復(fù)方乳酶生膠囊貯存環(huán)境與有效期的研究

馬楚強(qiáng) 謝春華

（廣東省中山市博愛醫(yī)院藥劑科，廣東 中山528400）

復(fù)方乳酶生膠囊貯存環(huán)境與有效期的研究

馬楚強(qiáng) 謝春華

（廣東省中山市博愛醫(yī)院藥劑科，廣東 中山528400）

背景本文主要介紹了活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)法對我院自制制劑復(fù)方乳酶生膠囊中主要成分乳酶生活菌在不同貯存環(huán)境下有效期的測定，從而選出該制劑的最佳貯存環(huán)境并確定該制劑的使用期限，為臨床合理用藥提供保障。目的采用活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)法對我院自制制劑復(fù)方乳酶生膠囊中乳酶生活菌在不同貯存環(huán)境下有效期的測定，從而選出該制劑的最佳貯存環(huán)境并確定該制劑的使用期限，為臨床合理用藥提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。方法通過正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，用活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)法對復(fù)方乳酶生膠囊中乳酶生活菌含量在不同貯存環(huán)境下按貯存時間進(jìn)行活菌含量測定，再用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法檢查測定結(jié)果后進(jìn)行數(shù)據(jù)回歸計(jì)算，并制作貯存時間（環(huán)境）-活菌數(shù)關(guān)系表。結(jié)果經(jīng)過以上方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，對比國家藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，發(fā)現(xiàn)該制劑在不同貯存環(huán)境下，藥品的有效期也有所不同。結(jié)論根據(jù)實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)及貯存成本核算，復(fù)方乳酶生膠囊的最佳貯存條件為：陰涼處（10～20℃）干燥貯存；有效期宜標(biāo)定為：①常溫下干燥貯存6個月或②陰涼處（10～20℃）干燥貯存9個月。

復(fù)方乳酶生膠囊；活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)法；貯存環(huán)境；有效期

復(fù)方乳酶生膠囊是我院自制的復(fù)方制劑（注冊文號：粵藥制字H20050486），內(nèi)含乳酶生（桂林南藥股份有限公司，國藥準(zhǔn)字H45020220）0.15g，干酵母（浙江東成藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字H33020502）0.12g，維生素B1 0.06g，維生素B2 0.015g，葡萄糖酸鈣0.20g，以及輔料等。因其制備過程簡單，易于機(jī)械化生產(chǎn)，在治療小兒厭食、消化不良、腹瀉、腹脹等療效確切、且不良反應(yīng)少，故深受患者及家屬的好評。但因其中主藥成分是生物活菌，貯存期效較短，且對貯存環(huán)境要求比較高，因此本次課題主要是對之進(jìn)行乳酶生含量測定及其貯存條件與穩(wěn)定性關(guān)系的研究，為臨床使用提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，以便更好地為醫(yī)療服務(wù)。

1 儀器與試劑

我院自制制劑復(fù)方乳酶生膠囊（注冊文號：粵藥制字H20050486），生產(chǎn)日期：2012年02月10日，生產(chǎn)批號：12021001。沙保羅營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。儀器分析天平（上海天平儀器廠，TG328A型）。光學(xué)顯微鏡。水平流凈化工作臺（吳山市生化凈化設(shè)備廠，SW-CJ-1A）。旋渦混合器（上海，XW-80A）。生化恒溫培養(yǎng)箱（上海博迅，SPX-150B）。恒溫冰箱（東莞昊昕，JXT-40-120）

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 干燥失重

按干燥失重測定法（2010年版中國藥典附錄2.1ⅧL）測定，減失重量不得過5.0%[1]。

2.2 裝量差異

取膠囊劑20粒，除去包裝，分別精密稱定每粒內(nèi)容物的重量，求出內(nèi)容物的裝量與平均裝量。每粒的裝量差異應(yīng)小于標(biāo)示裝量的± 8%，且超出裝量差異限度的膠囊劑不得多于2粒，并不得有超出裝甚差異限度1倍者[1]。

2.3 其他應(yīng)符合膠囊劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定（(《中國藥典》2010年版二部附錄IP）[1]。

