不同生境及采樣部位對(duì)南方紅豆杉活性成分含量的影響

于少帥，孫啟武，田勝尼，柏培磊，邵劍文，張小平，①

(1. 安徽師范大學(xué)安徽省重要生物資源保護(hù)與利用研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室生物環(huán)境與生態(tài)安全安徽省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，安徽蕪湖241000;2. 中國林業(yè)科學(xué)研究院林業(yè)研究所國家林業(yè)局林木培育重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京100091;3. 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，安徽合肥230036)

植物次生代謝產(chǎn)物與人類生活關(guān)系密切，在醫(yī)藥、食品、輕化工等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛，因而次生代謝物的種類、代謝途徑及代謝機(jī)制等問題的探討越來越受到研究者關(guān)注。植物的次生代謝是植物在長期進(jìn)化中與環(huán)境(生物和非生物)相互作用的結(jié)果，次生產(chǎn)物在植物提高自身保護(hù)和生存競(jìng)爭力、協(xié)調(diào)與環(huán)境的關(guān)系等方面有重要作用，其產(chǎn)生和變化比初生代謝產(chǎn)物與環(huán)境有著更強(qiáng)的相關(guān)性和對(duì)應(yīng)性［1－2］。此外，植物次生代謝產(chǎn)物的產(chǎn)生和分布通常具有產(chǎn)地、生長期和器官組織等方面的特異性［3－4］。因此，對(duì)植物次生物質(zhì)與環(huán)境的關(guān)系及其在植物體內(nèi)分布規(guī)律的研究對(duì)于植物資源合理、有效的利用具有重要的意義。

紫杉醇及其類似物是紅豆杉屬(Taxus Linn.)植物的次生代謝產(chǎn)物，具有獨(dú)特的抗癌特性，已成為國內(nèi)外研究熱點(diǎn)。紅豆杉屬植物中紫杉醇含量變異較大，相關(guān)的研究也較多。柏培磊等［3］認(rèn)為:不同產(chǎn)地南方紅豆杉〔Taxus wallichiana var. mairei (Lemée et Lévl.)L. K. Fu et Nan Li〕枝葉中紫杉醇含量的差異與其生長環(huán)境的差異有關(guān);蘇建榮等［5］的研究結(jié)果表明:溫度和光照等因子對(duì)云南紅豆杉(T. yunnanensis W. C. Cheng et L. K. Fu)中紫杉醇含量的影響較大;程廣有等［6］對(duì)東北紅豆杉(T. cuspidate Sieb. et Zucc.)的研究結(jié)果表明:東北紅豆杉不同群體的紫杉醇含量差異顯著，與環(huán)境因子存在相關(guān)性;常醉等［7］認(rèn)為:東北紅豆杉中紫杉醇及其類似物含量在植株中有明顯的分布規(guī)律;柯春婷等［8］的研究結(jié)果顯示:在福建產(chǎn)南方紅豆杉中，紫杉醇含量與氣候因子的相關(guān)性不顯著;楊逢建等［9］認(rèn)為:栽培南方紅豆杉的生長發(fā)育及其紫杉醇含量與環(huán)境因子存在相關(guān)性。盡管有不少研究者對(duì)紫杉醇含量的變異機(jī)制進(jìn)行了研究，但由于采樣的局限性及人為管理的影響，難以獲得紫杉醇含量變異與生境因子相關(guān)性的明確研究結(jié)論。

