單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂對顱腦損傷患者血清中神經(jīng)元特異性烯醇化酶的影響及其臨床意義

李計(jì)成，李曉明，戴如飛，蔡 軍

單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂 (GM1)是含唾液酸的糖神經(jīng)鞘脂，存在于哺乳類動(dòng)物細(xì)胞膜，神經(jīng)系統(tǒng)中含量尤其豐富，是神經(jīng)細(xì)胞膜的組成成分，在神經(jīng)發(fā)生、生長、分化過程中起必不可少的作用，對于損傷后的神經(jīng)修復(fù)也非常重要，具有促進(jìn)神經(jīng)再生、促進(jìn)神經(jīng)軸突生長和突觸形成、恢復(fù)神經(jīng)支配功能;改善神經(jīng)傳導(dǎo)、促進(jìn)腦電活動(dòng)及其他神經(jīng)電生理指標(biāo)的恢復(fù);保護(hù)細(xì)胞膜、促進(jìn)細(xì)胞膜各種酶活性恢復(fù)等作用。中、重型顱腦損傷不但引起嚴(yán)重的腦挫裂傷等原發(fā)性損傷，還引起顱內(nèi)血腫及腦水腫等繼發(fā)性損傷，腦細(xì)胞水腫崩解死亡，導(dǎo)致嚴(yán)重的并發(fā)癥和后遺癥。而神經(jīng)元特異性烯醇化酶 (neuron-specific enolase，NSE)廣泛存在于神經(jīng)元內(nèi)，神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞后，其在血清濃度的變化能在一定程度上反映腦損傷的嚴(yán)重程度及預(yù)后。本研究把血清NSE水平及患者預(yù)后作為評價(jià)外源性GM1對顱腦損傷患者神經(jīng)元損傷的保護(hù)及改善預(yù)后的作用。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2009年5月—2012年9月在我院住院治療的顱腦損傷患者96例，其中男63例，女33例;年齡19～71歲，平均41.3歲;格拉斯哥評分8～11分。手術(shù)治療者62例，保守治療者34例，其中腦挫裂傷患者79例。排除標(biāo)準(zhǔn):既往有明確的肝、腎、心臟及內(nèi)分泌疾病史者，嚴(yán)重多發(fā)傷或復(fù)合傷者，休克及低血壓者，雙側(cè)瞳孔散大、瀕臨死亡者。

1.2 主要試劑儀器 ELISA檢測NSE試劑盒 (德國DRG公司)，GM1(申捷，齊魯制藥有限公司)，Bio-rad酶標(biāo)儀 (美國伯樂公司)。

1.3 研究方法

1.3.1 分組 將其隨機(jī)分為GM1治療組 (48例)，常規(guī)治療組 (48例)。GM1治療組手術(shù)者30例，非手術(shù)者18例;常規(guī)治療組手術(shù)者32例，非手術(shù)者16例。

1.3.2 治療及用藥方法 顱內(nèi)血腫或廣泛性腦挫裂傷待CT檢查后具備手術(shù)指征者入院后即行手術(shù)治療，所有患者進(jìn)行常規(guī)治療。GM1治療組急性期應(yīng)用GM1 100mg/d，靜脈滴注;2～3周后改為維持量，20～40mg/d，一般療程為6周。

1.3.3 標(biāo)本采集及處理 采集外周靜脈血進(jìn)行離心，取血清置于-70℃冰箱保存，采用放射免疫分析法測定血清NSE含量。GM1治療組和常規(guī)治療組患者的樣品保存以及測定方法均相同。

1.4 預(yù)后評定 采用格拉斯哥預(yù)后評分 (GOS)評定患者預(yù)后。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 12.0軟件包對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以(±s)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組未手術(shù)患者血清NSE水平比較 兩組未手術(shù)患者治療前血清NSE水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＞0.05);治療后24h、48h、72h血清NSE水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.05);治療后7h血清NSE水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＞0.05，見表1)。

2.2 兩組手術(shù)患者血清NSE水平比較 兩組手術(shù)患者治療前血清NSE水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＞0.05);治療后24h、48h、72h血清NSE水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.05);治療后7h血清NSE水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＞0.05，見表2)。

2.3 兩組患者預(yù)后比較 治療后14d，兩組患者GOS評分比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＞0.05);治療后3個(gè)月，兩組患者GOS比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.05，見表3)。

表1 兩組未手術(shù)患者血清NSE水平比較(±s，μg/L)Table 1 Comparison of serum NSE level between two groups did not operation

表1 兩組未手術(shù)患者血清NSE水平比較(±s，μg/L)Table 1 Comparison of serum NSE level between two groups did not operation

.7 15.7±3.1 GM1治療組 18 9.0±2.5 17.4±2.8 24.5±1.9 25.8±3.3 22.2±3 7d常規(guī)治療組 16 9.2±2.1 20.6±2.1 27.9±2.2 33.1±3.5 30.2±2例數(shù) 治療前 治療后12h 治療后24h 治療后48h 治療后72h 治療后.1 12.2±2.5

表2 兩組手術(shù)患者血清NSE水平比較(±s，μg/L)Table 2 Comparison of serum NSE level between two groups did operation