2.4 穩(wěn)定性研究

將復(fù)方乳酶生膠囊剛出品（不超過5d）的樣品分成3份（每份50粒），分別在室溫（常溫）、陰涼處（10～20℃）和冷藏條件（2～8℃）下干燥貯存（貯存起始日期為2012年2月12日），在120d、180d、210d、240d、270d、300d、330d時取樣（在三份中各隨機(jī)取出三粒）檢驗(yàn)：取復(fù)方乳酶生膠囊內(nèi)容物用注射用水稀釋1萬倍，以便控制計(jì)數(shù)菌落在100～300之間（方法：各取復(fù)方乳酶生膠囊3粒，精密稱重；在超凈工作臺上將每份3粒復(fù)方乳酶生膠囊內(nèi)容物完全地倒入試管中，用移液管各自精密加入注射用水9mL，在旋渦混合器上混勻，各精密量取3mL置100mL容量瓶中，精密加入注射用水至刻度，混勻，精密量取1mL加入50mL容量瓶中，精密加入注射用水至刻度，混勻）[6]。精密量取0.5mL加入90mm培養(yǎng)皿中，加沙保羅營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基約15mL，混勻，冷卻凝固后倒置于培養(yǎng)箱按《中圍藥典》2010年版二部“微生物限度檢查”項(xiàng)下培養(yǎng)[1，2]。每一種不同貯存環(huán)境下的膠囊都做三份，分別標(biāo)記為常溫1、常溫2、常溫3；陰涼1、陰涼2、陰涼3；冷藏1、冷藏2、冷藏3。48小時后計(jì)數(shù)：應(yīng)在沙保羅營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基形成暗紅色至粉紅色菌落，邊緣整齊，瓊脂表面下菌落呈橢圓或晶體狀。按上述方法檢查外觀、進(jìn)行微生物培養(yǎng)、觀察乳酶生活菌及測定菌落數(shù)，對九個培養(yǎng)基分別進(jìn)行記數(shù)。在最后一次取樣培養(yǎng)計(jì)數(shù)將數(shù)據(jù)匯總，用方差統(tǒng)計(jì)的方法計(jì)算出其平均值，并制作貯存時間（環(huán)境）-活菌數(shù)關(guān)系表（表1）[5，6]。

3 結(jié) 果

見表1。

表1 貯存時間（環(huán)境）-活菌數(shù)關(guān)系

4 討 論

按《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》（二部）第六冊（人民衛(wèi)生出版社）要求，乳酶生每克所含活菌數(shù)不少于1000萬個[2]。我院自制制劑復(fù)方乳酶生膠囊（注冊文號：粵藥制字H20050486）每粒中含乳酶生0.15g，其所含活菌數(shù)應(yīng)不少于150萬個。根據(jù)表1數(shù)據(jù)，采用方差計(jì)算的方法驗(yàn)證，取其平均值作為實(shí)驗(yàn)結(jié)果：在室溫（常溫）下180d復(fù)方乳酶生膠囊質(zhì)量（160.67萬個活菌）還符合要求，但乳酶生活菌的菌落數(shù)明顯降低，在210天時乳酶生活菌的菌落數(shù)已不符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求。在陰涼處（10～20℃）和冷藏條件（2～8℃）下貯存270d復(fù)方乳酶生膠囊中乳酶生活菌數(shù)（分別為：156.67萬個活菌和163.00萬個活菌）還符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求，但活菌數(shù)也出現(xiàn)明顯降低，陰涼處（10～20℃）貯存比冷藏（2～8℃）貯存降低較為明顯，在300d時乳酶生活菌的菌落數(shù)已不符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求。

5 結(jié) 論

綜上所述，我院自制制劑復(fù)方乳酶生膠囊（注冊文號：粵藥制字H20050486）在不同的貯存環(huán)境中（主要是貯存溫度不同），其有效期也不同：在陰涼處（10～20℃）和冷藏條件（2～8℃）下貯存明顯優(yōu)于常溫下貯存，冷藏條件（2～8℃）下貯存相對優(yōu)于陰涼處（10～20℃）貯存，故復(fù)方乳酶生膠囊最好的貯存環(huán)境為冷藏條件（2～8℃）下干燥貯存。但考慮到復(fù)方乳酶生膠囊并不是大批量生產(chǎn)（跟據(jù)臨床用藥需要適量生產(chǎn)），且在臨床治療中使用比較快（一般2～3個月即可用完），在常溫下干燥貯存已基本能滿足復(fù)方乳酶生膠囊的貯存要求，在陰涼處（10～20℃）和冷藏條件（2～8℃）下干燥貯存（冷藏條件下貯存會增加藥品成本）能夠使藥品的有效期明顯地延長。參考實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)及貯存成本，所以復(fù)方乳酶生膠囊的最佳貯存條件為：陰涼處（10～20℃）干燥貯存；有效期宜標(biāo)定為：①常溫下干燥貯存6個月或②陰涼處（10～20℃）干燥貯存9個月。

[1] 國家藥典委員會.中國藥典》(二部)[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社, 2005.

[2] 國家藥典委員會編.中國藥典臨床用藥須知(化學(xué)藥與生物制品卷)[S].北京:人民衛(wèi)生出版社,2005.

[3] 衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)[S].二部.第六冊.北京:人民衛(wèi)生出版社,2005.

[4] 歐定宏,李育大,容秀枝.消化散的穩(wěn)定性研究[J].廣東藥學(xué),2004,14(1):23.

[5] 張懷琴,趙德運(yùn),孔祥武,等..雙酶消化散的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].河北醫(yī)藥,2009,31(9):1135.

[6] 馬楚強(qiáng),謝春華.復(fù)方乳酶生膠囊活菌質(zhì)量的標(biāo)定[J].中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用,2011,5(17):56-57.

[7] 余覺清,江靜全,歐定宏.消化散療效的實(shí)驗(yàn)室研[J].廣東藥學(xué),2002,12(1):57.

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1671-8194（2013）15-0099-02