南方紅豆杉是中國特有植物，探究不同生境對(duì)南方紅豆杉中紫杉醇等次生產(chǎn)物含量的影響及其在不同組織部位的分布規(guī)律，對(duì)于全面了解紅豆杉屬植物中抗癌成分的分布規(guī)律及其與生境因子的關(guān)系、合理開發(fā)紅豆杉資源等具有重要意義。為明確生境因子(坡向、海拔、氣候和土壤等)對(duì)南方紅豆杉活性成分含量的影響，作者對(duì)不同生境南方紅豆杉枝葉中紫杉醇、7－木糖紫杉醇和三尖杉寧堿含量進(jìn)行分析，探討其與生境因子的關(guān)系;并對(duì)南方紅豆杉植株不同部位及冠層中3 種成分的含量進(jìn)行了比較，以闡明它們?cè)诓煌鞴僦械姆植家?guī)律，為南方紅豆杉資源的合理開發(fā)應(yīng)用及栽培管理提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求于2011 年4 月對(duì)浙江、福建和江西的7 個(gè)南方紅豆杉天然種群生境進(jìn)行調(diào)查，記錄群落內(nèi)的物種種類、數(shù)量及相關(guān)生態(tài)學(xué)參數(shù)并采集樣品;采集部位為枝頭部位的枝葉及距地面約1.5 m處的樹皮，每一樣地選擇32 株樣株;每個(gè)樣地隨機(jī)采集0 ～40 cm 深土樣3 份。各樣地的基本概況見表1。

表1 供試南方紅豆杉產(chǎn)地基本概況1)Table 1 Basic status of location of Taxus wallichiana var. mairei (Lemée et Lévl.)L. K. Fu et Nan Li tested1)

依據(jù)研究目的的不同，在7 個(gè)產(chǎn)地中分別選擇特殊樣地和部位進(jìn)行樣品采集。在福建建陽和漳平以及江西景德鎮(zhèn)分別選擇不同坡向(陰坡和陽坡)采集枝葉樣品，每一樣地選擇15 株樣株，株齡均超過100 a;在浙江龍泉及江西宜豐和景德鎮(zhèn)分別選擇不同坡位(高、中、低)采集南方紅豆杉枝葉樣品，每一樣地選擇14 株樣株，株齡均超過100 a;在福建建陽和浙江武義分別采集莖皮和枝葉樣品，每一樣地選擇株齡相近的樣株10 株;在福建明溪選擇同一植株分別采集不同冠層(高、低)的枝葉樣品，每一樣地選擇株齡相近的樣株6 株。

儀器:美國安捷倫1200 高效液相色譜系統(tǒng)(包括G1322A 型脫氣機(jī)、G1312A 型二元泵、G1329A－ALS型自動(dòng)進(jìn)樣器、G1316A－TCC 型柱溫箱和G1365DMWD 型紫外檢測(cè)器);KQ－250E 型超聲波清洗儀(昆山市超聲儀器有限公司);DHG－9246A 型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司);SENCO－R型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海申生科技有限公司);DFY－250型搖擺式高速粉碎機(jī)(溫嶺市林大機(jī)械有限公司);MILLI－Q 超純水純化系統(tǒng)(美國 Millipore 公司)。

試劑:紫杉醇對(duì)照品購自桂林暉昂生化藥業(yè)有限責(zé)任公司(產(chǎn)品編號(hào)JF20090301，純度99.9%);7－木糖紫杉醇和三尖杉寧堿對(duì)照品由中國林業(yè)科學(xué)研究院林業(yè)研究所提供;甲醇和乙腈為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。

1.2 方法

1.2.1 HPLC 色譜分析條件 采用 Ultimate C18色譜柱(4.6 mm × 250 mm，5 μm)。 流動(dòng)相為 V(甲醇)∶V(乙腈)∶V(水)= 23∶36∶41，流速 1.0 mL·min－1，檢測(cè)波長227 nm，進(jìn)樣量10 μL，柱溫箱溫度30 ℃。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 分別精確稱取紫杉醇、7－木糖紫杉醇和三尖杉寧堿對(duì)照品 2.500 0、4.687 5 和3.125 0 mg，分別用甲醇溶解并定容，配制成質(zhì)量濃度分別為 0.100 0、0.187 5 和0.125 0 mg·mL－1的對(duì)照品母液;取各對(duì)照品母液適量，用甲醇分別稀釋為原質(zhì)量濃度的1/2、1/4、1/8、1/16 和1/32，按上述 HPLC色譜條件進(jìn)樣分析。以峰面積為縱坐標(biāo)Y、對(duì)照品質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)X 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，獲得3 個(gè)對(duì)照品的線性回歸方程。紫杉醇對(duì)照品的回歸方程為 Y =38 554.432X－6.138(r=0.999 6)，線性范圍 3.1 ～100.0 μg·mL－1;7－木糖紫杉醇對(duì)照品的回歸方程為Y=4 892.879X+5.407(r=0.999 9)，線性范圍 5.9 ～187.5 μg·mL－1;三尖杉寧堿對(duì)照品的回歸方程為Y = 11 066.200X + 17.434(r = 0.999 5)，線性范圍3.9 ～125.0 μg·mL－1。

