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      以配合飼料替代雜魚對(duì)中華絨螯蟹生長(zhǎng)及消化酶活性的影響

      2013-07-12 13:36:19楊志剛闕有清紀(jì)連元郭子好成永旭曾奇韜
      關(guān)鍵詞:雜魚消化酶脂肪酶

      楊志剛,闕有清,紀(jì)連元,郭子好,成永旭,曾奇韜

      (上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院農(nóng)業(yè)部淡水水產(chǎn)種質(zhì)資源重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,上海201306)

      以配合飼料替代雜魚對(duì)中華絨螯蟹生長(zhǎng)及消化酶活性的影響

      楊志剛,闕有清,紀(jì)連元,郭子好,成永旭,曾奇韜

      (上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院農(nóng)業(yè)部淡水水產(chǎn)種質(zhì)資源重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,上海201306)

      用塑料圍網(wǎng)將一個(gè)池塘分隔成6個(gè)100 m2的小池塘,每池放養(yǎng)100只體質(zhì)量為 (10.01±1.02)g的中華絨螯蟹Eriocheir sinensis,分別投喂配合飼料和雜魚,每種飼料設(shè)3個(gè)重復(fù)。養(yǎng)殖180 d后隨機(jī)采樣,稱量體質(zhì)量,測(cè)量殼長(zhǎng)和殼寬,計(jì)算肝胰腺指數(shù)、性腺指數(shù)、出肉率、肌肉營(yíng)養(yǎng)成分和消化道消化酶活性。結(jié)果表明:投喂兩種飼料的中華絨螯蟹的體質(zhì)量、肝胰腺指數(shù)、性腺指數(shù)、出肉率、殼長(zhǎng)、殼寬及肌肉中的水分、粗蛋白、粗脂肪和粗灰分含量均無顯著性差異 (P>0.05),說明以配合飼料替代雜魚對(duì)中華絨螯蟹的生長(zhǎng)無明顯影響;配合飼料組蟹胃的類胰蛋白酶和腸的脂肪酶活性顯著高于雜魚組 (P<0.05),雜魚組蟹腸的淀粉酶活性顯著高于配合飼料組 (P<0.05),兩種飼料對(duì)蟹消化道其他各部位消化酶的活性均無顯著性影響 (P>0.05)。

      中華絨螯蟹;配合飼料;雜魚;生長(zhǎng);消化酶活性

      中華絨螯蟹Eriocheir sinensis俗稱河蟹,在中國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中占十分重要的地位。目前,河蟹的成蟹養(yǎng)殖仍以投喂雜魚為主,這種養(yǎng)殖方式易受雜魚來源和季節(jié)的限制,而雜魚也容易攜帶寄生蟲和病菌,導(dǎo)致蟹病發(fā)生,不僅衛(wèi)生品質(zhì)難以保障,而且還易污染水體,破壞生態(tài)系統(tǒng)。近年來,越來越多的學(xué)者用配合飼料部分或完全替代野雜魚等作為河蟹養(yǎng)殖的可靠食物來源,河蟹配合飼料也逐漸由實(shí)驗(yàn)室研究進(jìn)入生產(chǎn)應(yīng)用階段[1]。

      已有研究表明,蝦蟹類消化酶的活性與其攝食的餌料密切相關(guān)[2-5],研究消化酶的消化能力,不僅可以指導(dǎo)配合飼料的開發(fā)和研制[6-7],提高動(dòng)物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率,降低飼料成本,而且可以為蟹類消化生理學(xué)的研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。楊麗麗等[8]研究了以配合飼料替代冰鮮野雜魚對(duì)中華絨螯蟹幼蟹相關(guān)消化酶活性的影響。本試驗(yàn)中,作者研究了以配合飼料替代雜魚對(duì)中華絨螯蟹成蟹相關(guān)消化酶活性的影響,旨在為中華絨螯蟹成蟹養(yǎng)殖中配合飼料的推廣應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

      1 材料與方法

      1.1 材料

      試驗(yàn)用配合飼料由農(nóng)業(yè)部淡水水產(chǎn)種質(zhì)資源重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供配方 (均為質(zhì)量分?jǐn)?shù)):豆粕22%、菜籽粕12%、棉粕6%、特二粉11%、烏賊膏粉10%、油脂 3%、進(jìn)口魚粉 20%、蟹用添加劑16%(主要含蝦蟹多維、蝦殼粉、磷脂、磷酸二氫鈣、沸石粉、膽堿等),委托江蘇南通巴大飼料有限公司加工而成,配合飼料含粗蛋白質(zhì)38.48%、粗脂肪 7.19%、水分10.89%。試驗(yàn)用雜魚為捕獲的野生冰鮮雜魚,含粗蛋白質(zhì)74.98%、粗脂肪6.59%、水分80.19%。