表2 兩組手術(shù)患者血清NSE水平比較(±s，μg/L)Table 2 Comparison of serum NSE level between two groups did operation

3.3 14.7±2.8 GM1治療組 30 10.5±2.4 15.5±1.8 25.6±1.3 26.4±3.1 23.2±7d常規(guī)治療組 32 11.2±2.1 22.7±1.1 30.8±2.3 35.6±2.5 32.7±例數(shù) 治療前 治療后12h 治療后24h 治療后48h 治療后72h 治療后2.4 12.5±3.5

表3 兩組患者GOS比較(±s，分)Table 3 Comparison of GOS score between two groups

表3 兩組患者GOS比較(±s，分)Table 3 Comparison of GOS score between two groups

個(gè)月組別 例數(shù) 治療后14d 治療后3 48 2.45 ±0.45 4.31 ±0.98 48 2.35 ±0.55 3.23 ±1.03 GM1治療組常規(guī)治療組

3 討論

NSE特異性存在神經(jīng)元胞質(zhì)中，其陽性表達(dá)計(jì)數(shù)間接反映神經(jīng)元缺失程度［1］，正常情況下血液中含有極少量NSE。但是當(dāng)發(fā)生顱腦損傷、腦卒中時(shí)神經(jīng)遭破壞，NSE可經(jīng)細(xì)胞間隙釋放入血和腦脊液中，更甚者血-腦脊液屏障破壞，大量神經(jīng)元崩解壞死，NSE大量釋放，非特異性的腦損傷越嚴(yán)重釋放的NSE越多，NSE被認(rèn)為評價(jià)腦外傷損傷程度及預(yù)后恢復(fù)的特異性敏感性指標(biāo)之一［2-4］。本研究中GM1治療組較常規(guī)治療組NSE指標(biāo)無論手術(shù)組和非手術(shù)組在治療后24h、48h、72h都明顯降低，排除早期手術(shù)影響，提示在早期抑制神經(jīng)細(xì)胞繼發(fā)損傷上有明確意義。在后期神經(jīng)修復(fù)上，臨床GOS評分GM1治療組也較常規(guī)治療組有顯著性差異。

在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的許多部位已發(fā)現(xiàn)GM1受體，GM1與其受體結(jié)合，被逆行轉(zhuǎn)運(yùn)到神經(jīng)元內(nèi)。促進(jìn)蛋白質(zhì)合成能量合成，發(fā)揮神經(jīng)趨化作用，能夠防止損傷的神經(jīng)元死亡。促神經(jīng)元的再生和腦功能恢復(fù)，它對受損細(xì)胞的分化、功能維持和生存起著十分重要的作用［5］，主要作用體現(xiàn)在GM1可以對抗興奮神經(jīng)毒性，它通過抑制神經(jīng)細(xì)胞Ca持續(xù)內(nèi)流及抑制谷氨酸對蛋白激酶C的激活，從而防止興奮毒性發(fā)生，而外源性GM1與細(xì)胞膜的特異區(qū)域結(jié)合，改變Na-K-ATP酶周圍環(huán)境或膜的穩(wěn)定性，減低細(xì)胞耗氧量;GM1可通過抑制胱冬酶-3，調(diào)節(jié)Bcl-2和BaX的表達(dá)及激活磷酸肌醇3-激酶及活化鞘氨醇肌酶而抑制凋亡。從而促進(jìn)神經(jīng)修復(fù)改善神經(jīng)功能［6］，另外GM1能活化多種神經(jīng)營養(yǎng)因子，其本身也具有營養(yǎng)神經(jīng)作用，可促進(jìn)神經(jīng)元修復(fù)和神經(jīng)功能恢復(fù);GM1通過抑制神經(jīng)元型一氧化氮合酶來源的一氧化氮合成防止神經(jīng)元遲發(fā)性損害，對神經(jīng)元有保護(hù)作用［7］;另外它還在誘導(dǎo)熱休克蛋白70表達(dá)調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)方面改善和保護(hù)神經(jīng)功能。長期隨訪表明，外源性GM1至少可以改善部分認(rèn)知與運(yùn)動(dòng)功能［8-9］。腦挫裂傷引起腦水腫等繼發(fā)性損傷病理基礎(chǔ)是缺血缺氧性損傷，通過使用GM1減少早期神經(jīng)細(xì)胞繼發(fā)損傷，增強(qiáng)神經(jīng)元對抗損傷耐受性，加強(qiáng)損傷后腦神經(jīng)元修復(fù)，并通過NSE量化評價(jià)，反映出使用GM1治療腦挫裂傷具有良好的腦神經(jīng)保護(hù)和后期明顯提高認(rèn)知和運(yùn)動(dòng)的作用。

本研究因臨床原因采用測定血清NSE水平變化來評定臨床療效，且選取檢查時(shí)間區(qū)間較短，可在以后研究中行腦脊液NSE含量變化和增長時(shí)間跨度進(jìn)一步檢驗(yàn)療效及尋找最佳監(jiān)測時(shí)間窗。研究中非手術(shù)患者病例較少無法對比評價(jià)手術(shù)對NSE的早期影響，隨著樣本量的增加相信可以得到進(jìn)一步闡明。

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