1.2.3 供試液的制備和色譜分析 將樣品于40 ℃烘干并粉碎，精確稱取2.0 g粉末，加入V(丙酮)∶V(乙酸乙酯)= 1∶1 混合液 30 mL，超聲提取 1 h，過濾，殘?jiān)赐ㄔ偬崛? 次，過濾;合并濾液，于40 ℃減壓蒸干;殘?jiān)?0 mL 二氯甲烷和20 mL 水，萃取3 次;合并二氯甲烷相，4 0 ℃減壓蒸干，所得浸膏用10 mL 甲醇溶解，經(jīng) 0.22 μm 微孔濾膜過濾，所得供試液按照上述方法進(jìn)行HPLC 色譜分析。每份樣品重復(fù)測(cè)3 次，以紫杉醇對(duì)照品為外標(biāo)確定3 種成分峰，紫杉醇、7－木糖紫杉醇和三尖杉寧堿的保留時(shí)間分別為 23.380、14.334 和 20.631 min。

1.2.4 方法學(xué)考察

1.2.4.1 精密度實(shí)驗(yàn) 精確稱取采自福建明溪的枝葉樣品粉末2.0 g，按上述方法制成供試液，采用上述色譜條件連續(xù)進(jìn)樣測(cè)定5 次。紫杉醇、7－木糖紫杉醇和三尖杉寧堿含量的 RSD 分別為1.87%、0.26%和0.26%，表明本實(shí)驗(yàn)方法精密度良好。

1.2.4.2 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 精確稱取采自福建明溪的枝葉樣品粉末2.0 g，按上述方法制成供試液，采用上述色譜條件每隔2 h 進(jìn)樣測(cè)定1 次(供試液低溫避光保存)，共進(jìn)樣測(cè)定6 次。紫杉醇、7－木糖紫杉醇和三尖杉寧堿含量的 RSD 分別為1.99%、0.50%和0.36%，表明樣品供試液在低溫避光條件下保存12 h 基本穩(wěn)定。

1.2.4.3 重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn) 精確稱取采自福建明溪的枝葉樣品粉末5 份，每份2.0 g，按上述方法制成供試液，在上述色譜條件下進(jìn)樣檢測(cè)，紫杉醇、7－木糖紫杉醇和三尖杉寧堿含量的RSD 分別為1.32%、2.49%和2.16%，表明本研究方法重現(xiàn)性良好。

1.2.5 土壤理化指標(biāo)測(cè)定 參照文獻(xiàn)［10－11］的方法對(duì)土壤電導(dǎo)率、pH 值、全N 含量、硝態(tài)N 含量、全P含量、速效P 含量、速效K 含量及土壤有機(jī)質(zhì)含量進(jìn)行測(cè)定。土壤各項(xiàng)理化指標(biāo)的測(cè)定由安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院完成。

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 13.0 軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析、多重比較和Pearson 相關(guān)性分析(P=0.05)。

2 結(jié)果和分析

2.1 采自不同坡向的南方紅豆杉枝葉中3 種成分含量的分析

對(duì)采自福建建陽和漳平以及江西景德鎮(zhèn)不同坡向樣地的南方紅豆杉枝葉中紫杉醇、7－木糖紫杉醇和三尖杉寧堿含量的分析結(jié)果見表2?？傮w上看，生長于陽坡的南方紅豆杉枝葉中3 種成分的含量明顯高于生長于陰坡的植株。其中，生長于陽坡的植株中紫杉醇和7－木糖紫杉醇含量分別為陰坡的1.5 ～2.3 倍和1.9 ～2.7 倍，在不同坡向間差異顯著(P＜0.05);生長于陽坡的植株中三尖杉寧堿含量為陰坡的1.1 ～2.3 倍，差異不顯著(P＞0.05)。由于不同坡向間光照條件的差異最為明顯，因而推測(cè)南方紅豆杉枝葉中紫杉醇等成分的積累對(duì)光照條件較為敏感。