      類胰蛋白酶、胃蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

      1.2 方法

      1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與養(yǎng)殖管理 試驗(yàn)在上海市崇明縣水產(chǎn)技術(shù)推廣站特色水產(chǎn)養(yǎng)殖基地進(jìn)行。用塑料圍網(wǎng)將一個(gè)池塘分隔成6個(gè)100 m2小池塘,每池放養(yǎng)100只蟹,雌、雄比例為1∶1,分別投喂配合飼料和鮮雜魚,每種飼料設(shè)3個(gè)重復(fù)。

      水溫升至15℃之后開始投喂,日投喂配合飼料量為蟹總質(zhì)量的3%~5%,日投喂雜魚量為蟹總質(zhì)量的10% ~15%,視天氣情況及時(shí)調(diào)整。養(yǎng)殖早期水位控制在1 m左右,每半個(gè)月加換水1次;高溫時(shí)節(jié)水位增加至1.3~1.5 m,每周加換水1次,每次為20~40 cm或池塘總水量的1/4左右。定期檢測(cè)蟹池水質(zhì),控制水中溶氧在3 mg/L以上,池塘pH為7.0~8.5,氨氮<0.2 mg/L,亞硝酸鹽<0.01 mg/L,硫化氫<0.001 mg/L。

      1.2.2 樣品的采集與分析 養(yǎng)殖試驗(yàn)時(shí)間為2010年3月20日—9月16日,試驗(yàn)結(jié)束時(shí)捕獲所有蟹,稱量體質(zhì)量,計(jì)算飼料系數(shù) (FCR),從兩種飼料的每個(gè)重復(fù)組中隨機(jī)取雌、雄蟹各20只,測(cè)量殼長(zhǎng)、殼寬;取其肝胰腺、性腺和肌肉,計(jì)算肝胰腺指數(shù) (HSI)、性腺指數(shù) (GSI)和出肉率:

      GSI(%)=100×G/W,

      當(dāng)然,表姐不是真表姐,其實(shí)還是她自己。蘇楠估摸著,可能是楊小水不好意思自己講自己,才虛構(gòu)了一個(gè)“表姐”作外殼。有表姐擔(dān)著這份虛名,楊小水的講述顯得更肆無忌憚,也把自己寫得更深入,更隱私。

      HSI(%)=100×H/W,

      出肉率 (%)=100×M/W,

      FCR=F/(W2-W1),

      其中:G、H、M分別為性腺、肝胰腺和全部肌肉的質(zhì)量 (g);W為蟹的總質(zhì)量 (g);F為養(yǎng)殖期間每個(gè)池的總投餌量 (g);W1、W2分別為養(yǎng)殖試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)每個(gè)池蟹的總質(zhì)量 (g)。

      根據(jù)AOAC標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)定肌肉中常規(guī)生化組成。同時(shí)從每種飼料組隨機(jī)取蟹6只,取肝胰腺、胃和腸。將每只蟹各組織用預(yù)冷雙蒸水分別勻漿,于4℃下以9 000 r/min冷凍離心30 min,棄沉淀取上清液,按照試劑盒方法測(cè)定消化道不同部位的類胰蛋白酶、胃蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性。類胰蛋白酶和胃蛋白酶活性定義為:在37℃條件下, pH為8.0時(shí),每毫克蛋白中含有的酶蛋白每分鐘使吸光度變化0.003為1個(gè)酶活性單位(U)。淀粉酶活性定義為:在37℃條件下,以每毫克蛋白與底物作用30 min,水解10 mg淀粉為1個(gè)酶活性單位(U)。脂肪酶活性定義為:以每克組織與底物反應(yīng)1 min消耗1 μmol底物為1個(gè)酶活性單位(U)。

      1.3 數(shù)據(jù)處理

      采用SPSS 17軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,試驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用Levene's進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn),兩組飼料對(duì)中華絨螯蟹各種酶活性的影響用獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)進(jìn)行分析,對(duì)消化道不同部位的酶活性進(jìn)行單因素方差分析 (One-way ANOVA)和Duncan多重比較,顯著性水平設(shè)為0.05。

