乙型肝炎HBeAg陰性前S1抗原和HBV-DNA定量檢測的相關(guān)性研究

阮水琴

（湖北省咸寧市通山縣人民醫(yī)院檢驗科，湖北 咸寧 437600）

乙型肝炎HBeAg陰性前S1抗原和HBV-DNA定量檢測的相關(guān)性研究

阮水琴

（湖北省咸寧市通山縣人民醫(yī)院檢驗科，湖北 咸寧 437600）

目的 探討乙型肝炎HBeAg陰性患者前S1抗原與HBV-DNA定量檢測的相關(guān)性。方法 收集2010年12月至2013年1月我院的242例門診及住院乙型肝炎HBeAg陰性患者為實驗組，收集健康人群48例為對照組，分別對其前S1抗原與HBV-DNA定量檢測，分析前S1抗原與HBV-DNA定量檢測的相關(guān)性，并對兩組結(jié)果進行比較。結(jié)果 實驗組患者HBV-DNA出現(xiàn)陽性者109例（45.0%），前S1抗原出現(xiàn)陽性者104例（42.9%）；對照組前S1抗原與HBV-DNA定量檢測均為陰性，兩組之間，差異顯著（P＜0.05）。經(jīng)Kappa檢驗，前S1抗原和HBV-DNA檢驗具有良好一致性（Kappa=0.56）；經(jīng)相關(guān)性分析，二者呈顯著正相關(guān)（r2=0.724，P＜0.05）。結(jié)論 前S1抗原與HBV-DNA呈正相關(guān)，Pre-S1Ag定量檢測，可以反映HBeAg陰性的乙型肝炎患者是否有病毒復(fù)制。

乙型肝炎；HBeAg陰性患者；前S1抗原；HBV-DNA

乙型肝炎具有較強傳染性，且臨床根治率低，嚴重危害人類健康。其早期臨床診斷是穩(wěn)定病情進展，控制傳染率的重要條件；長期以來，HBsAg陽性或HBeAg陽性一直被作為HBV感染、復(fù)制及致病的重要標志[1]。近年研究表明，血清中HBsAg、HBeAg陰性，不能完全排除HBV感染，在血清HBsAg陰性時也可檢出HBV-DNA陽性，因此對急、慢性乙型肝炎患者的預(yù)后判斷尚有不足之處?，F(xiàn)對收集的乙型肝炎HBeAg陰性患者242例與健康人群48例前S1抗原與HBV-DNA分別進行定量檢測，探討二者的相關(guān)性，為臨床診斷和治療及了解病情提供更重要的依據(jù)?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究以本院 2010年12月至2013年1月收治的242例乙型肝炎HBeAg陰性患者為實驗組，其中男131例，女111例。年齡15～65歲，平均年齡（44.6±9.7）歲。以同期入院體檢的48例健康人群為對照組，其中男25例，女23例，年齡16～58歲，平均年齡（43.2±8.8）歲。

1.2 檢測方法

所有研究對象均取空腹靜脈血5mL，4℃ 3000 r/min離心15min，分離血清，并于-20 ℃條件下保存，待檢。

1.2.1 前S1抗原的檢測

用ELISA試劑盒的方法檢測實驗組與對照組的前S1抗原。嚴格按照試劑盒說明書操作，對照組與實驗組各設(shè)2個孔，每孔各加50μL生理鹽水，空白組設(shè)1個孔，加100μL生理鹽水。除空白孔，其他反應(yīng)孔加待檢樣品50μL，混勻，37℃孵育1h。重復(fù)洗滌反應(yīng)孔，顯色，酶標儀測OD值。根據(jù)OD值確定檢測結(jié)果。

1.2.2 HBV-DNA的檢測

采用熒光定量PCR的方法檢測HBV-DNA。樣本經(jīng)處理后，將已處理的擴增試劑與樣品加入毛細管，將毛細管放入熒光PCR議內(nèi)進行檢測，進行PCR擴增，HBVDNA定量＞103copies/mL判斷為HBV DNA陽性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS17.0軟件包處理數(shù)據(jù)；采用χ2檢驗比較組間差異性，采用Kappa檢驗比較 PreS1抗原與HBV-DNA檢測結(jié)果的一致性；采用Pearson相關(guān)進行相關(guān)性檢驗；P＜0.05表示有顯著差異。