表2 采自不同坡向的南方紅豆杉枝葉中3 種成分含量的比較(±SE)Table 2 Content comparison of three compounds in branch and leaf of Taxus wallichiana var. mairei (Lemée et Lévl.)L. K. Fu et Nan Li collected from different slope aspects(±SE)

表2 采自不同坡向的南方紅豆杉枝葉中3 種成分含量的比較(±SE)Table 2 Content comparison of three compounds in branch and leaf of Taxus wallichiana var. mairei (Lemée et Lévl.)L. K. Fu et Nan Li collected from different slope aspects(±SE)

產(chǎn)地Location坡向Slope aspect 3 種成分的含量/mg·g－1 Content of three compounds紫杉醇Taxol 7－木糖紫杉醇7-xylosyltaxol三尖杉寧堿Cephalomannine福建建陽 Jianyang，F(xiàn)ujian 陰坡 Shady aspect 0.048 2±0.000 4 0.180 5±0.003 3 0.064 8±0.001 4陽坡 Sunny aspect 0.073 7±0.000 4 0.441 2±0.003 2 0.098 2±0.001 5福建漳平 Zhangping，F(xiàn)ujian 陰坡 Shady aspect 0.032 8±0.000 4 0.106 7±0.002 6 0.064 7±0.001 1陽坡 Sunny aspect 0.068 5±0.000 5 0.292 5±0.003 7 0.069 2±0.001 6江西景德鎮(zhèn) Jingdezhen，Jiangxi 陰坡 Shady aspect 0.048 8±0.000 3 0.237 1±0.002 6 0.094 3±0.004 2陽坡 Sunny aspect 0.111 6±0.000 4 0.446 2±0.002 7 0.220 0±0.001 1

2.2 采自不同坡位的南方紅豆杉枝葉中3 種成分含量的分析

對(duì)采自浙江龍泉及江西宜豐和景德鎮(zhèn)不同坡位樣地的南方紅豆杉枝葉中紫杉醇、7－木糖紫杉醇和三尖杉寧堿含量的分析結(jié)果見表3。由表3 可見:在不同坡位生長的南方紅豆杉枝葉中3 種成分的含量均有一定差異，但差異不顯著(P＞0.05)。在浙江龍泉，生長于低坡位的南方紅豆杉中3 種成分的含量均最高，生長于中坡位的南方紅豆杉中3 種成分的含量均最低;而在江西宜豐及景德鎮(zhèn)，南方紅豆杉中3 種成分的含量總體上隨坡位降低逐漸提高。由于不同坡位主要體現(xiàn)為海拔的差異，因而推測(cè)南方紅豆杉枝葉中3 種成分含量隨海拔升高呈一定程度的遞減趨勢(shì)。

表3 采自不同坡位的南方紅豆杉枝葉中3 種成分含量的比較Table 3 Content comparison of three compounds in branch and leaf of Taxus wallichiana var. mairei(Lemée et Lévl.)L. K. Fu et Nan Li collected from different slope positions

2.3 不同產(chǎn)地南方紅豆杉枝葉中3 種成分的含量及其與環(huán)境因子的相關(guān)性分析

對(duì)來源于不同產(chǎn)地的南方紅豆杉枝葉中紫杉醇、7－木糖紫杉醇和三尖杉寧堿含量的比較結(jié)果見表4，3 種成分的含量與產(chǎn)地環(huán)境因子的相關(guān)性分析結(jié)果見表5。