      2 結(jié)果

      2.1 以配合飼料替代雜魚對(duì)中華絨螯蟹生長(zhǎng)及肌肉營(yíng)養(yǎng)成分的影響

      用配合飼料投喂雌、雄中華絨螯蟹的組分別記為A配、B配,用雜魚投喂雌、雄中華絨螯蟹的組分別記為A雜、B雜。從表1可見:兩種飼料組中華絨螯蟹的體質(zhì)量、殼長(zhǎng)、殼寬、肝胰腺指數(shù)、性腺指數(shù)和出肉率均無顯著性差異 (P>0.05),表明使用配合飼料替代雜魚對(duì)中華絨螯蟹生長(zhǎng)發(fā)育沒有顯著影響;但配合飼料組的飼料系數(shù)顯著低于雜魚組(P<0.05)。

      從表2可見:兩組飼料組中華絨螯蟹雌、雄蟹肌肉中的水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗灰分含量均無顯著性差異 (P>0.05)。

      表1 雜魚和配合飼料對(duì)中華絨螯蟹生長(zhǎng)的影響(n=60)Tab.1 The effects of trash fish and formulated diet on growth in Chinese mitten crab Eriocheir sinensis(n=60)

      表2 雜魚和配合飼料對(duì)蟹肌肉營(yíng)養(yǎng)成分的影響(濕質(zhì)量)Tab.2 The effects of trash fish and formulated diet on muscle composition of Chinese mitten crab E. sinensis(in wet matter) w/%

      2.2 以配合飼料替代雜魚對(duì)中華絨螯蟹類胰蛋白酶和胃蛋白酶活性的影響

      從圖1可見:兩種飼料組中華絨螯蟹的腸和肝胰腺的類胰蛋白酶活性均無顯著性差異 (P>0.05);配合飼料組蟹胃的類胰蛋白酶活性顯著高于雜魚組 (P<0.05),也顯著高于兩種飼料組蟹的腸和肝胰腺的類胰蛋白酶活性 (P<0.05)。

      從圖1可見:兩種飼料組中華絨螯蟹的腸、肝胰腺和胃的胃蛋白酶活性均無顯著性影響 (P> 0.05);同種飼料組消化道不同部位的胃蛋白酶相比,雜魚組蟹腸的胃蛋白酶活性最高,配合飼料組蟹胃的胃蛋白酶活性最高,而兩種飼料組蟹肝胰腺的胃蛋白酶活性均最低。

      2.3 以配合飼料替代雜魚對(duì)中華絨螯蟹脂肪酶和淀粉酶活性的影響

      從圖1可見:配合飼料組蟹腸的脂肪酶活性顯著高于雜魚組 (P<0.05),兩種飼料組蟹肝胰腺和胃的脂肪酶活性均無顯著性差異 (P>0.05);同種飼料組消化道不同部位的脂肪酶相比,兩種飼料組蟹腸的脂肪酶活性均最高,而肝胰腺脂肪酶活性均最低。

      從圖1可見:雜魚組蟹腸的淀粉酶活性顯著高于配合飼料組 (P<0.05),兩種飼料組蟹肝胰腺和胃的淀粉酶活性均無顯著性差異 (P>0.05);同種飼料組消化道不同部位的淀粉酶相比,配合飼料組蟹胃的淀粉酶活性最高,雜魚組蟹腸的淀粉酶活性最高,而兩種飼料組蟹肝胰腺的淀粉酶活性均最低。

      圖1 雜魚和配合飼料對(duì)中華絨螯蟹類胰蛋白酶、胃蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性的影響Fig.1 Effect of trash fish and formulated diet on activities of trypsin,pepsin,lipase and amylase in Chinese mitten crab E.sinensis

