shè)備有限公司提供。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 探究復(fù)方降脂膠囊對(duì)于大鼠頸總動(dòng)脈在受到電流損傷后混合血栓形成的影響 選取SD大鼠80只，按照隨機(jī)分組的原則將其分為4組，分別為實(shí)驗(yàn)A組 (曲克蘆丁組)、實(shí)驗(yàn)B組 (高劑量組)、實(shí)驗(yàn)C組 (低劑量組)和對(duì)照組 (0.9%氯化鈉溶液組)，各20例。A組用藥為曲克蘆丁48mg/kg;B組用藥為曲克蘆丁40g/kg;C組用藥為曲克蘆丁14g/kg，連續(xù)灌胃給藥5d，給藥容積為10ml·kg-1·d-1，每次給藥30min后開(kāi)始進(jìn)行刺激。在模型制備時(shí)先將大鼠腹腔內(nèi)注入10%的水合氯醛350mg/kg進(jìn)行麻醉，采用仰臥位固定，做頸部正中線切口將右側(cè)的頸總動(dòng)脈進(jìn)行分離，采用血栓形成測(cè)定儀放置于近心端進(jìn)行電流刺激，在給藥后30min開(kāi)始，刺激電流調(diào)整為2mA連續(xù)刺激7min，當(dāng)接通電流后熱效應(yīng)引起的血管損傷會(huì)激活凝血系統(tǒng)促使血小板聚集形成混合血栓，由于血栓的形成血管內(nèi)的血流會(huì)被阻斷，溫宿也隨之降低，此時(shí)溫度探頭能夠測(cè)定到溫度的變化，以儀器報(bào)警時(shí)間作為血管栓閉時(shí)間，從開(kāi)始刺激到血管栓閉時(shí)間作為血栓形成時(shí)間 (OT)。

1.4.2 探究復(fù)方降脂膠囊對(duì)于小鼠由于ADP混合致栓劑導(dǎo)致的肺栓塞的影響 用0.2ml ADP、0.67ml腎上腺素以及0.9%氯化鈉溶液混合制成ADP混合致栓劑，定容至10ml備用。選取ICR小鼠80只，按照隨機(jī)分組的原則將其分為4組，分別為實(shí)驗(yàn)A組 (曲克蘆丁組)、實(shí)驗(yàn)B組 (高劑量組)、實(shí)驗(yàn)C組 (低劑量組)和對(duì)照組 (0.9%氯化鈉溶液組)各20例。A組用藥為曲克蘆丁48mg/kg;B組用藥為40g/kg;C組用藥為14g/kg，連續(xù)灌胃給藥5d，給藥容積為10ml·kg-1·d-1。同樣在給藥30min后按照0.075ml/10g的劑量進(jìn)行靜脈注入ADP混合致栓劑，記錄小鼠從注射致栓劑開(kāi)始到恢復(fù)自主活動(dòng)能力的時(shí)間。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料以(±s)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 復(fù)方降脂膠囊對(duì)于大鼠頸總動(dòng)脈在受到電流損傷后混合血栓形成的影響 實(shí)驗(yàn)A、B、C組OT與對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.05，見(jiàn)表1)。

表1 各組大鼠OT比較Table 1 Comparison of OT in each group of rats

2.2 復(fù)方降脂膠囊對(duì)于小鼠由于ADP混合致栓劑導(dǎo)致的肺栓塞的影響 實(shí)驗(yàn)A組和實(shí)驗(yàn)B組喘促時(shí)間與對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.05);實(shí)驗(yàn)C組與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＞0.05，見(jiàn)表2)。

表2 各組小鼠喘促時(shí)間比較Table 2 Comparison of catch hurried in each group of mouse

3 討論

目前，臨床上常見(jiàn)的心腦血管疾病的發(fā)病前提大多都是由于動(dòng)脈粥樣硬化從而產(chǎn)生血栓所導(dǎo)致的，而在血栓的形成過(guò)程中血小板的活化又是其重要原因之一［1-3］，所以，如何減少血栓的形成抑制血小板聚集是控制此類疾病的重要途徑。血栓的形成與血液成分改變、血流異常以及血管內(nèi)膜受損有關(guān)，而這之中脂質(zhì)的增加、血脂比例的改變以及脂質(zhì)質(zhì)量的異常都是導(dǎo)致其進(jìn)一步加重的原因［4］。大量的脂質(zhì)在血管內(nèi)膜上附著和沉積，加上單核-巨噬細(xì)胞在病變部位活動(dòng)，吞噬掉大量的脂質(zhì)之后轉(zhuǎn)化為泡沫細(xì)胞也是導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成的重要因素［5］。而另一方面血脂的異常導(dǎo)致血液內(nèi)白細(xì)胞和血小板功能的異常，導(dǎo)致凝血活性增強(qiáng)［6］。這多方面的因素共同導(dǎo)致了血栓的形成。

本次實(shí)驗(yàn)中通過(guò)電流損傷刺激大鼠的動(dòng)脈內(nèi)膜，形成的血栓主要是紅白血栓兼有的混合血栓，從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，復(fù)方降脂膠囊能夠有效地延長(zhǎng)OT，同時(shí)也能夠有效地縮短小鼠由于急性肺栓塞后到恢復(fù)自主活動(dòng)的時(shí)間。這說(shuō)明復(fù)方降脂膠囊可以有效地減少血小板聚集和降低全血黏度，對(duì)纖溶系統(tǒng)也有所增強(qiáng)，讓血小板處于解聚的狀態(tài)，從而起到抑制血栓形成的作用。

1 Smits JH，van der Linden J，Blankestijn PJ，et al.Coagulation and haemodialysis access thrombosis［J］.Nephrol Dial Transplant，2010，15(11):1755-1760.

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3 Ishii K，Oguchi S，Murata M，et al.Activated factorⅫ levels are de-pendent on factorⅫ 46C/T genotypes and factorⅫ zymogen levels，and are associated with vascular risk factors in patients and healthy subjects［J］.Blood Coagul Fibrinolysis，2010，4(11):277.

4 馬世平，劉保林，周素娣，等.西紅花總苷的藥理學(xué)研究 (對(duì)血凝、血小板聚集及血栓形成的影響) ［J］.中草藥，2009，30(3):196.

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6 汪鐘，鄭植荃.現(xiàn)代血栓病學(xué)［M］.北京:北京醫(yī)科大學(xué)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，2007:462-463.