由表4 可見:在7 個(gè)樣地中，福建建陽和江西景德鎮(zhèn)產(chǎn)南方紅豆杉枝葉中紫杉醇含量較高，江西宜豐和浙江武義產(chǎn)的枝葉中紫杉醇含量較低;浙江武義和福建建陽產(chǎn)南方紅豆杉枝葉中7－木糖紫杉醇含量較高，浙江龍泉產(chǎn)的枝葉中7－木糖紫杉醇含量較低;福建明溪和江西景德鎮(zhèn)產(chǎn)枝葉中三尖杉寧堿含量較高，福建建陽產(chǎn)枝葉中三尖杉寧堿含量次之，江西宜豐產(chǎn)枝葉中三尖杉寧堿含量最低;總體上看，來源于福建建陽和江西景德鎮(zhèn)的南方紅豆杉枝葉中3 種成分的含量相對(duì)較高，產(chǎn)自浙江龍泉和江西宜豐的枝葉中3種成分的含量相對(duì)較低(表4)。單因素方差分析結(jié)果表明:來源于不同產(chǎn)地的南方紅豆杉枝葉中3 種成分的含量差異顯著(P＜0.05)，其中紫杉醇含量的差異達(dá)到極顯著水平(P＜0.01)。

表4 不同產(chǎn)地南方紅豆杉枝葉中3 種成分含量的比較(±SE)1)Table 4 Content comparison of three compounds in branch and leaf of Taxus wallichiana var. mairei (Lemée et Lévl.)L. K. Fu et Nan Li from different locations(±SE)1)

表4 不同產(chǎn)地南方紅豆杉枝葉中3 種成分含量的比較(±SE)1)Table 4 Content comparison of three compounds in branch and leaf of Taxus wallichiana var. mairei (Lemée et Lévl.)L. K. Fu et Nan Li from different locations(±SE)1)

1)同列中不同的小寫字母表示差異顯著(P=0.05)Different small letters in the same column indicate the significant difference (P=0.05).

產(chǎn)地Location 3 種成分的含量/mg·g－1 Content of three compounds紫杉醇Taxol 7－木糖紫杉醇7-xylosyltaxol三尖杉寧堿Cephalomannine浙江武義 Wuyi，Zhejiang 0.042 1±0.001 5bc 0.372 5±0.003 2a 0.065 7±0.001 4d浙江龍泉 Longquan，Zhejiang 0.051 0±0.002 6ab 0.103 8±0.019 6b 0.064 9±0.002 1d福建建陽 Jianyang，F(xiàn)ujian 0.061 0±0.001 2a 0.310 9±0.003 3ab 0.081 5±0.001 4c福建明溪 Mingxi，F(xiàn)ujian 0.053 9±0.001 7a 0.207 6±0.004 8ab 0.133 0±0.002 1a福建漳平 Zhangping，F(xiàn)ujian 0.050 7±0.001 5ab 0.199 6±0.003 1ab 0.066 9±0.001 4d江西宜豐 Yifeng，Jiangxi 0.034 4±0.006 3c 0.283 1±0.013 4ab 0.059 0±0.002 7d江西景德鎮(zhèn) Jingdezhen，Jiangxi 0.060 6±0.001 1a 0.259 2±0.012 2ab 0.124 5±0.002 7b

表5 南方紅豆杉枝葉中3 種成分的含量與環(huán)境因子的相關(guān)性分析1)Table 5 Correlation analysis between three compound contents in branch and leaf of Taxus wallichiana var. mairei (Lemée et Lévl.)L. K. Fu et Nan Li and environmental factors1)

相關(guān)性分析結(jié)果表明:三尖杉寧堿含量與土壤中全N 含量呈極顯著的負(fù)相關(guān)性(P＜0.01)，與土壤有機(jī)質(zhì)含量呈顯著的負(fù)相關(guān)性(P＜0.05)，與其他因子的相關(guān)性均不顯著;而紫杉醇和7－木糖紫杉醇含量與所有因子的相關(guān)性均未達(dá)到顯著水平。