      3 討論

      3.1 以配合飼料替代雜魚對(duì)中華絨螯蟹生長(zhǎng)的影響

      本試驗(yàn)結(jié)果顯示,在中華絨螯蟹成蟹養(yǎng)殖中以配合飼料替代雜魚對(duì)其殼長(zhǎng)、殼寬、肝胰腺指數(shù)、性腺指數(shù)、出肉率及肌肉常規(guī)生化組成均無顯著性影響。表明本試驗(yàn)所使用的配合飼料和雜魚均能較好地滿足中華絨螯蟹生長(zhǎng)發(fā)育的營(yíng)養(yǎng)需求。闕有清等[9]用配合飼料替代雜魚養(yǎng)殖中華絨螯蟹231 d,其生長(zhǎng)發(fā)育的各項(xiàng)指標(biāo)也均無顯著性差異,但養(yǎng)成蟹可食部分脂肪酸的組成因飼料油脂成分的不同有一定差異。邱仁杰等[10]用3種不同油脂配比的配合飼料養(yǎng)殖中華絨螯蟹115 d,均未發(fā)現(xiàn)蟹生長(zhǎng)異常。林永賀等[11]和梁海鷗等[12]在青石斑魚 Epinephelus awoara和軍曹魚 Rachycentron canadum的養(yǎng)殖過程中,也發(fā)現(xiàn)以配合飼料替代雜魚后魚生長(zhǎng)的速度較快且肌肉品質(zhì)進(jìn)一步改善。上述研究表明,配合飼料配制科學(xué)、營(yíng)養(yǎng)全面,如果能正確投喂,完全可以用于養(yǎng)殖主要以鮮活餌料為食物來源的蟹或魚。朱曉鳴等[13]研究發(fā)現(xiàn),中華絨螯蟹對(duì)不同餌料具有一定的選食性,通常更偏食于動(dòng)物性餌料,特別是具有腥鮮味的動(dòng)物性餌料,這也是傳統(tǒng)的中華絨螯蟹養(yǎng)殖中一直以雜魚為主要餌料的重要原因。筆者在飼料配制的過程中特別關(guān)注了誘食劑的篩選和應(yīng)用,試驗(yàn)用配合飼料已具備和雜魚相似的誘食性。飼料的營(yíng)養(yǎng)水平?jīng)Q定了養(yǎng)殖動(dòng)物肌肉的營(yíng)養(yǎng)成分,兩種飼料蛋白質(zhì)含量差異較大,雜魚和配合飼料的蛋白質(zhì)分別占干質(zhì)量的74.98%和38.48%,用兩種飼料投喂中華絨螯蟹,其肌肉粗蛋白質(zhì)水平卻無顯著性差異,表明試驗(yàn)用配合飼料的蛋白質(zhì)水平及平衡的氨基酸組成滿足了中華絨螯蟹肌肉生長(zhǎng)對(duì)蛋白質(zhì)的需求,在此基礎(chǔ)上,再提高飼料蛋白質(zhì)水平,對(duì)中華絨螯蟹肌肉蛋白質(zhì)沉積不具正向效應(yīng)。雜魚組雌蟹和雄蟹的飼料系數(shù)分別比配合飼料組高2.54和2.52倍,根據(jù)雜魚 (2.65元/kg)和配合飼料的價(jià)格 (6.12元/kg)計(jì)算可得,用配合飼料替代雜魚養(yǎng)殖中華絨螯蟹成蟹,每生產(chǎn)1 kg雌蟹或雄蟹,可節(jié)約飼料成本1.64元或1.44元。

      3.2 以配合飼料替代雜魚對(duì)中華絨螯蟹消化酶活性的影響

      甲殼動(dòng)物消化酶活性取決于動(dòng)物的消化生理特性和所攝食的餌料,其中餌料營(yíng)養(yǎng)素的質(zhì)和量是影響甲殼動(dòng)物消化酶活性的關(guān)鍵因素[14-16]。江洪波等[17]發(fā)現(xiàn),餌料蛋白質(zhì)對(duì)中華絨螯蟹仔蟹的肝胰腺類胰蛋白酶具有顯著的促進(jìn)作用,并根據(jù)仔蟹類胰蛋白酶mRNA豐度的變化,指出蛋白質(zhì)對(duì)類胰蛋白酶活性的影響是通過基因轉(zhuǎn)錄水平的差異而實(shí)現(xiàn)。徐維娜等[18]研究發(fā)現(xiàn),飼料蛋白質(zhì)和脂肪水平顯著影響克氏原螯蝦 Procambarus clarkii腸道、肝胰腺的蛋白酶活性和脂肪酶活性,并隨著飼料蛋白質(zhì)水平的增加,克氏原螯蝦通過提高消化道內(nèi)蛋白酶的活性,促進(jìn)蛋白質(zhì)的消化吸收。Lee等[19]研究發(fā)現(xiàn),凡納濱對(duì)蝦Litopenaeus vanmamei攝食蛋白質(zhì)含量為30%的飼料時(shí),消化道內(nèi)蛋白酶的活性最高,高于或低于這個(gè)蛋白質(zhì)含量,蛋白酶的活性均降低。