2 結(jié) 果

實驗組患者HBV-DNA出現(xiàn)陽性者109例（45.0%），前S1抗原出現(xiàn)陽性者104例（42.9%），見表1；對照組前S1抗原與HBV-DNA定量檢測均為陰性，兩組之間，差異顯著（P＜0.05）。經(jīng)Kappa檢驗，前S1抗原和HBV-DNA檢驗具有良好一致性（Kappa=0.56）； 經(jīng)相關(guān)性分析，二者呈顯著正相關(guān)（r2=0.724，P＜0.05）。

表1 兩種檢測方法檢測結(jié)果比較

3 討 論

乙型肝炎是一種嚴重危害人類身心健康的常見乙類傳染病之一，其主要傳染源是慢性患者和病毒攜帶者，傳染性強并貫穿于疾病的整個過程；可經(jīng)過多種方式進行傳播，以血液傳播為其主要傳播途徑，此外，還可經(jīng)過母嬰傳播、性接觸傳播以及密切接觸傳播。

感染乙型肝炎病毒患者的血清中發(fā)現(xiàn)存在三種病毒顆粒：完整的HBV顆粒、球狀空殼顆粒和棒狀顆粒[2]。完整的HBV顆粒因其內(nèi)含有具有復(fù)制、繁殖能力的乙型肝炎病毒DNA，具有傳染性。而球狀空殼顆粒和棒狀顆粒內(nèi)均不含DNA，不具有自我復(fù)制繁殖的能力，故二者均不具有傳染性。PreS1 主要位于Dane顆粒表面，其C端和PreS2 N末端相連接，而N末端是游離的。正常肝細胞膜上存在能直接吸附乙型肝炎病毒的PreS1受體。

HBV血清標志物中，HBsAg為HBV的外膜蛋白，外膜蛋白由HBsAg、前-S1、前-S2 3個部分組成。HBV是一種嗜肝細胞病毒，HBV感染肝細胞的第1步是侵入肝細胞，然后才能在肝細胞內(nèi)復(fù)制繁殖[3]。HBV前S抗原可協(xié)助HBV附著和侵入肝細胞，機體感染HBV后最早對前-S抗原發(fā)生免疫應(yīng)答，而前-S2抗原在血清中出現(xiàn)較早，并在恢復(fù)期很快消失，有助于急性乙型肝炎的早期診斷和預(yù)后觀察。前S1抗原是HBV完整病毒成分，存在于完整的病毒顆粒及管狀顆粒表面，與HBV復(fù)制關(guān)系密切，前-S2不僅存在于病毒顆粒表面，亦可出現(xiàn)在非傳染性的球形顆粒表面，具有調(diào)節(jié)對S蛋白的免疫應(yīng)答及控制病毒顆粒裝配等功能，而促進病毒的免疫清除。

在受檢者血清中HBeAg陰性者PreS1抗原和HBV-DNA為陽性的原因可能有以下幾個方面[4]：①HBV的變異使HBeAg表達受阻而呈現(xiàn)陰性。②急性發(fā)病時，HBeAg未能及時表達。③急性感染經(jīng)藥物治療后，HBeAg轉(zhuǎn)陰，但并未抑制病毒合成。④PreS1比HBeAg更敏感，而易于檢測。

PreS1具有較強的免疫原性，由這種多肽引發(fā)的免疫應(yīng)答，包括體液免疫和細胞免疫，有利于乙型肝炎病毒的有效清除及疾病的恢復(fù)。故PreS在血清中的水平可作為判斷HBV感染及復(fù)制、疾病恢復(fù)情況的重要指標。本研究發(fā)現(xiàn)，PreS1與HBV-DNA之間存在較好的相關(guān)性，PreS1能夠在一定程度上敏感地反映體內(nèi)病毒感染和復(fù)制情況，是一種新的能較好反映 HBV感染及復(fù)制的血清標志物。但并不能完全替代HBV-DNA檢測，可作為一種重要的輔助檢測手段。

[1] 馬艷春.乙型肝炎患者前-S抗原與HBV DNA和HBV標志物的相關(guān)性探討[J].中國肝臟病雜志(電子版),2010,2(2):27-29.

[2] 劉成忠,肖傳宇,侯文華,等. HBeAg陰性乙型肝炎患者前S1、前C區(qū)變異、HBV DNA載量的相關(guān)性研究[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志, 2011,32(7):766-767,769.

[3] 馬洪奎.乙型肝炎病毒HBeAg與前S1抗原的相關(guān)性[J].包頭醫(yī)學(xué), 2012,26(2):85-86.

[4] 周紅波,周美英.乙型肝炎HBeAg陰性患者前S1抗原與HBV-DNA定量檢測的相關(guān)性探討[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué),2012,30(3):312-314.

R512.6+2

B

1671-8194（2013）33-0081-02