2.4 南方紅豆杉不同部位及不同冠層中3 種成分含量的分析

南方紅豆杉莖皮和枝葉以及高冠層枝葉和低冠層枝葉中3 種成分的含量分析結(jié)果見表6。結(jié)果表明:莖皮中紫杉醇、7－木糖紫杉醇和三尖杉寧堿的含量明顯高于枝葉，分別約為枝葉的 1. 4、2. 5 和 2. 1倍，莖皮與枝葉中3 種成分含量的差異達(dá)到顯著水平(P＜0.05)。高冠層枝葉中3 種成分的含量均高于低冠層枝葉，其中高冠層枝葉中紫杉醇含量為低冠層枝葉的2.0 倍;不同冠層枝葉中紫杉醇、7－木糖紫杉醇含量差異顯著(P＜0.05)，而三尖杉寧堿含量差異不顯著(P＞0.05)。

表6 南方紅豆杉不同部位及不同冠層中3 種成分含量的比較(±SE)Table 6 Content comparison of three compounds in different parts and in different tree canopy layers of Taxus wallichiana var. mairei(Lemée et Lévl.)L. K. Fu et Nan Li (±SE)

表6 南方紅豆杉不同部位及不同冠層中3 種成分含量的比較(±SE)Table 6 Content comparison of three compounds in different parts and in different tree canopy layers of Taxus wallichiana var. mairei(Lemée et Lévl.)L. K. Fu et Nan Li (±SE)

1)1:莖皮Bark;2:枝葉Branch and leaf;3:高冠層枝葉Branch and leaf in high layer of canopy;4:低冠層枝葉 Branch and leaf in low layer of canopy.

樣號(hào)1)No. 1)3 種成分的含量/mg·g－1 Content of three compounds紫杉醇Taxol 7－木糖紫杉醇7-xylosyltaxol三尖杉寧堿Cephalomannine 1 0.081 9±0.000 5 0.460 2±0.003 9 0.134 3±0.001 6 2 0.058 2±0.000 4 0.180 5±0.003 3 0.064 8±0.001 4 3 0.048 8±0.000 3 0.237 1±0.002 6 0.094 3±0.004 2 4 0.024 7±0.000 6 0.217 6±0.003 5 0.087 6±0.001 6

野外調(diào)查發(fā)現(xiàn):南方紅豆杉天然植株的株高一般約為20 m，其高冠層處于群落空間的第2 層或第3層，林隙較大、遮光率較小;而其低冠層處于群落空間的較低層次，林隙較小、遮光率較大，加之其他伴生植物的影響，其低冠層枝葉所接受的光照明顯低于高冠層枝葉。王昌偉等［12］認(rèn)為:全光照條件下南方紅豆杉中次生產(chǎn)物的含量高于30%遮光條件，全光照條件下南方紅豆杉多年生植株中次生產(chǎn)物含量增加。由此可見，光照因素可能是導(dǎo)致南方紅豆杉低冠層枝葉中次生產(chǎn)物含量低于高冠層枝葉的原因之一。

3 討論和結(jié)論

上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:生境條件對(duì)南方紅豆杉枝葉中次生代謝產(chǎn)物的含量有明顯的影響;生長在陽坡的南方紅豆杉枝葉中紫杉醇、7－木糖紫杉醇和三尖杉寧堿的含量明顯高于陰坡，表明南方紅豆杉中次生代謝物的含量與光照條件呈一定程度的正相關(guān)。常醉等［7］的研究結(jié)果表明:東北紅豆杉冠層陰面枝中的紫杉醇和三尖杉寧堿含量低于陽面枝;鮑思偉等［13］認(rèn)為:光照強(qiáng)度對(duì)紫杉醇含量有明顯影響，較強(qiáng)的光照(全日照或適度遮陽)有利于紫杉醇積累，光照強(qiáng)度過低則會(huì)產(chǎn)生抑制作用;但Kelsey 等［14］的研究結(jié)果顯示:生長于陰坡的短葉紅豆杉(Taxus brevifolia Nutt.)針葉和樹皮中紫杉醇和三尖杉寧堿含量顯著高于陽坡，約為陽坡的1.8 倍。賀利中等［15］的研究結(jié)果表明:南方紅豆杉1 年生幼苗喜陰，其生長需要適度蔭蔽，在全光照條件下容易造成苗木灼傷;Pridnya 等［16］認(rèn)為:紅豆杉雖為耐陰植物，但在林隙或稀疏的冠層下生長更佳，過于蔭蔽的環(huán)境則會(huì)抑制其幼苗生長并增加成樹死亡率，最終導(dǎo)致其種群衰退。由此可見，較強(qiáng)的光照雖然有利于南方紅豆杉次生產(chǎn)物的合成和積累，但對(duì)其植株的生長發(fā)育則有一定的抑制作用，因而，針對(duì)紅豆杉屬不同種類應(yīng)進(jìn)一步摸索出適宜的光照栽培條件。