      本試驗(yàn)結(jié)果顯示,配合飼料組蟹的胃類胰蛋白酶活性顯著高于雜魚組,而配合飼料的粗蛋白質(zhì)含量卻低于雜魚組。這與徐維娜等[18]對(duì)克氏原螯蝦的研究結(jié)果不一致。Le Vay等[20]對(duì)日本囊對(duì)蝦的研究發(fā)現(xiàn),配合飼料含有某些特殊的蛋白質(zhì),從而引起其幼體消化道類胰蛋白酶活性增加,這可能也是本試驗(yàn)中配合飼料組蟹胃的類胰蛋白酶活力顯著高于雜魚組的原因。楊麗麗等[8]對(duì)中華絨螯蟹幼蟹類胰蛋白酶的研究也得到與本研究相似的結(jié)果。

      本試驗(yàn)中,配合飼料組蟹的腸脂肪酶活性顯著高于雜魚組,可能是因?yàn)橹久富钚噪S飼料中脂肪含量的增加而增強(qiáng)。這與遲淑艷等[21]對(duì)凡納濱對(duì)蝦的研究結(jié)果相似。對(duì)比發(fā)現(xiàn),腸脂肪酶活性顯著高于肝胰腺中脂肪酶活性,這表明中華絨螯蟹脂肪酶主要來源于腸道,這與薛俊增等[22]的研究結(jié)果一致。本試驗(yàn)中,兩種飼料組蟹的肝胰腺和胃淀粉酶活性無顯著性差異,但雜魚組腸淀粉酶活性顯著高于配合飼料組,這與楊麗麗等[8]的研究結(jié)果不同,可能是因?yàn)槌尚泛陀仔废傅姆置谟幸欢ú町?也可能是因?yàn)殡s魚組淀粉酶活性隨著餌料蛋白質(zhì)水平的增加而升高[23]。

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      Effects of replacement of trash fish with formulated feed on growth and digestive enzyme activities in Chinese mitten crab Eriocheir sinensis

      YANG Zhi-gang,QUE You-qing,JI Lian-yuan,GUO Zi-hao,CHENG Yong-xu,ZENG Qi-tao

      (Key Laboratory of Freshwater Aquatic Genetic Resources,Ministry of Agriculture,College of Fisheries and Life Science,Shanghai Ocean University, Shanghai 201306,China)

      A feeding experiment with triplication for each feed was carried out for 180 days to elucidate the effects of replacement of trash fish with formulated feed on growth and digestive enzyme activity in Chinese mitten crab Eriocheir sinensis.Chinese mitten crab with initial body weight of(10.01±1.02)g were cultured in six 100 m2ponds separated by plastic net at a rate of 100 individuals per pond.At the end of the experiment,body weight,carapace length,carapace width,hepatopancreas index(HIS),gonad-somatic index(GSI)and dressed rate were measured,and muscle compositions and enzyme activities were determined.The results showed that there was no significant influence on body weight,carapace length,carapace width,HIS,GSI and dressed rate(P>0.05)in different diet treatments.No significant changes in moisture,and contents of muscular crude protein,crude fat and ash were found in different treatments(P>0.05),indicating that replacement of trash fish with formulated diets had no significant influence on growth of Chinese mitten crab(P>0.05).The crab fed the formulated diets had significantly higher trypsin activity in stomach and lipase activity in intestine than the crab fed the trash fish did(P<0.05), while the crab fed the trash fish showed significantly higher amylase activity in intestine than the crab fed the formulated diets did(P<0.05),without significant difference in digestive enzyme activity in other digestive organs in different treatments(P>0.05).

      Eriocheir sinensis;formulated diet;trash fish;growth;digestive enzyme activity

      S963

      A

      2012-10-23

      上海市科技興農(nóng)推廣項(xiàng)目 (滬農(nóng)科推字2011D-2-4號(hào));上海市教育委員會(huì)科研創(chuàng)新項(xiàng)目 (11YZ151);上海高校創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)(第二期)項(xiàng)目;上海高校知識(shí)服務(wù)平臺(tái)上海海洋大學(xué)水產(chǎn)動(dòng)物遺傳育種中心 (ZF1206);上海市中華絨螯蟹產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(D2010100208)

      楊志剛 (1973-),男,博士,副教授。E-mail:zgyang@shou.edu.cn

      成永旭 (1964-),男,教授,博士生導(dǎo)師。E-mail:chengyongxucrablab@hotmail.com

      2095-1388(2013)03-0293-05

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