海拔對(duì)植物的生長及產(chǎn)品品質(zhì)均有一定的影響［17］。本研究結(jié)果顯示:來源于不同產(chǎn)地不同坡位的南方紅豆杉枝葉中紫杉醇、7－木糖紫杉醇和三尖杉寧堿的含量隨坡位升高呈現(xiàn)一定的遞減趨勢(shì)，而產(chǎn)地的海拔高度與紫杉醇、7－木糖紫杉醇和三尖杉寧堿的含量呈微弱的負(fù)相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)分別為－0.089、－0.521 和－0.363，表明低海拔有利于南方紅豆杉枝葉中3 種成分的合成及積累。程廣有等［6］的研究結(jié)果表明:東北紅豆杉中紫杉醇含量與海拔呈負(fù)相關(guān)(r=－0.028)，與本研究結(jié)論基本一致。海拔的變化導(dǎo)致生境中溫度、降水及光照等因子發(fā)生相應(yīng)改變，從而影響植株中次生產(chǎn)物的代謝。

相關(guān)性分析結(jié)果表明:土壤中全N 及有機(jī)質(zhì)含量與南方紅豆杉枝葉中三尖杉寧堿的含量有極顯著或顯著的負(fù)相關(guān)性，也證實(shí)了“全N 及有機(jī)質(zhì)含量對(duì)植物的生長有重要作用［18］”這一結(jié)論。

此外，在南方紅豆杉植株的不同部位(不同冠層以及莖皮和枝葉)紫杉醇、7－木糖紫杉醇和三尖杉寧堿的含量有明顯差異。提示在進(jìn)行南方紅豆杉活性成分含量分析時(shí)應(yīng)注意采樣部位的統(tǒng)一。

綜上所述，南方紅豆杉中紫杉醇、7－木糖紫杉醇和三尖杉寧堿含量與環(huán)境因子均有一定的相關(guān)性，但相關(guān)性不顯著。由此無法歸納出某一環(huán)境因子對(duì)南方紅豆杉活性成分含量影響程度的大小，而環(huán)境因子也可能僅是影響其次生代謝物含量的因素之一，因此，有必要結(jié)合分子生物學(xué)繼續(xù)進(jìn)行更深層次的研究。此外，根據(jù)上述研究結(jié)果，為保證南方紅豆杉植株的正常生長及其有效成分的積累，建議可在其幼苗栽培過程中進(jìn)行適度遮陽處理，且隨幼苗生長逐漸縮短遮陽時(shí)間，同時(shí)適當(dāng)降低栽培土壤中全N 和有機(jī)質(zhì)含量。對(duì)于南方紅豆杉天然種群，如果群落空間低層次的植物過于稀疏，可以通過人工種植一些占據(jù)群落空間較低層次的灌木或草本植物來增加群落較低層的蔭蔽程度以促進(jìn)紅豆杉幼苗的生長;對(duì)于郁閉度較大的喬木林，如華東地區(qū)常見的毛竹－南方紅豆杉(Phyllostachys edulis－Taxus wallichiana var. mairei)群落，可以采取適度砍伐毛竹等措施減少群落郁閉度、提高透光率，有利于成年南方紅豆杉植株的生長及有效成分的合成及積累。

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